虾青素对人视网膜色素上皮细胞氧化损伤的保护作用

目的：：探讨虾青素(astaxanthin,AST)对过氧化氢(hydrogen peroxide,H2 O2)诱导人视网膜色素上皮细胞( retinal pigment epithelial cells,RPE)氧化损伤的保护作用。方法：人RPE细胞系传代培养,MTT检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡率,透射电镜观察超微结构变化。结果：MTT结果显示用10-8 mol/L和10-4 mol/L AST处理后, RPE 细胞活性分别提高到53.66％±3.25％和70.43％±2.38％,与氧化损伤组(38.76％±3.74％)比较,差异具有统计学意义(P<0.05);流式细胞计数结果显示,预先给予10-8 mol/L和10-4 mol/L的AST作用后, RPE细胞凋亡率分别下降到30.23％±1.91％和12.58％±2.12％,与氧化损伤组(42.50％±1.94％)比较,差异具有统计学意义( P<0.05)。电镜观察结果显示,伴随AST作用浓度的增加,细胞形态亦逐渐得到改善。结论：AST可以抑制H2 O2诱导的人RPE细胞的凋亡,从而为寻求有效的防治视网膜损伤的药物提供可靠的实验依据。     

骨髓间充质干细胞应用于角膜疾病的研究进展

随着干细胞科学的飞速发展,近年间充质干细胞(MSCs)的研究已成为热点。骨髓间充质干细胞(BMSCs)是来源于骨髓中的MSCs,具有免疫原性低、有多向分化潜能、促进损伤修复、性能稳定等生物学优点。研究发现,BMSCs是医学领域中极具前景的一种特殊细胞,几乎在各系统疾病的治疗方面都有广泛应用。眼科学者的研究也发现,BMSCs已经成为角膜疾病中一种兼具科研价值和临床价值的种子细胞,为角膜盲患者的康复带来了一线希望。本文就BMSCs对角膜损伤与角膜移植排斥反应治疗方面的研究做一综述。     

硅油填充术后继发高眼压的相关危险因素

硅油(silicone oil)作为一种暂时性玻璃体替代物,已被广泛应用于各种复杂的玻璃体视网膜疾病的治疗。然而,硅油的填充也引起了多种术后并发症,其中最常见的并发症是临时性或永久性的眼压升高。多项研究表明,硅油填充术后的眼内压受到多种因素的影响。本文就近年来硅油填充术后继发高眼压的相关危险因素及其发病机制进行综述,这可能为及时、有效地控制眼压提供参考。     

人羊膜上皮细胞混悬液治疗兔急性角膜碱烧伤的实验研究

目的:结合体外细胞实验和在体动物实验研究羊膜上皮细胞(amnion epithelial cell,AEC)混悬液对兔角膜上皮细胞(cornea epithelial cell,CEC)生物学行为的影响及对急性角膜碱烧伤的治疗作用.方法:细胞实验:实验组将AEC及CEC于Transwell小室中培养,上室为AEC混悬液,下室接种CEC,对照组上室仅为培养基,于不同时间点行CCK-8法检测CEC的增殖活性;免疫细胞化学法检测PCNA表达;细胞划痕法观察细胞迁移能力.动物实验:采用改良的兔角膜碱烧伤模型制备方法:将10 mm直径环钻轻置于角膜中央,向环钻中央加入NaOH溶液,1 min后去环钻迅速冲洗兔眼,随机分三组(空白对照、AEC混悬液滴眼液治疗组、结膜下注射治疗组),于术后每周行裂隙灯显微镜及荧光素钠染色观察角膜情况.第28 d摘除眼球并固定行HE染色,免疫组织化学法检测角膜VEGF、mcp-1的表达.结果:CCK-8法示AEC混悬液作用后的CEC增殖活性增强(P<0.05);免疫细胞化学法显示PCNA阳性表达增强(P<0.05);划痕试验示AEC干预后CEC迁移加快.动物实验表明,滴眼液组和结膜下注射组的角膜恢复时间明显缩短,CNV面积均少于对照组(P<0.05),滴眼液组和结膜下注射组之间差异无统计学意义(P>0.05);HE染色示治疗组角膜组织炎症细胞浸润更少,组织排列更规则;免疫组化显示组织中VEGF、mcp-1表达更低(P<0.05),而滴眼液组和结膜下注射组之间差异无统计学意义(P>0.05).结论:AEC混悬液促进CEC增殖和迁移,影响CEC生物学行为变化.经AEC混悬液点眼及结膜下注射治疗兔眼碱烧伤后角膜修复加快,且两种方法抑制炎症反应及CNV形成,有望成为治疗急性角膜碱烧伤的新方法.     

TGF-β2玻璃体腔注射对EAU大鼠Foxp3表达的调控作用

目的:利用RT-PCR的方法检测EAU时Lewis大鼠视网膜和葡萄膜Foxp3的mRNA表达情况,探讨EAU时转录因子Foxp3的变化及TGF-β2对其的诱导调控作用,为研究葡萄膜炎的病变机制提供理论支持,为临床治疗葡萄膜炎探索新方向。方法:将IRBPR16多肽注入Lewis大鼠左后足底部制备EAU动物模型。按照随机数字表法将36只Lewis大鼠分为正常对照组、EAU未治疗组和EAUTGF-β2治疗组。TGF-β2治疗组于EAU动物模型制备后第1,4,7,10,13,16,19d给予TGF-β210μL(浓度为5mg/L)玻璃体内注射治疗。分别于IRBP免疫后7,10,14,21d处死Lewis大鼠,刮取视网膜和葡萄膜,利用RT-PCR法检测Foxp3的表达,所得数据应用SPSS10.0统计分析软件进行处理。结果:随着EAU病程的进展,Foxp3的表达逐渐增加,但同正常对照组相比,差异不显著,各时间组之间差异不显著。随着EAU病程的进展,TGF-β2治疗组7dFoxp3的表达增加,同正常对照组和未治疗组相比无显著差异。TGF-β2治疗组10,14,21d Foxp3的表达增加,同正常对照组相比有显著差异(P<0.01),同TGF-β2未治疗组相比Foxp3的表达增加,差异显著(P<0.05)。结论:探讨Foxp3在EAU疾病过程中的表达变化,为进一步研究Foxp3在EAU中的作用机制提供了理论支持。研究了TGF-β2在EAU病程中对Foxp3的表达调控,发现TGF-β2能够增加Foxp3的表达,从而调控Treg细胞,启动免疫抑制功能,为临床治疗葡萄膜炎开辟新方向。     

