海南地不容生物碱抑制肿瘤细胞增殖及构效关系解析

目的研究海南地不容(Stephania hainanensis H.S.Lo et Y.Tsoong)生物碱对人肝癌细胞Hep G-2、乳腺癌细胞MCF-7、胃癌细胞SGC-7901增殖的影响,筛选出有效的抗肿瘤化合物以及其敏感细胞株;分析其生物碱的构效关系。方法采用MTT法检测不同浓度的海南地不容生物碱对人肝癌细胞Hep G-2、乳腺癌细胞MCF-7、胃癌细胞SGC-7901增殖的抑制率;通过查阅国内外相关文献,分析海南地不容生物碱抗肿瘤活性的基本构效关系。结果MTT结果显示荷包牡丹碱、氧化克班宁、去甲荷包牡丹碱和克班宁对人肝癌Hep G-2、乳腺癌MCF-7和胃癌SGC-7901细胞的增值分别具有不同程度的剂量依赖性的抑制作用,各给药组分吸光度值与空白对照组比具有显著性差异(P<0.01),与阳性对照比较无明显统计学差异(P>0.05);海南地不容生物碱结构中的1,2-亚甲二氧基、N-亚甲基等取代基以及其化学结构的平面性对其抗肿瘤活性有重要影响。结论海南地不容中具有明显抗肿瘤作用的生物碱为荷包牡丹碱、氧化克班宁、去甲荷包牡丹碱和克班宁,其敏感细胞株均为乳腺癌细胞MCF-7;通过分析海南地不容生物碱的结构和抗肿瘤活性的关系,初步明确了其抗肿瘤活性可能与其结构易于抑制DNA拓扑异构酶和诱导细胞凋亡有关。     

甘草黄酮对S180、H22荷瘤小鼠红细胞膜和肿瘤细胞膜Na^＋，K^＋-ATPase及Ca^2＋，Mg^2＋-ATPase活性的影响

目的观察甘草黄酮对S180、H22荷瘤小鼠红细胞膜和肿瘤细胞膜Na^ ，K^ -ATPse及Ca^2 ，Mg^2 -ATPase活性的影响。方法荷瘤小鼠分为治疗组(高剂量、中剂量、低剂量)和对照组(生理盐水组、环磷酰胺组)，分别测定各组红细胞膜和肿瘤细胞膜的Na^ ，K^ -ATPase及Ca^2 ，Mg^2 -ATPase活性。结果甘草黄酮可明显恢复红细胞膜Na^ ，K^ -ATPase及Ca^2 ，Mg^2 -ATPase活性；对肿瘤细胞膜上活性异常升高的Na^ ，K^ -ATPase及Ca^2 ，Mg^2 -ATPase有显著的抑制作用。结论甘草黄酮调节红细胞膜和肿瘤细胞膜Na^ ，K^ -ATPase及Ca^2 ，Mg^2 -ATPase活性功能可能是其抗肿瘤作用机理之一。     

甲苯二异氰酸酯氧化损伤作用机制的研究

研究了在不同浓度下甲苯二异氰酸（TDI）对小鼠脂质过氧化物及有关酶活性影响。用分光光度法检测了小鼠血、肺和肝中MDA及GSH含量和SOD活性变化的变化，为阐明甲苯二异氰酸酯对小鼠组织损害机制提供实验依据。在1／2LC50、1／4LC50染毒组中MDA含量明显上升，SOD活性明显下降，GSH含量有所降低。对比雌雄差异，雌鼠在1／8LC50、1／4LC50染毒组中低剂量组受氧化损伤程度低于雄鼠，1／2LC50染毒组中雌鼠和雄鼠受氧化损伤程度的性别差异并不十分显著。     

