吉西他滨对白血病细胞系HL-60细胞的抑制作用

目的观察吉西他滨对HL-60细胞增殖、凋亡及C-myc蛋白表达的影响,探讨吉西他滨对白血病细胞的作用及其与c-myc间的关系,为其作为新的抗白血病药物提供实验依据。方法体外培养HL-60细胞,吉西他滨及阿糖胞苷处理细胞0、24、48、72 h后倒置显微镜下观察细胞生长状态及形态学改变;锥虫蓝拒染法计数活细胞,计算细胞存活率,观察吉西他滨对细胞生长的影响;应用流式细胞仪进行细胞周期分析、检测凋亡率;免疫组织化学染色法检测C-myc蛋白表达改变。结果24 h时不同质量浓度吉西他滨组均显著抑制细胞存活,随药物质量浓度增加存活率减小,各组间比较有显著性差异（P〈0.01）;各组随作用时间延长存活率降低,在48、72 h抑制作用显著强于24 h;G0/G1期细胞比例升高而S期细胞比例降低,细胞阻滞在G0/G1期;凋亡率为（17.4 f1±4.88）%,较空白组（4.29±3.07）%和阿糖胞苷对照组（8.16±3.43）%显著升高（Pa〈0.01）;免疫组织化学染色示吉西他滨组C-myc蛋白在细胞中表达阳性平均积分为42.00±8.54,较空白组（248.33±20.74）和阿糖胞苷组（102.67±12.06）显著降低（Pa〈0.01）。结论吉西他滨对HL-60细胞生长及C-myc蛋白表达有明显抑制作用;能使细胞周期发生重新分布,将细胞阻滞在G0/G1期,从而抑制细胞增殖,并可诱导白血病细胞凋亡;在抑制HL-60细胞增殖、诱导其凋亡及抑制C-myc表达方面,吉西他滨的作用显著强于相同剂量的阿糖胞苷,有望成为新药物用于白血病的治疗。     

米托蒽醌单独及其联合美罗华治疗恶性淋巴瘤的疗效探讨

目的：探讨米托蒽醌单独及其联合美罗华治疗非霍奇金恶性淋巴瘤(NHL)的疗效。方法随机选取该院2007年10月—2013年10月收治的40例非霍奇金恶性淋巴瘤患者,抽签随机分为对照组和观察组,每组各20例。对照组患者给予含米托蒽醌化疗方案治疗,观察组采用含米托蒽醌化疗方案联合美罗华治疗,比较两组治疗效果。结果观察组治疗有效率95.0%较对照组70.0%明显较高,差异有统计学意义(P<0.05),观察组2年、5年的无复发生存率(RFS)和总生存率(OS)均高于对照组;观察组不良反应率16.36%较对照组32.73%显著较低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论含米托蒽醌化疗方案联合美罗华能有效治疗非霍奇金恶性淋巴瘤,提高无复发生存率和总生存率,且未引起其他不良反应症状,耐受性较好,临床综合效果较为显著。     

甲氨蝶呤治疗小儿白血病发生排泄延迟的影响因素分析

目的研究甲氨蝶呤治疗小儿白血病发生排泄延迟的影响因素。方法 30例小儿白血病患儿,分为正常排泄组(25例)及延迟排泄组(5例)。回顾性分析其病历资料,探讨其影响因素。结果给药后正常排泄组1、12、24及48 h后血药浓度均显著低于延迟排泄组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。甲氨蝶呤治疗后排泄延迟发生率为16.67%。<3岁和给药剂量大的患儿发生排泄延迟率显著多于其他患儿,差异具有统计学意义(P<0.05)。伴有呕吐、饮食量下降及高危患儿发生排泄延迟率显著多于无呕吐、饮食量正常及标危患儿,差异具有统计学意义(P<0.05)。排泄延迟发生率与患儿年龄、疾病危险度、饮食量、是否呕吐具有显著相关性(P<0.05)。结论饮食量、呕吐、给药剂量、疾病危险度及患儿年龄是影响甲氨蝶呤治疗小儿白血病后排泄延迟发生率的重要因素。临床治疗时应充分考虑各种危险因素,降低排泄延迟发生风险。     

