ERK/MAPK信号通路在牙周膜干细胞成骨分化过程中的时空效应性变化

目的探讨牙周膜干细胞成骨分化进程中ERK/MAPK信号通路表达水平的变化,以及它对牙周膜干细胞成骨分化的调控作用。方法通过单克隆法获得人源性的牙周膜干细胞,分别用DMEM培养基、成骨诱导培养液处理牙周膜干细胞7、14、21d后收集细胞,提取总蛋白,通过Western Blot的方法检测ERK/MAPK通路的变化;分别用DMEM培养基、成骨诱导液、成骨诱导液+ERK抑制剂U0126处理牙周膜干细胞21d,通过茜素红染色的方法检测PDLSCs的成骨分化能力的改变;并通过分光光度计对茜素红染色结果进行定量分析。结果 DMEM组和成骨诱导组中,牙周膜干细胞胞内磷酸化ERK(P-ERK)的表达水平呈现先上升后下降的趋势,在诱导第14d达到峰值,在21d表达水平下降。在诱导第7d和第14d,成骨诱导组牙周膜干细胞胞内P-ERK/ERK的表达水平比值均高于DMEM组,具有显著统计学差异(P<0.05)。在第21d时,DMEM组牙周膜干细胞胞内P-ERK/ERK的表达水平比值略高于成骨诱导组,但无统计学差异(P>0.05)。ERK的抑制剂U0126的加入抑制牙周膜干细胞的成骨向分化过程中矿化结节的产生。结论 ERK/MAPK信号通路参与牙周膜干细胞的成骨向分化调控,它在牙周膜干细胞成骨分化过程中的表达随着时间的发展呈非线性变化。     

内科住院患者全天在院率下降的原因分析及对策

目的探讨内科住院患者全天在院率下降原因及对策,为开展针对性护理、医院管理及相关人员提供参考依据。方法自行制定量表,按便利抽样原则对笔者所在科室2010年10月～2011年10月755例住院患者进行问卷调查,总结分析有效问卷706份,并进行统计学分析。结果本科患者全天在院率仅为58%。原因主要为病情病种的因素、反感住院环境（包括环境选择权、健康权、安宁权、审美权不能得到满足）、工作压力、家庭照护的需要和调整、医保自付费用比例及其他因素。结论加强人文护理,修正适应新形势下的护理管理思路,改善住院环境,尊重患者及家属环境权及选择权,引起医保决策领导者重视,对于提升住院患者在院率,提高医疗环节质量意义重大。     

癌症患者照顾者益处发现的研究进展

癌症是威胁人类健康的最主要疾病之一,癌症患者及其照顾者大多存在较重的心理负担。照顾者是指与患者一起生活,向其提供日常生活、身体或医疗照护,并对患者承担主要责任的家庭成员[1]。研究[2]显示,17.7%的癌症患者照顾者有自杀意念,2.8%的癌症患者照顾者曾试图自杀。     

症状管理顾问在肿瘤患者症状群管理中的临床实践

目的总结设置症状管理顾问进行肿瘤患者症状群管理的方法与效果。方法在科内选取符合条件的7名护士作为症状管理顾问,邀请专业的师资团队对7名症状管理顾问进行系统培训。7名症状管理顾问各自负责1个症状群,2016年6月—2017年6月,对130例患者展开临床实践。当患者出现症状时,责任护士对患者进行初评,并将初评结果告知症状管理顾问,症状管理顾问对患者再次评价后拟定症状群管理路径表,责任护士按照症状群管理路径表为患者实施护理,每日抽取固定的时间由症状管理顾问与责任护士共同评价症状群管理路径表落实情况与患者症状控制情况。结果症状管理顾问的工作明显降低了肿瘤患者症状群的发生率,提高了患者的生活质量、患者满意度及护士自身职业价值感。结论在肿瘤专科设置症状管理顾问,对肿瘤患者开展症状群的管理实践工作,有较好的临床效果,值得深入探讨。     

序贯治疗中ART启动时间对TB/HIV患者的免疫学影响分析

目的 探讨抗反转录病毒治疗(antiretroviral therapy,ART)序贯抗结核治疗(antituberculosis therapy,ATT)中ART启动时间对结核病(tuberculosis,TB)/HIV患者CD4+T、CD8+T细胞计数及CD4/CD8比值的影响.方法 收集云南省传染病医院2014年1月—2017年12月间收治入院的TB/HIV患者病历资料.根据ART启动时间分为A组(ART基础上启动ATT)、B组(ATT 8周内启动ART)、C组(ATT 8周后启动ART).分析比较48周随访期内3组的免疫学指标差异.结果 共收集TB/HIV患者193例,分为A组90例、B组77例和C组26例.基线时B组的CD4+T细胞计数低于A组和C组(P均<0.05).3组患者在48周随访期内CD4+T细胞计数、CD4/CD8比值均呈不同程度上升趋势(P均<0.05).A组和B组的CD4+T细胞计数在序贯治疗后开始上升(P均<0.05),而C组则延迟至24周开始上升(P<0.05).24周、48周时3组的CD4+T细胞计数差异均无统计学意义(P均>0.05),B组的CD4+T细胞计数增幅高于A组和C组(P均<0.05).48周时,3组中仅少数患者的CD4+T细胞计数恢复至≥500 cells/μl,以B组恢复最为明显(12.99％).24周和48周时,CD4+T细胞计数≥500 cells/μl患者所占比例在3组之间差异均无统计学意义(P均>0.05).结论 尚未开始ART的TB/HIV患者应尽早接受ART,以恢复免疫功能,ATT 8周内启动ART,免疫重建效果最佳.     

