3种中和剂对常用消毒剂在Vero细胞上的中和效果

 目的  研究0.5%硫代硫酸钠、10%胰蛋白胨大豆肉汤（tryptic soy broth， TSB）培养基、10%Letheen肉汤培养基对实验室常用的4种消毒剂的中和效果，为疫苗生产和检定中科学选择中和剂提供依据。 方法  取生长良好的Vero细胞接种于96孔培养板，每组8个复孔，置于37 ℃、5% CO2培养过夜。将3种中和剂分别与杀孢子剂、0.5%“84”消毒液、酸性苯酸盐、碱性苯酚盐4种消毒剂中和后，接种于单层生长的Vero细胞，显微镜下观察细胞生长情况。结果  0.5%硫代硫酸钠分别与杀孢子剂、0.5%“84”消毒液中和后接种细胞，8孔细胞全部存活；而0.5%硫代硫酸钠分别与酸性苯酚盐和碱性苯酚盐的中和产物接种细胞后，细胞全部死亡。10% TSB培养基分别与酸性苯酚盐、碱性苯酚盐中和后接种细胞，8孔细胞全部存活；而10% TSB培养基分别与杀孢子剂和0.5%“84”消毒液的中和产物接种细胞后，细胞全部死亡。10%Letheen肉汤培养基接种细胞后，8个孔细胞全部死亡。结论  0.5%硫代硫酸钠可中和杀孢子剂和0.5%“84”消毒液的消毒作用，10%TSB培养基可中和酸性苯酚盐和碱性苯酚盐的消毒作用。10%Letheen肉汤培养对Vero细胞有毒性作用。     

治疗性单克隆抗体培养工艺的优化

目的优化抗TNF-α单克隆抗体的培养工艺,提高抗体表达水平。方法对商业化的化学限定培养基和流加物进行筛选,利用JMP软件对流加培养工艺(fed batch culture)进行全因子析因实验设计,对接种细胞密度、流加物的体积分数和流加时间进行优化。结果经过筛选确定了工程细胞株的基础培养基和流加物,经培养工艺优化后,使工程细胞株的最大活细胞密度由原工艺的7×106m L-1增加到14.6×106m L-1,抗体的表达水平由原工艺的1.0 g·L-1增加到2.5 g·L-1,分别增长了109%和150%。结论通过优化抗TNF-α单克隆抗体的培养工艺,使抗体的表达水平得到了提高。     

显色培养基与直接药敏试验在快速鉴定ESBLs大肠埃希菌血流感染中的应用价值

目的探讨显色培养基联合直接药敏试验在快速鉴定产ESBLs肠杆菌引起的血流感染中的应用评价,并了解医院产ESBLs大肠埃希菌的基因型,为临床提供诊治依据。方法收集2012年7月-2013年12月分离自医院血培养标本中的大肠埃希菌263株,采用ESBLs确证试验、显色培养基法、标准药敏试验和直接药敏试验对菌株进行培养鉴定和药敏试验,并对所得数据进行分析,采用PCR技术对263株大肠埃希菌进行基因表型分析。结果 263株大肠埃希菌中经ESBLs确证试验检测均为产ESBLs菌株,显色培养基鉴定出的产ESBLs大肠埃希菌为240株,显色培养基法检测产ESBLs大肠埃希菌的灵敏度为91.3%,阳性预测值为100.0%;直接药敏试验对17种常见抗菌药物的耐药率与标准药敏试验比较,差异均无统计学意义;263株大肠埃希菌的基因型为SHV型157株占59.6%及TEM型106株占40.4%。结论医院分离的产ESBLs大肠埃希菌基因型以SHV型为主,显色培养基联合直接药敏可快速鉴定血流感染的产ESBLs大肠埃希菌,该方法可作为产ESBLs大肠埃希菌的初筛试验。     