吉西他滨对HL-60细胞c-myc基因表达的影响及其诱导细胞凋亡作用

本研究探讨吉西他滨对HL-60细胞c-myc基因表达及细胞凋亡的影响及吉西他滨应用于白血病治疗的可行性。体外培养人白血病细胞系HL-60细胞,以不同浓度吉西他滨作用于HL-60细胞,用RT-PCR方法检测细胞c-myc mRNA表达的变化;以Western blot方法检测细胞C-MYC蛋白表达水平;原位酶标记法(TUNEL法)检测细胞凋亡情况。结果表明,1.0μg/ml吉西他滨作用于HL-60细胞12、24、36、48小时后,不同程度地抑制HL-60细胞c-myc mRNA的表达,并具有时间依赖性,其最适作用时间为24小时,与阿糖胞苷(Ara-C)组及空白对照组比较,抑制作用差异有统计学意义(p0.05)。1.0μg/ml吉西他滨作用于HL-60细胞24、48、72小时后,C-MYC蛋白表达水平明显下降,于48小时抑制作用最明显,抑制率为94.16%,方差分析显示,各时间点吉西他滨组与空白对照组和Ara-C组比较,差异均有统计学意义(p0.01);吉西他滨作用24小时组、48小时组及72小时组组间比较,也有显著性差异(p0.01)。1.0μg/ml吉西他滨作用于HL-60细胞24小时后,出现明显的诱导细胞凋亡作用,阳性率83.67%,与空白对照组(阳性率3.00%)和Ara-C组(阳性率10.67%)比较差异均有统计学意义(p0.01)。结论:吉西他滨对HL-60细胞c-myc基因及C-MYC蛋白表达有显著的抑制作用,能够诱导HL-60细胞凋亡,其抑制及诱导凋亡作用强于阿糖胞苷,提示吉西他滨可能作为白血病治疗的新选择。     

短发夹状RNA真核表达载体对HL-60细胞生存素基因表达的影响及诱导凋亡作用

最近研究发现,白血病细胞凋亡受阻与生存素(survivin)的过度表达有关.为此,我们设计了survivin特异性短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达载体,利用脂质体转染急性粒细胞白血病细胞株HL-60细胞,检测转染前后细胞survivin基因mRNA和蛋白表达以及凋亡情况,探讨以survivin为靶点,将RNA干扰(RNA interference,RNAi)用于白血病基因治疗的可行性.     

盐酸吉西他滨对K562细胞增殖、凋亡及bcr/abl mRNA表达的影响

目的 观察盐酸吉西他滨对K562细胞增殖、凋亡及bcr/abl基因表达的影响,探讨盐酸吉西他滨用于慢性粒细胞白血病急变期治疗的可行性. 方法 采用水溶性四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测盐酸吉西他滨对K562细胞增殖的影响,采用凋亡的原位酶标记检测(TUNEL)法检测盐酸吉西他滨对K562细胞凋亡的影响,采用半定量RT-PCR技术检测盐酸吉西他滨作用于K562细胞后bcr/abl融合基因mRNA表达变化. 结果 0.1 mg/L、1.0 mg/L 、10.0 mg/L盐酸吉西他滨分别作用K562细胞12 h、24 h、48 h、72 h 后,K562细胞增殖受到抑制,抑制作用随质量浓度及时间增加而增强,但48 h和72 h比较无显著性差异,10.0 mg/L吉西他滨组作用K562细胞48 h抑制率达(29.3±0.008)%.吉西他滨组对K562细胞的抑制作用明显强于同质量浓度同时间的阿糖胞苷组,二者比较有显著性差异(P<0.01).TUNEL实验结果 显示10.0 mg/L吉西他滨作用于K562细胞48 h,凋亡率为15.3%,明显高于阿糖胞苷组 3.7%(P<0.05)和空白对照组2.0%(P<0.05).RT-PCR结果 显示10 mg/L吉西他滨作用48 h对K562细胞bcr/abl融合基因mRNA的表达有明显抑制作用,与同剂量阿糖胞苷组比较无显著性差异.结论 盐酸吉西他滨对K562细胞有一定的增殖抑制及促凋亡作用,且具有剂量和时间依赖性.10 mg/L吉西他滨能够明显下调慢性粒细胞白血病bcr/abl融合基因mRNA表达,有望联合应用于慢性粒细胞白血病急变期的治疗.     

