用于超灵敏无标记检测相思子毒素的光子晶体免疫分析技术研究

目的制备了一种基于免疫分析的光子晶体传感材料,可以对相思子毒素进行无标记超灵敏检测。方法在24孔板中用附着有金纳米粒子(AuNPs)的二氧化硅微球(SiO2)通过自组装方法堆垒蛋白石光子晶体(PC),并用相思子毒素多克隆抗体(pAb)修饰光子晶体以实现传感材料对相思子毒素的特异性识别。结果在优化后的检测条件下,光子晶体衍射峰的强度随相思子毒素浓度的增加而降低。检测方法的线性范围为0.10 pg/mL至10 ng/mL,检出限为11 fg/mL。此外,饮用水和牛奶样品的加标回收实验表明,加标回收率为91.45%~113.61%。结论该传感材料不仅可以实现相思子毒素的超灵敏无标记检测,而且具有制备简便,响应迅速,操作简单等优点,在检测、诊断和监测领域具有广阔的应用前景。     

鸡骨草持续销快价扬

鸡骨草为豆科植物广州相思子和毛鸡骨草的干燥全草。常用的大宗中药材。广西是鸡骨草的重要产地。正常年产量在2000—2200t，广东粤西地区亦有生产，年产量为500—600t，因其产地与广西玉林中药材市场近在咫尺，每年产新时都有相当的数量进人玉林药市，销往各地。因此，广西便自然形成鸡骨草的主要集散地，对国内外市场销势和价格有着很大的影响力，常左右整个市场销势。鸡骨草在商品上分细叶鸡骨草（广州相思子）和大叶鸡骨草（毛鸡骨草）两种，西野鸡骨草常用于配方，中成药生产原料及供出口，大叶鸡骨草主要用于中成药生产原料。两种鸡骨草均是两年来广西市场上的畅销中药材，且销势不断看好，价格也不断往上攀高，2004年细叶鸡骨草销价还只是4．5—5．5元千克价.     

鸡骨草的化学成分研究

目的研究鸡骨草Abrus cantoniensis全株的化学成分。方法柱色谱及高效液相色谱法分离其成分,光谱法鉴定其结构。结果分离鉴定了18个化合物,分别为β-谷甾醇(Ⅰ)、羽扇豆醇(Ⅱ)、原儿茶酸乙酯(Ⅲ)、胡萝卜苷(Ⅳ)、原儿茶酸(Ⅴ)、肌醇甲醚(Ⅵ)、7,3′,4′-三羟基-黄酮(Ⅶ)、腺嘌呤(Ⅷ)、腺嘌呤核苷(Ⅸ)、biflorin(Ⅹ)、isobi-florin(Ⅺ)、相思子碱(ⅩⅡ)、N,N,N-三甲基-色氨酸(ⅩⅢ)、大豆皂苷(ⅩⅣ))、槐花皂苷(ⅩⅤ)、去氢大豆皂苷(ⅩⅥ)、abrisaponin So1(ⅩⅦ)、白桦酸(ⅩⅧ)。结论Ⅲ、Ⅴ、Ⅶ～Ⅺ和皆为首次从本属中得到。除Ⅰ、ⅩⅡ、ⅩⅣ～ⅩⅥ外,其余13个化合物皆为首次从该植物中得到。     