人骨肉瘤细胞系HOS肿瘤干细胞样细胞亚群的分离与鉴定

目的探索无血清培养基培养人骨肉瘤细胞系HOS细胞,筛选并鉴定人骨肉瘤细胞系HOS中肿瘤干细胞相关亚群。方法通过无血清悬浮培养初步富集骨肉瘤细HOS肿瘤干细胞,观察其形成肿瘤干细胞球过程中的细胞形态,并在有血清培养基中诱导其分化。各种浓度化疗药物顺铂(CDDP)和阿霉素(DXR)分别处理HOS悬浮细胞球与HOS贴壁细胞,MTT法检测两种细胞对化疗药敏感性。Real-time PCR检测HOS悬浮细胞球与HOS贴壁细胞干细胞相关基因ABCG2、Bmi1、Nanog、Oct3/4、Sox10、STAT3表达情况。将HOS悬浮细胞球与HOS贴壁细胞分别接种于BALB/c裸鼠,观察成瘤情况。结果人骨肉瘤细胞系HOS细胞能够在无血清培养基中存活、增殖并形成肿瘤干细胞球。HOS悬浮细胞球对于化疗药物的敏感性较HOS贴壁细胞高。Real-time PCR结果显示HOS悬浮细胞球较HOS贴壁细胞高表达肿瘤干细胞相关基因ABCG2、Bmi1、Nanog、Oct3/4、Sox10、STAT3。HOS悬浮细胞球体内成瘤能力较HOS贴壁细胞强。结论无血清悬浮培养可以初步富集人骨肉瘤细胞系HOS悬浮细胞球,且这些细胞具有肿瘤干细胞特性。     

钩端螺旋体EMJH培养基实验室应用

目的 探索柯氏培养基和EMJH培养基在培养钩端螺旋体菌的差异及在钩体病防治上应用价值。方法 观察2种培养基在15群15型钩体培养菌培养过程形态、数量、自凝现象等差异,并对健康人临床疑似钩体病人和暴发流行钩体病人血清进行 MAT试验抗体检测。结果 EMJH培养基接种钩体后第2 d就大量生长繁殖,而柯氏培养基1周后才达繁殖高峰,钩体MAT试验也显示EMJH培养基培养的钩体菌敏感性较柯氏培养基培养菌高。结论 EMJH培养基可用于快速分离钩体,有利于早期确定钩体病的流行和实验室研究。     

HIV感染患者口腔念珠菌的培养鉴定

目的 :比较科玛嘉念珠菌显色培养基 (Chromagar)和API 2 0CAUX酵母菌系统 (API 2 0C)在人体免疫缺陷病毒 (HIV )感染者口腔念珠菌鉴别中的优缺点。方法 :6株念珠菌标准菌株和 17例HIV感染合并口腔念珠菌病患者舌背白色刮取物 ,分别接种于沙氏培养基和Chromagar ,3 7℃ 48h后取沙氏培养基上生长物作API 2 0C鉴定。结果 :API 2 0C、Chromagar在鉴定白色念珠菌上无显著性差异 ,API 2 0C鉴定非白色念珠菌准确率高于Chromagar ,但Chromagar可鉴别混合菌种感染。 结论 :在HIV感染患者口腔念珠菌分型初筛可用Chromagar ,做准确分型时需用API 2 0C鉴定 ,两种方法互有裨益。     

SACC-83条件培养基体外培养鸡胚背根神经节的实验研究

目的：探讨体外培养条件下，涎腺腺样囊性癌细胞系SACC-83条件培养基对鸡胚背根神经节突起生长的影响。方法：收集涎腺腺样囊性癌细胞系SACC-83 24h条件培养基，与鸡胚背根神经节进行共培养，观察神经节神经元细胞突起的生长。结果：培养36h观察发现，SACC-83条件培养基有明显的促神经节突起生长的作用，与对照组相比差异显著。结论：SACC-83条件培养基促神经节突起生长的作用可能与该细胞分泌神经营养活性物质有关。     

口腔环境因素对血型链球菌和变形链球菌生长的影响：I.粘蛋白的影响

采用连续培养方法，以粘蛋白作为化学限定培养基中的限定性因子，观察血型链球菌（以下简称血链菌）和变形链球菌（以下简称变链菌）Ｉｎｇｂｒｉｔｔ（ｃ）的生长状态。结果显示变链菌不能生长于以粘蛋白作为唯一营养源的培养基中，而血链菌可以生长；两菌混合培养时的生长量均有所提高，表明两菌有协同降解粘蛋白作用。