低强度超声对卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响及机制分析

摘 要：［目的］ 探讨低强度超声（low intensity ultrasound，LIUS）对于卵巢癌SKOV3细胞的促凋亡作用，并通过生物信息学分析其可能的作用机制。［方法］ 通过细胞计数、CCK8实验及细胞凋亡测定证实LIUS对体外卵巢癌SKOV3细胞的促凋亡作用，并测定在不同照射强度及时间下细胞活力及细胞凋亡水平，筛选出最适的照射参数。通过现有的基因数据库获取可能被超声影响的潜在基因的表达谱，筛选差异基因进行KEGG富集分析及PPI网络构建。从现有癌症及预后数据库中提取关键基因的无进展生存期和总生存期数据进行预后分析，寻找LIUS促进卵巢癌细胞凋亡可能的机制。［结果］ 随着LIUS照射时间及照射强度的增加，卵巢SKOV3细胞的贴壁数量及细胞活力明显降低，凋亡细胞数量增多，该作用呈时间及强度依赖性。在照射强度达到2.0 W/cm2，时间达到70 s时作用最强，此条件被认为是最佳照射参数。生物信息分析结果显示，LIUS可能通过上调YY1和HSPA5，下调GRN促进卵巢癌细胞凋亡。［结论］ LIUS能够抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖，诱导其凋亡，随着照射时间及强度的增加，细胞凋亡率增加。LIUS可能是由于上调YY1和HSPA5基因、同时下调GRN基因，协同促进卵巢癌细胞凋亡。     

妊娠期肝内胆汁淤积症患者血浆CG与TBA的表达及意义

目的 探究妊娠期肝内胆汁淤积症(intrahepatic cholestasis of pregnancy,ICP)患者血浆甘胆酸(cholyglycine,CG)与总胆汁酸(total bile acid,TBA)的表达水平及意义,为ICP的临床诊治提供理论依据。方法 选取2015年1月～2017年12月于本院妇产科就诊并住院生产的80例ICP患者及80例身体健康的住院孕产妇,分别设为观察组与对照组,比较两组孕产妇血浆CG、TBA水平及围生儿并发症情况。ICP患者按不同CG、TBA水平进行分组,比较围生儿并发症情况。结果 观察组血浆CG、TBA水平均高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);观察组胎儿窘迫、早产、新生儿窒息、新生儿死亡发生率均高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);ICP患者血清CG水平越高胎儿窘迫、早产、新生儿窒息发生率越高,差异有统计学意义(P0.05);ICP患者血清TBA水平越高,胎儿窘迫、早产、新生儿窒息发生率越高,差异有统计学意义(P0.05)。结论 ICP患者血浆CG、TBA水平高于正常孕产妇,CG、TBA水平检测可用于ICP的临床诊断并预测病情变化,对围生儿预后也具有预测作用。     

真核表达载体pIRES2-EGFP-PELP1的构建及其在人牙周膜干细胞中的表达

目的 克隆人源脯氨酸-谷氨酸-亮氨酸富集蛋白1(proline-,glutanic acid-,leucine-rich proteinl,PELP1)基因全长,构建PELP1基因全长过表达载体,研究PELP1基因表达特点,为PELP1基因在不同组织细胞中的功能性研究奠定基础.方法 采用反转录PCR法从MCF-7细胞总RNA中克隆PELP1基因全长,与含有EcoR I与Xho I双酶切位点的真核过表达载体pIRES2-EGFP质粒载体连接,构建重组质粒pIRES2-EGFP-PELP1.经双酶切及测序鉴定重组质粒中PELP1基因的完整性及正确性.运用脂质体将重组质粒转染至人牙周膜干细胞中,运用实时定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)及蛋白质印迹法分别从基因和蛋白水平对转染细胞中PELP1的表达进行检测.结果 成功克隆出PELP1基因全长,并将其插入至pIRES2-EGFP过表达载体中,经双酶切鉴定和测序鉴定证实目的质粒片段插入无误.重组质粒pIRES2-EGFP-PELP1转染48 h后PELP1基因水平是转染空质粒人牙周膜干细胞的(148.0±1.3)倍,二者差异有统计学意义(P＜ 0.005).蛋白质印迹法结果显示,与转入pIRES2-EGFP的人牙周膜干细胞中PELP1蛋白相对表达量(0.3300±0.0117)相比,转入pIRES2-EGFP-PELP1重组质粒的人牙周膜干细胞中PELP1蛋白相对表达量(0.6200 ±0.0045)显著增高,二者差异有统计学意义(P＜ 0.005).结论 本项研究成功运用qRT-PCR反应从MCF-7细胞中克隆出PELP1全长基因,并成功构建pIRES2-EGFP-PELP1真核过表达载体.