人巨细胞病毒对药疹病情发生发展的影响

目的 探究人巨细胞病毒对药疹病情发生发展的影响.方法 选取2012年9月-2014年6月在我院就诊的50例药疹患者作为观察组,同期选取50例体检健康者作为对照组,采用Taqman实时荧光定量PCR检测外周血单一核细胞中巨细胞病毒(CMV) DNA阳性率及载量,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中CMV IgM阳性率,对结果进行对比分析.结果 观察组中出现32例CMV DNA阳性患者,阳性率为64％.对照组中出现13例CMV DNA阳性患者,阳性率为26％,两者相比.观察组阳性率显著高于对照组,其差异具有统计学意义(P＜0.05);观察组中CMV DNA载量为28188.824±19525.632拷贝,对照组中CMV DNA载量为3018.9532±1 761.958拷贝,观察组显与对照组比较差异显著,具有统计学意义(P＜0.05);观察组中出现11例CMV IgM阳性患者,阳性率为22％,对照组中出现5例阳性患者,阳性率为10％,两者相比.观察组CMV IgM阳性率显著高于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 药疹患者中存在CMV感染,其在药疹的发生和发展过程中可能起到一定的促进作用,是药疹发病的因素之一.     

BCL2－L12在子宫内膜癌中的表达及其与病理参数的关系

目的：通过测定BCL2－L12在正常子宫内膜组织和子宫内膜癌组织中的表达情况，探讨BCL2－L12在子宫内膜癌中的表达及其与病理参数的相关性。方法：应用Real time PCR法检测36例良性病变切除子宫患者（对照组）的正常内膜组织及64例子宫内膜癌患者（实验组）病变内膜组织中BCL2－L12的表达情况，并分析其与临床病理参数的关系。结果：BCL2－L12在子宫内膜癌组织中的表达低于正常子宫内膜组织，差异有统计学意义（P＜0．05）；BCL2－L12在子宫内膜癌组织中的表达水平与肌层浸润程度有关，差异有统计学意义（P＜0．05）。BCL2－L12在子宫内膜癌组织中的表达与其他临床病理特征（比如病理学分期、组织学分化程度等）差异无统计学意义（P＞0．05）。结论：BCL2－L12在子宫内膜癌组织中呈现低表达，且表达水平与肌层浸润程度有关，提示BCL2－L12可能在子宫内膜癌的发生发展中起抑制作用。     

SOCS-1和SOCS-3在慢性根尖周炎病损组织中的表达及临床意义

目的:检测细胞因子信号转导抑制因子1 (suppressor of cytokine signaling-1,SOCS-1)和细胞因子信号转导抑制因子3 (suppressor of cytokine signaling-3,SOCS-3)在慢性根尖周炎病损组织中的表达水平,探讨SOCS-1、3在慢性根尖周炎发病机制中的作用.方法:收集25例慢性根尖周炎病损组织作为病例组,16例健康牙的牙周膜组织作为对照组.对样本中的蛋白表达量采用免疫组织化学法检测,mRNA表达量采用实时定量PCR法检测.采用SPSS13.0软件包对数据进行统计学分析.结果:免疫组织化学结果显示,SOCS-1、3蛋白在慢性根尖周炎病损组织中的表达水平均显著高于对照组(P＜0.01);重度炎症组中,SOCS-1、3的蛋白表达显著高于轻中度炎症组(P＜0.01).SOCS-1mRNA在轻中度炎症组、重度炎症组和对照组中的表达量分别为2.620±1.552、2.373±1.083和1.277±1.040,SOCS-3mRNA的表达量分别为9.308±5.901,7.565±3.233和1.232±1.099.SOCS-1、3 mRNA在轻中度炎症组、重度炎症组均显著高于对照组(P＜0.01),但不同炎症组之间并无显著差异.结论:SOCS-1、3可能与慢性根尖周炎密切相关.     

黄连素抑制胃癌细胞分子机制的初步探讨

目的 初步探讨黄连素(Berberine)抑制胃癌细胞的分子机制.方法 利用Real-time PCR检测黄连素对胃癌细胞BGC-823和SGC-7901增殖、凋亡、坏死、自噬及细胞连接相关基因表达水平的影响.结果 黄连素处理胃癌细胞后,增殖相关基因IGFBP5、E2F6及MDM2表达水平降低,Notch2和JAG2表达水平升高,而PAK3表达水平无明显变化;凋亡相关基因Bcl-2表达水平降低,Caspase-1及Caspase-8表达水平升高;坏死相关基因RIPK1与RIPK3表达水平降低,自噬相关基因ATG7表达水平升高;细胞连接相关基因EpCAM表达水平明显降低,E-Cadherin表达水平无明显变化.结论 黄连素通过调控增殖、凋亡等相关基因的表达水平发挥抑制胃癌细胞的作用.     

两种人乳头状瘤病毒检测方法的比较

目的 评价导流杂交和实时荧光定量（real-time）PCR对宫颈癌患者HPV感染检测的临床意义.方法 采用导流杂交和real-time PCR分别对190例患者进行HPV感染检测,并对检测结果进行分析.结果 在190例检测标本中,导流杂交法检测出113例HPV阳性,阳性检出率为59.5％,筛查宫颈癌的敏感度为58.1％,特异度为39.2％,阳性预测值为47.8％,阴性预测值为49.4％.real-time PCR检测出106例阳性,阳性检出率为55.8％,筛查宫颈癌的敏感度为54.8％,特异度为43.3％,阳性预测值为48.1％,阴性预测值为50.0％.导流杂交和real-time PCR检出的HPV阳性率差异无统计学意义,而且一致性检验显示两种方法具有较高的一致性（符合率为87.9％）.结论 本研究结果表明,导流杂交和real-time PCR方法检测HPV未表现出较大的差异,在宫颈癌筛查中可以将两种方法结合使用,以提高检测的准确性,降低漏诊率.     

