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目的探讨二甲双胍下调谷胱甘肽S转移酶(GSTpi)和拓扑异构酶Ⅱα(TopIIα)对顺铂(cDDP)耐药的宫颈癌细胞系SiHa/cDDP增殖的抑制作用。方法构建SiHa/cDDP耐药细胞株并进行鉴定。CCK8法测定cDDP对Si Ha和Si Ha/c DDP细胞的抑制率;绘制SiHa、SiHa/cDDP细胞的生长曲线,按Patterson公式计算Si Ha和Si Ha/c DDP细胞的群体倍增时间;观察c DDP对SiHa、SiHa/cDDP细胞形态的影响;CCK8法测定不同浓度二甲双胍对SiHa和SiHa/cDDP细胞的抑制率;细胞迁移实验、Transwell细胞侵袭实验分别检测二甲双胍对SiHa、SiHa/cDDP细胞侧向迁移能力及纵向迁移能力的影响;RT-qPCR法检测SiHa/cDDP细胞较SiHa细胞GSTpi、TopIIαmRNA的表达变化,以及二甲双胍对SiHa/cDDP细胞作用后GSTpi、TopIIαm RNA的表达变化。结果 cDDP对SiHa、SiHa/cDDP细胞的抑制作用与cDDP的浓度正相关,相同浓度下对SiHa/cDDP细胞的抑制率明显低于对SiHa细胞的抑制率(P0.01);SiHa、SiHa/cDDP细胞的群体倍增时间分别为(30.69±0.58)、(38.39±1.05)h,比较差异具有统计学意义(P0.001);顺铂对SiHa细胞形态的影响较大,而对SiHa/cDDP细胞基本没有影响;二甲双胍对SiHa、SiHa/cDDP细胞生长均有抑制作用,抑制率与二甲双胍浓度正相关,相同浓度下对SiHa/cDDP细胞的抑制率明显高于对SiHa细胞的抑制率(P0.01);与SiHa细胞相比,二甲双胍能更明显抑制SiHa/cDDP细胞迁移和侵袭(P0.01);RT-qPCR结果显示,与SiHa细胞相比,SiHa/cDDP中GSTpi、TopIIαm RNA的表达明显升高(P0.01、0.05),且二甲双胍能抑制SiHa/cDDP细胞中GSTpi、Top IIαm RNA的表达(P0.01)。结论二甲双胍能通过下调GSTpi、Top IIα的表达抑制Si Ha/c DDP的增殖、侵袭和迁移。 相似文献
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