胎膜组织人β防御素2、核因子KB p65、Toll样受体-4表达与未足月胎膜早破孕妇绒毛膜羊膜炎发生的关系

目的 探讨胎膜组织人β防御素2(HBD-2)、核因子κB p65(NF-κB p65)、Toll样受体-4(TLR-4)表达与未足月胎膜早破(PPROM)孕妇绒毛膜羊膜炎发生的关系。方法 选取铜仁市人民医院2019年5月-2020年12月106例PPROM孕妇，根据分娩时胎膜组织病理结果分为绒毛膜羊膜炎组(n=51)、非绒毛膜羊膜炎组(n=55),并将绒毛膜羊膜炎组按照炎症程度分为轻度炎症组(n=16)、中度炎症组(n=18)、重度炎症组(n=17)三个亚组，观察不同组别胎膜组织HBD-2、NF-κB p56、TLR-4 mRNA表达水平，通过绘制受试者工作曲线(ROC)评价三项指标对疾病的诊断评估价值，分析PPROM孕妇发生绒毛膜羊膜炎的危险因素。结果 绒毛膜羊膜炎组胎膜组织HBD-2、NF-κB p56、TLR-4 mRNA表达水平高于非绒毛膜羊膜炎组(P<0.05);胎膜组织HBD-2、NF-κB p56、TLR-4 mRNA表达水平联合检测评估PPROM合并绒毛膜羊膜炎ROC曲线下面积为0.906,高于各项指标单独检测ROC曲线面积0.787、0.818、0.759(P<0.05);Logistic回归分析显示妊娠期肥胖、合并阴道炎症、合并妊娠期糖尿病、HBD-2 mRNA高表达、NF-κB p56 mRNA高表达、TLR-4 mRNA高表达是PPROM孕妇发生绒毛膜羊膜炎的影响因素(P<0.05)。结论 PPROM合并绒毛膜羊膜炎孕妇胎膜组织HBD-2、NF-κB p56、TLR-4表达水平升高，其升高趋势是PPROM合并绒毛膜羊膜炎发生的影响因素，三者结合可作为疾病诊断的生物标志物。     

核因子κB受体活化因子配体和肿瘤坏死因子α经炎性牙周膜干细胞外泌体促进破骨细胞分化

目的　慢性牙周炎表现的病理性骨吸收非常常见，牙周膜干细胞（PDLSCs）的外泌体（Exo）对骨吸收的作用和影响尚不明确，本研究分析了该Exo蛋白组分对破骨细胞分化的影响。方法　分别从正畸前拔牙患者和慢性牙周炎患者的牙周膜组织中提取PDLSCs，通过流式细胞术检测表面标记物；通过差速离心分别提取2种细胞的Exo，即Exo-WT和Exo-CP，并通过Western blot、透射电子显微镜（TEM）、蛋白浓度检测、纳米粒径追踪检测Exo特征；通过蛋白质谱检测2种Exo的蛋白组分；通过酶联免疫吸附（ELISA）验证了差异表达蛋白肿瘤坏死因子α（TNF-α）、核因子κB受体活化因子配体（RANKL）、白细胞介素（IL）-1α、转化生长因子β（TGF-β）、骨形态发生蛋白2（BMP-2）表达水平；将10、100、1 000 μg·mL^-1的Exo-CP或Exo-WT加入RAW264.7培养基中并于5 d时通过实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）、Western blot、抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色检测破骨分化相关指标表达情况；采用SPSS 24.0软件对实验数据进行统计学分析。结果　Exo-CP富集的差异表达蛋白主要与破骨细胞分化的TNF信号通路、核转录因子κB（NF-κB）信号通路相关；ELISA实验证实了Exo-CP中高表达TNF-α、RANKL、IL-1α，低表达TGF-β1、BMP-2（P<0.05）；Exo-CP作用于RAW264.7，显著提高了细胞的破骨分化相关基因及蛋白的表达水平，TRAP染色可见分化的破骨细胞，且呈现浓度依赖性，100、1 000 μg·mL^-1浓度Exo-CP对破骨细胞分化的促进作用显著高于10 μg·mL^-1浓度组（P<0.05）。结论　慢性牙周炎的病理性骨吸收可能由炎性PDLSCs所分泌的Exo通过促进破骨细胞分化引起，Exo中主要的作用蛋白可能为RANKL和TNF-α，本研究为慢性牙周炎骨吸收的发病机制提供了新视角。     