草问荆总生物碱对小鼠脑单胺氧化酶-B活性的影响

背景从天然药物中寻求安全有效的镇静安定类药物为逐年增加的神经精神类疾病的治疗提供了新的思路.前期研究发现草问荆总生物季哂辛己玫恼蚓舶捕ㄗ饔?目的研究草问荆总生物碱对小鼠脑单胺氧化酶-B活性的影响以揭示草问荆总生物碱对中枢神经系统抑制作用的作用机制.设计以实验动物为观察对象的随机对照实验.单位哈尔滨商业大学药物研究所博士后科研工作站.材料实验于2002-03/2003-01在黑龙江中医药大学药理研究室完成.药物选用草问荆总生物碱;烟肼酰胺;选用昆明种小白鼠100只,体质量(20±2)g,雌雄各半.方法草问荆总生物碱对小鼠脑单胺氧化酶-B活性实验小白鼠随机分为生理盐水对照组,不同剂量(15 mg/kg,30 mg/kg,45 mg/kg,60 mg/kg)的草问荆总生物碱组,每组10只.给药30 min后,处死小鼠.采用紫外分光光度法测定单胺氧化酶-B的活性.草问荆总生物碱对烟肼酰胺抑制小鼠脑单胺氧化酶-B活性实验小白鼠随机分为生理盐水对照组,烟肼酰胺组,烟肼酰胺加草问荆总生物碱不同剂量组(20 mg/kg+15 mg/kg,20 mg/kg+30 mg/kg,20 mg/kg+45 mg/kg,20 mg/kg+60mg/kg).每组10只.给药30min后,立即采用脊髓脱臼法处死小鼠.采用紫外分光光度法测定单胺氧化酶-B的活性.主要观察指标小鼠脑单胺氧化酶-B活力,计算单胺氧化酶-B相对活力和单胺氧化酶-B活力提高(或抑制)百分率.结果给药前后动物数均为每组10只,无异常或死亡现象.①草问荆总生物碱对小鼠脑单胺氧化酶-B活性的影响草问荆总生物碱15 mg/kg,30 mg/kg,45 mg/kg,60 mg/kg组单胺氧化酶-B活力均高于生理盐水对照组(15.57±1.14),(16.78±1.10),(18.16±0.50),(22.72±1.26),(13.74±0.81)mkat/g.②草问荆总生物碱对烟肼酰胺抑制小鼠脑单胺氧化酶-B活力的影响草问荆总生物碱可对抗烟肼酰胺抑制小鼠脑单胺氧化酶-B活性作用,当草问荆总生物碱45 mg/kg时可完全对抗烟酰胺的抑制作用(酶活力抑制百分率为-4.62%),当草问荆总生物碱60mg/kg时则可将其抑制作用翻转为激活作用(酶活力抑制百分率为-77.92%).结论草问荆总生物碱可显著提高小鼠脑单胺氧化酶-B的活性,能够对抗单胺氧化酶抑制剂烟肼酰胺抑制单胺氧化酶-B的作用.大剂量草问荆总生物碱(60 mg/kg)可将烟肼酰胺对单胺氧化酶-B的抑制作用翻转为激活作用.     

海星化学成分的研究进展

海洋无脊椎动物海星中含有大量结构独特的具有生物活性的代谢产物,主要以甾体化合物及其皂苷的形式存在,且具有明显的生理活性和药理作用。本文综述了国内外近年来海星中的甾体化合物及其皂苷的研究进展,为海星的进一步利用以及开发奠定了基础。     

线粒体对生精细胞凋亡的调控

近年来线粒体参与细胞凋亡的发生越来越引起人们的重视。一些学者发现,线粒体在生精细胞的凋亡中也发挥非常重要的作用。Narimon等通过小鼠Apaf-1基因敲除发现,有5％的小鼠能发育成熟。在成年鼠中,大脑发育正常;在雄性成年鼠中,精原细胞的降解导致了精子的减少,说明Cytc介导的细胞凋亡途径,对神经的发育不是必要的,而对生殖的发育却是必需的。Li等通过皮下注射的方式给予大鼠可卡因的实验说明了cytc从线粒体中释放,进而激活caspas．9和caspase-3,在可卡因诱导的生精细胞凋亡中起重要作用。Matsuki等将小鼠睾丸暴露于42℃的热水中15min,然后用TUNEL和Westernblot方法检测发现．生精细胞凋亡比未经处理的增多,而释放到细胞浆中的Cytc也增多。分离的生精细胞在42℃培养1h后,结果相同,但在支持细胞（Sertoli细胞）却未见Cytc的增多。     