相思子蛋白P2小鼠灌胃给药后的组织分布

目的 相思子蛋白P₂（abrin P₂）是由豆科藤本植物相思（Abrus Precatorius）种子中分离纯化出的一种植物蛋白毒素,对于多数肿瘤具有显著的杀伤作用。但由于其为蛋白类毒素,易产生抗体,从而降低抗癌效果;且其自身具有较大的毒性,注射途径多次给药较难控制给药剂量。为了降低abrin P₂对机体的毒性和免疫原性,同时也为了避免注射给药产生的一些弊病,对abrin P₂灌胃给药后在小鼠体内的组织分布进行了研究。方法 本文采用同位素示踪法结合三氯乙酸沉淀法对abrin P₂在小鼠各组织匀浆中的回收率和稳定性进行了研究。并采用单次ig给予abrin P₂ 43.8和170.0 μg·kg^-1后,分别测定组织中abrin P₂及代谢物总含量（abrin P₂T）、TCA沉淀部分的abrin P₂含量（代表大部分原型药物,abrin P₂P）,为abrin P₂新型抗肿瘤药的研发及临床治疗提供参考依据。结果 abrin P₂在小鼠各组织匀浆中的回收率均大于80%,abrin P₂在肝、肾、骨骼肌中,于25℃和4℃放置6 h基本不变。小鼠分别ig给予abrin P₂ 43.8和170.0 μg·kg^-1后组织分布研究表明,小鼠灌胃给予43.8 μg·kg^-1时,abrin P₂T和abrin P₂P在各组织中的含量,除消化系统外,脾、肺、肾、子宫中相对较高,其他组织中含量相对较少,脑中最少。小鼠ig给予abrin P₂ 170.0 μg·kg^-1后,除消化系统外,abrin P₂T和abrin P₂P含量较多的组织分别为子宫、肾,心、肺、脾,其中abrin P₂T在心中含量较多,而abrin P₂P在肺中含量较多。总体来说,给药后1~3 h内,abrin P₂T的含量在多数组织中达到顶峰,之后迅速下降,18 h后下降平缓,大部分组织在72 h仍可检测到少量abrin P₂T的存在。在abrin P₂P中,大多数组织在1~3 h内abrin P₂P的含量达到顶峰,之后迅速下降,在9 h内逐渐平缓,24 h后,在大多数组织中已经检测不到abrin P₂P的存在。结论 abrin P₂分布的靶向组织可能是脾、子宫和肾。脑中abrin P₂P和abrin P₂T分布最少,表明,abrin P₂不易通过血脑屏障。小鼠ig给予abrin P₂P和abrin P₂T在各组织中不同时间段含量的差异表明,abrin P₂进入体内后,体内各种因素会导致其大量的分解。ig给予abrin P₂ 43.8和170 μg·kg^-1,在各组织中的分布不尽相同,提示,abrin P₂在治疗靶器官的肿瘤上可能会更加有效,在治疗不同器官肿瘤时,可选择不同的给药剂量。     

毛相思子中的异黄酮类成分

目的研究毛相思子全草的化学成分。方法用柱色谱法分离得到化学成分，用光谱法测定其结构。结果纯化出一个异黄酮苷和3个异黄酮成分，分别是8-methylretusin-7-O-β-D-glucopyranoside(Ⅳ)、retusin 8-methyl ether(Ⅱ)、4’，7，8-trimethoxyisoflavone(Ⅲ)和afrormosin(Ⅵ)。结论这4个成分均为首次从该植物中分得。     

相思子毒素单克隆抗体的制备纯化及鉴定

目的制备相思子毒素单克隆抗体并鉴定其特性。方法以甲醛处理的相思子毒素毒蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠;取免疫小鼠的脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,经间接ELISA法筛选、融合细胞有限稀释法克隆、克隆化杂交瘤细胞株的亚类鉴定等方法筛选出单克隆抗体杂交瘤细胞株,用杂交瘤细胞株诱生小鼠腹水,应用蛋白A亲和层析法进行单抗的纯化,并对单克隆抗体的特异性进行鉴定。结果获得了4株可稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞2D3、4E6、1C8和1E5,诱生的腹水效价分别为1∶1×107、1∶1×106、1∶1×105、1∶1×106,亚类鉴定表明2D3为IgG1,其余3株均为IgG2b;特异性鉴定显示它们与多种毒素均无交叉反应,经过亲和层析,获得了纯化的单抗。结论获得了特异性的相思子毒素单克隆抗体,为建立相思子毒素的检测及纯化方法奠定了基础,其中4E6的效价最高,可作为检测相思子毒素的核心试剂。     