高糖诱导的人晶状体上皮细胞葡萄糖关键代谢酶的表达

目的：探讨葡萄糖关键代谢酶在高糖诱导的人晶状体上皮(HLEB3)细胞中的表达情况。

方法：将体外培养的HLEB3细胞分为正常对照组(采用DMEM培养液培养,含葡萄糖5mmol/L)、氧化应激组(采用含H₂O₂ 200μmol/L的DMEM培养液培养)、高糖诱导组(采用含葡萄糖30mmol/L的培养液培养),培养24h后检测细胞凋亡情况和细胞活力及6种葡萄糖关键代谢酶(6-磷酸果糖激酶-1、丙酮酸激酶、己糖激酶、柠檬酸合成酶、α-酮戊二酸脱氢酶、6-磷酸葡萄糖脱氢酶)的mRNA表达情况。

结果：高糖诱导HLEB3细胞凋亡,高糖诱导组(63.43%±3.40%)细胞活力低于正常对照组(100.00%±0.00%)和氧化应激组(91.90%±5.11%),且高糖诱导组细胞6种葡萄糖代谢关键酶的mRNA表达水平均低于正常对照组和氧化应激组(均P<0.05)。

结论：高糖可以诱导HLEB3细胞葡萄糖关键代谢酶的表达水平降低,诱导细胞凋亡,影响细胞活性。     

ARMD与转铁蛋白受体基因单核苷酸多态性相关性研究

目的：探讨中国东北地区汉族人群中年龄相关性黄斑变性(ARMD)与转铁蛋白受体2(TFR2)基因单核苷酸多态性的相关性。

方法：选取200例ARMD患者(干性100例,湿性100例)和100名健康志愿者(对照组),采集所有研究对象的外周静脉血并以EDTA抗凝处理,提取基因组DNA,根据相关文献提供的引物序列,扩增TFR2基因多态性位点rs2075674,进行聚合酶链式反应(PCR)。比较各组间的基因型频率,并按照Hardy-Weinberg平衡原理确定样本的群体代表性。

结果：TFR2基因的多态性位点rs2075674 ARMD组与对照组比较有差异(χ²=6.494,P=0.011); 湿性ARMD组与对照组比较有差异(χ²=11.054,P=0.001),而干性ARMD组与对照组无差异(χ²=1.418,P=0.234)。

结论：中国东北地区汉族人群中TFR2基因多态性rs2075674与ARMD具有相关性,且与湿性ARMD相关性较大。     

青光眼结膜成纤维细胞增生与TGF-β的表达

目的探讨接受药物治疗的原发性开角型青光眼患者结膜成纤维细胞（human Tenon’s fibroblast，HTF）的增殖能力以及与转化生长因子β（transforming growth factor—β，TGF—β）表达的关系。方法药物治疗的原发性开角型青光眼患者，在抗青光眼手术中取结膜Tenon囊组织并在体外培养到含有不同浓度胎牛血清（FBS）培养基中，检测HTF的增殖情况，用RT-PCR方法检测TGF—β3种异形体的mRNA表达水平，并与对照组进行对照。结果实验组的HTF细胞增生明显高于对照组（P=0．0013）。3种TGF—β异形体在mRNA水平均被HTF表达，且实验组的TGF—β2和TGF-β3在mRNA水平的表达显著高于对照组。结论实验组HTF中增高的TGF—β可能促进细胞增殖，而二者也可能与本研究中至少1a的抗青光眼滴眼液的持续使用有关。且细胞增生与TGF—β表达提高都促进了抗青光眼滤过术后的切口愈合，从而对手术效果起到负面影响。     

远方视力训练法治疗斜视性弱视临床研究

目的:总结远方视力训练法治疗单眼斜视性弱视的疗效。方法:对240例患病儿童进行前瞻性研究,随机分组,与传统遮盖疗法进行对比,随访3mo。结果:远方视力训练法促进弱视眼视力提高显著优于传统遮盖法。与传统遮盖疗法在治愈率(18%)、显效率(60%)及有效率(93%)方面对比均有统计学意义。结论:远方视力训练法是治疗单眼斜视性弱视行之有效的新方法。     

真菌性角膜炎的早期诊断及治疗方法的探讨

目的:分析真菌性角膜炎的早期诊断及治疗方法,探讨一种新型药物配伍治疗方法的可行性。方法:对临床上经角膜刮片镜检确诊的真菌性角膜炎20例(20眼)进行局部清创,碘灼,结膜下注射达呋康注射剂(2g/L)或点眼,涂以混有抗真菌药物兰美抒的10g/L阿托品眼膏,口服兰美抒片,并视病情轻重及变化调整用药种类、数量及给药方法。结果:12例痊愈,6例好转,2例恶化手术治疗。结论:真菌性角膜炎在早期及时确诊后,局部清创,碘灼并涂以眼膏外加口服兰美抒片治疗,取得较好疗效。