养血升白口服液升高细胞机理研究

本文通过观察养血升口服液对白细胞减少小鼠脾细胞增殖，白介素Ⅱ活性及雄性大鼠血清睾酮浓度的影响来探讨其升高白细胞机理。     

野西瓜总生物碱诱导SGC-7901细胞凋亡及周期改变的研究

目的 通过体外抗肿瘤实验探讨野西瓜中总生物碱诱导人胃癌 SGC-7901 细胞凋亡作用及其可能机制。方法 通过 MTT 法、SRB 法观察野西瓜总生物碱对 SGC-7901 细胞的抑制率，采用荧光倒置显微镜观察细胞形态学变化，并应用流式细胞仪检测细胞凋亡和周期。结果 MTT 法测得野西瓜总生物碱的 IC₅₀ 为 142.895 μg/mL，SRB 结果显示，野西瓜总生物碱主要通过抑制肿瘤细胞生长而起抗肿瘤作用，其 GI₅₀ 为 139.062 μg/mL，与 MTT 结果基本一致。野西瓜总生物碱作用于 SGC-7901 细胞 48 h 后，荧光显微镜下观察到细胞核染色质发生聚集，细胞核固缩，出现凋亡小体。流式细胞仪结果显示，不同浓度野西瓜总生物碱作用 72 h 后，SGC-7901 细胞周期出现显著的变化，G₀/G₁ 期比例降低，S期比例升高，呈现S期阻滞的现象，而且 G₁ 期前出现明显的亚二倍体峰，即凋亡峰，并且随着给药剂量的增加，凋亡率显著升高。结论 野西瓜总生物碱诱导 SGC-7901 细胞凋亡是其抗肿瘤作用机制之一。     

藻红蛋白诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡与细胞周期的关系

目的 研究藻红蛋白 (PE) 对人乳腺癌 MCF-7 细胞的增殖抑制效果和诱导凋亡作用。方法 采用 MTT 法和 SRB 法检测 PE 对人乳腺癌 MCF-7 细胞增殖的抑制作用。采用倒置显微镜、荧光显微镜 Hoechst 33258 染色观察 MCF-7 细胞凋亡细胞形态。Annexin V-FITC/PI 双荧光染色观察细胞凋亡过程中特异的磷脂酰丝氨酸 (PS) 外翻情况确定凋亡的出现。流式细胞仪观察 PE 对 MCF-7 细胞周期的影响。结果 PE 对 MCF-7 细胞有较强的生长抑制作用，并且呈一定的剂量依赖性，其 72 h 的 IC₅₀ 值为 147.82 μg/mL，GI₅₀ 值为 109.76 μg/mL。倒置显微镜下与基本贴壁的饱满、边沿清晰的对照组细胞比较，给药组细胞有明显的细胞变粗糙，贴壁细胞减少的现象，而且浓度越高，作用时间越长，悬浮细胞越多。荧光显微镜下可见各给药组 MCF-7 细胞出现不同程度深染亮点的细胞核质，染色质浓集固缩并伴有凋亡小体形成。激光共聚焦显微镜下可见给药组细胞膜被染成绿色，细胞核被染成红色。流式细胞仪显示 PE 可阻滞 MCF-7 细胞从 S 期进入 G₂/M 期，促使细胞凋亡。结论 PE 对 MCF-7 细胞有较强的抑制作用，可使其凋亡，其作用机制与周期阻滞有关。     

抗肿瘤生物碱的构效关系

生物碱类化合物在自然界中分布广泛，并具有明显的抗肿瘤活性，所以抗肿瘤生物碱的构效关系越来越受到人们的关注。总结抗肿瘤生物碱的构效关系，有利于发现活性基团，进行结构改造，为合理设计药物分子提供依据。总结几种已研究明确的抗肿瘤生物碱的构效关系。由于目前对一些生物碱确切的抗肿瘤作用基团还不是十分的清楚，所以进一步探明生物碱的活性基团，将为今后从天然药物中寻找更优越的抗肿瘤新药提供重要的指导作用。