2010—2012年韶关市儿童呼吸道感染病毒病原学分析

目的探讨韶关市儿童常见呼吸道感染的病原学特点和分布特征。方法采集2010年7月至2012年7月因呼吸道感染于粤北人民医院的住院患者呼吸道标本171份，采用荧光定量PCR方法，对呼吸道标本同时进行甲型流感病毒（FluA），乙型流感病毒（FluB），腺病毒（ADV），博卡病毒（BoV），副流感病毒1型（PIV1）、2型（PIV2）、3型（PIV3），鼻病毒（HRV），呼吸道合胞病毒（RSV），冠状病毒229E、0C43、HKUl、NL63，偏肺病毒（MPV）等14种常见呼吸道病毒核酸检测。结果171份标本中检出阳性标本93份，核酸阳性率为54．4％（93／171），其中FluA占首位，阳性率为8．2％（14／171），其他依次为ADV7．6％（13／171），HRV7．6％（13／171），PIVI／II／III 7．0％（12／171），RSV 6.4％（11／171），FluB5．8％（10／171），BoV5．3％（9／171），MPV3．5％（6／171），冠状病毒（HCoV—OC43／HKUl）2．9％（5／171）。不同性别问患儿呼吸道病毒阳性率差异无统计学意义（P〉0．05）。≥6月龄组阳性率最低（37．5％），1—3岁年龄组阳性率最高（62．1％）。结论韶关地区儿童发热呼吸道病毒感染病例的病原体以甲型流感病毒、腺病毒和鼻病毒为主。     

白纹伊蚊气味受体基因OR21α的克隆及定量分析

本文克隆白蚊伊蚊气味受体基因OR21a分析其是否与搜寻宿主或吸血行为相关。通过设计简并引物，PCR扩增得到白纹伊蚊气味受体基因OR21a段，采用SYBR荧光定量PCR方法，以自纹伊蚊β-肌动蛋白基因作为内参，比较了OR21a因在未吸血雌蚊、雄蚊、打断吸血雌蚊和饱血雌蚊头部表达量的差异。结果显示，白纹伊蚊OR21a因在未吸血雌蚊头部表达量最高，饱血雌蚊头部表达量最低，而在雄蚊头部的表达量介于打断吸血雌蚊和饱血雌蚊之间。本研究发现白蚊伊蚊会依据不同的生理需求改变OR21a因的表达量，推测可能与白纹伊蚊搜寻宿主及吸血行为有一定的相关性。     

改良分子信标—实时PCR快速检测副溶血弧菌

目的 :建立改良分子信标 -实时 PCR检测副溶血弧菌的快速方法 ,应用于副溶血弧菌食物中毒的快速诊断和海产品检验。方法 :根据 Gen Bank公布副溶血弧菌的耐热直接溶血毒素基因 (TDH)的保守序列 ,设计一对引物和改良分子信标探针 ,用 FAM荧光剂标记探针的 5′,并进行特异性和灵敏度分析 ;同时以 11种细菌作对照 ,建立改良分子信标检测副溶血弧菌的实时 PCR反应体系 ,应用于副溶血弧菌食物中毒快速诊断和食品微生物检测。结果 :检测 12种细菌 ,只有副溶血弧菌有荧光信号 ,与其他细菌无交叉反应 ,DNA灵敏度为 16 6 .6 fg/ μl,菌液灵敏度为 6 9cfu/ ml或 6 cfu/ PCR反应体系。改良分子信标 -实时 PCR反应体系检测 4 0株副溶血弧菌均出现特异的荧光信号 ,无干扰。对 3起细菌性食物中毒共 4 8份样品和 10 0份海产品进行检测 ,9份副溶血弧菌实时 PCR阳性 ,其中 7份副溶血弧菌细菌培养阳性 ,其余样品都为阴性。检测时间仅需 2 h。结论 :改良分子信标 -实时 PCR检测体系快速、灵敏度高 ,特异性强 ,可用于副溶血弧菌食物中毒的快速诊断 ,为食源性疾病的分子流行病学调查提供新的检测手段     

Reliability of non-invasively acquired human genomic DNA as a substrate for real-time PCR-assisted analysis of genetic polymorphisms

Molecular epidemiological studies require high numbers of participants. The combination of an non-invasive access to human DNA with a rapid genotyping analysis, e.g. by use of LightCycler assisted real-time polymerase chain reaction (PCR), can be helpful in conducting such trials. The aim of our study was to define, for the first time, the use of LightCycler technology in analysis of non-invasively derived DNA. DNA extracted from blood, mouthwash and buccal cytobrush samples from 100 volunteers was analyzed for the genotypes of cytochrome P450 CYP1B1, and glutathione S-transferases GSTT1, GSTM1 and GSTP1. The median amounts of DNA isolated from blood, mouthwash and buccal cytobrush samples were 95, 11 and 8 µg, respectively. While genotyping for CYP1B1 codon 432 polymorphism and GSTP1 codon 105 polymorphism resulted in a complete correspondence for all three modes of sampling, the identification of individuals with null-genotype for GSTT1 or GSTM1 failed in some cases due to atypical courses of the corresponding melting curves, leading to high false-positive rates in the group of non-invasively derived samples. Thus, the results presented here call for caution in using LightCycler assisted real-time PCR in non-invasively collected samples, at least when appropriate control strategies are not implemented.T. Neuhaus and G. Geisen contributed equally to this work