沙利度胺联合CHOP方案治疗外周T细胞淋巴瘤的临床研究

目的探究沙利度胺片联合CHOP方案治疗外周T细胞淋巴瘤的临床疗效。方法选取2015年9月—2016年9月郑州颐和医院收治的外周T细胞淋巴瘤患者53例,按照随机数表法随机分为对照组(27例)和治疗组(26例)。对照组给予CHOP方案治疗:第1天静脉注射注射用环磷酰胺750 mg/m~2;注射用硫酸长春新碱1.4 mg/m~2;盐酸表柔比星注射液50 mg/m~2;同时第1~5天口服醋酸泼尼松片,10 mg/d。治疗组在对照组基础上口服沙利度胺片,起始剂量为50 mg/次,2次/d,每周剂量增加50 mg/次直至200 mg/次。两组均以21 d为1个疗程,共治疗8个疗程。观察两组的临床疗效,比较两组的精氨酸酶1(Arg-1)、血管内皮生长因子(VEGF)、诱生型一氧化氮合成酶(iNOS)水平和不良反应情况。结果治疗后,对照组和治疗组的总有效率分别为62.96%、84.62%,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。治疗后,治疗组Arg-1、VEGF、iNOS水平均显著下降,同组治疗前后比较差异有统计学意义(P0.05);且治疗组这些观察指标的下降程度明显优于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。对照组和治疗组骨髓抑制发生率分别为55.56%、19.23%,胃肠道不良反应发生率分别为59.26%、19.23%,肝脏损害发生率分别为37.03%、26.92%,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。结论沙利度胺片联合CHOP方案治疗外周T细胞淋巴瘤具有较好的临床疗效,可降低Arg-1、VEGF、iNOS水平,安全性较好,具有一定的临床推广应用价值。     

吉西他滨联合长春瑞滨和地塞米松在复发性非霍奇金淋巴瘤治疗中的临床价值分析

目的:分析治疗复发性非霍奇金淋巴瘤采用地塞米松、吉西他滨、长春瑞滨联合使用的临床效果.方法:随机抽取在我院接受治疗的复发性非霍奇金淋巴瘤患者24例,给予地塞米松、吉西他滨、长春瑞滨进行治疗,经过1年的随访分析治疗的效果.结果:全部患者经过治疗,总有效率、白细胞发生率、血小板发生率、胃肠道反应发生率、肝肾功能损害发生率、贫血发生率均能得到有效改善,不良反应发生率相对于以往的经典化疗方案较低.结论:对复发性非霍奇金淋巴瘤治疗选用吉西他滨、长春瑞滨、地塞米松三种药物联合治疗的效果显著,能够改善病情,同时将不良反应发生率减少,在临床上值得推广.     

沙利度胺联合CHOP方案治疗86例非特异性外周T细胞淋巴瘤的临床研究

目的:研究沙利度胺联合CHOP方案治疗86例非特异性外周T细胞淋巴瘤的临床效果.方法:从2015年5月～2016年5月于我院接受临床治疗的非特异性外周T细胞淋巴瘤患者中随机抽选86例,将其平均分成观察组与对照组,分别给予沙利度胺联合CHOP方案治疗以及单独CHOP方案治疗.对比两组治疗前后的VEGF、Arg-1、iNOS水平以及总有效率.结果:与治疗前相比,两组VEGF、Arg-1、iNOS水平均有明显下降;与对照组相比,观察组VEGF、Arg-1、iNOS水平下降程度明显较大;观察组总有效率(88.37％),明显高于对照组(62.79％);观察组不良反应发生率为2.33％,明显高于对照组的18.60％,P<0.05.结论:给予非特异性外周T细胞淋巴瘤患者沙利度胺联合CHOP方案进行临床治疗,能有效改善机体各项生化指标,且有利于提升其治疗有效性.