没食子酸对小鼠骨髓细胞的辐射防护作用

目的探讨没食子酸(gallic acid, GA)对小鼠骨髓细胞的辐射防护作用。方法将健康雄性ICR小鼠随机分为生理盐水对照组、GA对照组、4个X线照射组和4个GA保护组,每组10只。X线照射组和生理盐水对照组给予0.01 mL/g生理盐水灌胃,GA对照组和GA保护组给予200 mg/kg的GA(20 mg/mL)灌胃14 d,第15 d给予4个X线照射组和4个GA保护组小鼠全身一次性X线照射,吸收剂量分别为1.0、2.0、3.0和4.0 Gy,生理盐水对照组和GA对照组不给予照射。照射后检测全血过氧化氢酶(catalase, CAT)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)和骨髓嗜多染红细胞微核(micronucleus frequency of polychromatic erythrocyte, MN-PCE)率,并用流式细胞仪检测骨髓细胞周期、早期凋亡率和晚期凋亡率。结果 1.0、2.0、3.0和4.0 Gy GA保护组小鼠血清中CAT活性分别为2.13、1.74、1.49和1.15 U/mL,与...     

小鼠丘脑室旁核至边缘系统部分区域的分支投射参与痒信息的传递

目的:观察小鼠丘脑室旁核(PVT)向边缘系统部分区域的分支投射，并为其参与痒信息的传递提供形态学证据。方法:小鼠分为两组。将荧光金(FG)分别注入第1组动物的内侧前额叶皮质(mPFC)、岛叶(IC)或杏仁中央核(CeA);将FG和霍乱毒素B亚单位(CTB)分别注射到第2组小鼠的两个不同核团(mPFC/IC、mPFC/CeA和IC/CeA);灌注固定前2 h再给予动物急性痒刺激。结合免疫荧光组织化学染色技术观察小鼠PVT内向mPFC、IC或CeA投射、分支投射神经元的分布及其表达FOS蛋白的状况。结果:PVT内存在向mPFC、IC和CeA投射、分支投射并表达FOS的神经元，这些标记神经元在PVT内的分布和比例存在差异。结论:PVT内具有定位分布倾向的部分神经元借助分支投射同时向边缘系统的不同区域传递痒信息。     

芒针对脊髓损伤大鼠运动功能和炎症水平的影响

目的探究芒针深刺秩边穴对大鼠脊髓损伤后运动功能的影响及可能作用机制。方法选择健康雄性Wister大鼠81只,随机分为正常组、模型组和芒针组(正常组9只,其余两组各36只),采用改良Allen's造模法制备大鼠脊髓中度损伤模型,模型组不做特殊处理,芒针组采用芒针深刺秩边穴,每日1次,每次30 min。分别于术后1 d、3 d、5 d、7 d行BBB(Basso-Beattie-Bresnahan)运动功能评分;术后1 d、3 d、5 d、7 d取受损段脊髓组织行酶联免疫吸附测定(ELISA)、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和苏木素-伊红染色(HE染色)。结果术后5 d和7 d,芒针组大鼠BBB评分高于模型组,差异有统计学意义(P<0.01);脊髓损伤后,模型组和芒针组大鼠脊髓组织中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、核转录因子kB(NF-kB)、白介素-6(IL-6)含量及HMGB1mRNA、NF-kBmRNA、IL-6mRNA水平显著升高(P<0.05);受损的脊髓组织松散,灰质中有许多空洞形成,伴有炎性细胞浸润。芒针治疗后,芒针组大鼠脊髓组织中HMGB1、NF-kB、IL-6含量及HMGB1mRNA、NF-kBmRNA、IL-6mRNA水平较模型组降低,且在3 d、5 d、7 d差异有统计学意义(P<0.05);受损部位的空洞及炎性细胞逐渐减少。结论脊髓损伤后,炎症因子的大量聚集引起级联性炎症反应,影响大鼠运动功能的恢复。芒针的抗炎机制可能包括抑制HMGB1的表达,降低NF-kB信号通路的传导,下调促炎因子IL-6的分泌。     