~(125)I-相思子毒素P_2在小鼠体内的血药浓度及其生物利用度

目的研究相思子毒素P2(abrinP2)在小鼠体内的血药浓度和生物利用度,为发展相思子毒素新型抗癌药打下基础。方法 ICR小鼠静脉(2.1μg.kg-1)和灌胃(87.5、43.8和21.9μg.kg-1)给予125I-相思子毒素P2(125I-abrinP2)。给药后不同时间内取血,分离血浆,用同位素示踪法检测血浆中的放射性;然后采用三氯乙酸(TCA)沉淀法检测沉淀中的放射性,PKS软件分析房室模型和计算各种参数,并根据灌胃和静脉给药的药-时曲线下面积(AUC0～∞)之比计算绝对生物利用度。结果相思子毒素P2在0.01～50μg.L-1浓度范围内线性关系良好,样品在血浆中的回收率大于85%,日内变异系数(RSD)小于5%。小鼠单次静脉注射2.1μg.kg-1相思子毒素P2的药代动力学参数分别为吸收半衰期(T12Ka)0.46h、消除半衰期(T21Ke)8.63h、药-时曲线下面积(AUC0～∞)为16.84μg.h.L-1;小鼠单次灌胃给予剂量分别为21.9、43.8、87.5μg.kg-1的125I-abrinP2后,吸收半衰期分别为1.26、1.15、0.55h;消除半衰期分别为46.21、46.21、46.19h,AUC0～∞分别为41.42、67.17、119.27μg.h.L-1。结论相思子毒素P2的血药浓度数据拟合为二室模型,在低、中给药剂量范围内符合线性动力学规律。低、中、高剂量灌胃给药的绝对生物利用度分别为24.6%、19.5%、16.7%。     

双抗体夹心生物素-亲和素ELISA法检测相思子毒素

目的 建立相思子毒素(abrin)的酶联免疫检测方法,为abrin临床诊断、中毒治疗、法医学鉴定等应用领域提供技术基础和参考依据.方法采用双抗体夹心生物素-亲和素ELISA法来检测微量abrin.结果该法检测abrin线性范围为0.125～31.25 μg/L,线性回归方程为y=0.52369X 0.51632(r=0.9816,P＜0.0001,n=9),检测限为0.125 μg/L.不同浓度蓖麻毒素(ricin)、葡萄球菌肠毒素(SEB)对检测结果基本无干扰,表明该法检测abrin具有很好的特异性.该法能用于abrin毒素污染水样、土样、食品、血液等模拟样品的分析,相对标准差为2.35%～4.14%,具有较好的重现性.结论 成功建立了夹心BA-ELISA法检测abrin,巧妙地将多克隆抗体的强富集能力、单克隆抗体的特异性以及生物素-亲和素系统的放大作用结合起来,达到了提高检测的灵敏度和特异性的目的 ,可适用于各种微量abrin样品的分析.     

孔雀豆、石榴皮中毒解救方

孔雀豆 别名：海红豆、红豆、红木、相思格、双栖树、相思子、相思藤。 基原：为含羞草科乔本植物。 性味：平,甘,有毒。功效主治：收敛,退热。主治毒蛇咬伤,间歇热等。     

相思子毒素的分子特点及其在临床中的应用前景

相思子毒素是从豆科植物（Abrus Precatorius L.)种子中分离的一种细胞毒性蛋白，它由A，B两条链组成，由一个二硫键相连，B链具有半乳糖凝集活性，可与细胞膜上受体结构，帮助A链进入细胞内，A链进入细胞催化60S大亚基的28S rRNA的第4324位脱去腺嘌呤而使60S核糖体亚基失活，从而使细胞蛋白合成被抑制。本文综述了有关相思子毒素的分子结构的特点，毒性机制和在临床中的应用前景。