针刺治疗肥大性下橄榄核变性1例报告

肥大性下橄榄核变性是齿状核-红核-下橄榄核环路区受损后引起的一种临床少见的、特殊的跨突触变性,多继发于中脑、脑桥或小脑的出血、梗死、肿瘤或创伤性病变后期,主要临床表现为眼肌震颤、腭肌阵挛、复视、肢体阵挛或共济失调等[1]。目前西医尚缺乏特异性治疗方法,仅对症治疗。笔者治疗脑干出血继发的肥大性下橄榄核变性1例,最初运用针刺配合西药治疗,并逐步停用西药,最后单用针刺治疗,临床疗效颇佳,现报告如下。     

中期因子和核转录因子免疫组化测定对甲状腺乳头状癌及转移灶的诊断价值

目的探讨中期因子(MK)和核转录因子Kappa B(NF-κB)免疫组化测定对甲状腺乳头状癌(PTC)及转移灶的诊断价值。方法选取2016年3月至2018年5月间北京市大兴区人民医院收治的70例行甲状腺全切除术的PTC患者,及行单侧腺叶切除或双叶大部切除的65例多发性结节性甲状腺肿(MNG)患者。根据是否有转移灶进一步分为PTC1组(有转移灶)和PTC2组(无转移灶),汇总和记录患者的病例资料,采用免疫组化染色法检测各组组织中MK、NF-κB p65和Ki-67的表达,计算并绘制三个指标的灵敏度、特异度、最大约登指数、曲线下面积和受试者工作特征(ROC)曲线,通过Western印迹测定证实免疫组化结果。结果 PTC患者术后组织MK、NF-κB和Ki-67的表达明显高于MNG患者,差异均有统计学意义(均P <0. 05); ROC结果显示三个指标对PTC的诊断效能较好,最大约登指数分别为0. 871、0. 816和0. 771。PTC亚组1病例的三个指标表达明显高于PTC亚组2病例,差异均有统计学意义(均P <0. 05); ROC结果显示三个指标对PTC转移灶的诊断效能较好,最大约登指数分别为0. 835、0. 684和0. 870;三组患者MK和NF-κB的蛋白水平比较,组间差异有统计学意义(均P <0. 05)。结论 MK和NF-κB对PTC的诊断效能较好,敏感度和特异度较高,并且MK和NF-κB对PTC患者手术时是否存在转移灶的判断具有一定的价值。     

双吲哚马来酰亚胺衍生物L6诱导白血病细胞凋亡机制的研究

目的探讨双吲哚马来酰亚胺衍生物L6诱导白血病细胞的凋亡作用及其分子机制。方法采用MTT比色法检测L6对白血病细胞HEL、K562、KG1a的杀伤作用。流式细胞术检测L6对HEL细胞凋亡、周期和分化的影响。Western blotting法检测细胞凋亡相关蛋白的表达。通过体内实验研究L6治疗小鼠白血病的作用效果。结果 MTT比色法结果显示L6对HEL、K562、KG1a细胞具有比阳性对照米哚妥林(PKC412)更显著的抑制活性,半数抑制浓度(IC50)分别为(0.05±0.03)、(0.32±0.01)、(0.19±0.10)μmol/L。L6可以诱导HEL细胞发生凋亡和G2/M期阻滞,诱导HEL细胞向巨核细胞方向分化,且呈剂量效应。Western blotting检测结果表明L6主要通过激活Caspase-3执行细胞凋亡。小鼠肝组织苏木精-伊红(HE)染色显示肝组织内HEL细胞浸润有所减轻,但L6组减轻的效果更明显,表明其可延缓白血病细胞的转移,且效果优于米哚妥林。结论双吲哚马来酰亚胺衍生物L6有较强的抗白血病活性,为新型白血病药物的研发提供参考。