免疫球蛋白降解酶IdeS在大肠杆菌中的表达、纯化及功能鉴定

病原链球菌为逃避宿主的免疫反应,分泌一种可特异地裂解免疫球蛋白G的降解酶(immunoglobulin G-degrading enzyme of Streptococcus pyogenes, IdeS)。IdeS既可作为工具酶用于IgG的指纹分析,又可用于治疗与自身免疫反应相关的疾病。本研究基于质粒pCold构建了两种重组IdeS的表达载体,并在大肠杆菌Shuffle T7中进行异源表达,经亲和色谱纯化后检测其蛋白活性。结果表明N-端含有His6-标签的重组IdeS产量为4 mg·L^-1,其与抗体IgG1以1∶200 (m/m)在37℃反应30 min即可完全酶解。而N-端含有His6-标签且C-端含有硅胶亲和标签(SiBP)的重组IdeS产量为1.5 mg·L^-1,其与抗体IgG1以1∶20 (m/m)在37℃反应30 min才可反应完全。C-端融合肽对于IdeS产量与活性都有较大的影响,使其活性降低,不利于后续应用于药物研发。上述结果表明,本系统所表达的N-端含有His6-标签的IdeS重组蛋白具有较高的活性,完全能满足抗体类药物研发...     

Fc⁃gammaⅠ型受体在阿尔茨海默病患者和模型小鼠脑皮质的表达

目的 探讨高亲和力IgG受体Fc-gammaⅠ型(FcγRⅠ)在阿尔茨海默病(AD)脑皮层的表达变化。方法 选用正常人脑组织样本和神经病理诊断为AD患者脑组织样本，6月龄野生型小鼠和APP/PS1小鼠。免疫荧光和免疫蛋白印迹检测脑皮层FcγRⅠ的细胞定位和表达。结果 人和小鼠脑皮层的神经元均普遍表达FcγRⅠ。与健康人脑相比，AD患者脑皮层的FcγRⅠ表达显著降低(P<0.05)。与野生型小鼠脑相比，AD模型小鼠脑皮层的FcγRⅠ表达也呈现出显著降低(P<0.05)。结论 IgG高亲和力受体FcγRⅠ在AD患者脑和AD模型小鼠脑皮层的表达显著下降，可能与AD的神经病理机制相关。     

血清TIMP-1、PEPD、sTim3、IFN-γ的变化与肺结核肺部受累情况及化疗预后的关系

目的探讨血清基质蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)、脯氨酸肽酶(PEPD)、可溶性T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(sTim3)、γ-干扰素(IFN-γ)与肺结核患者肺部受累及化疗预后结局的关系。方法选取我院传染病科确诊的98例初治肺结核患者(病例组)、90例健康体检对象作为对照组,检测并对比两组的血清TIMP-1、PEPD、sTim3、IFN-γ水平;并根据病例组患者影像学资料分为单肺受累组/双肺受累组、化疗结局进行分层分析。结果病例组患者的血清PEPD、sTim3水平显著高于对照组(P<0.05),病例组患者的血清IFN-γ水平显著低于对照组(P<0.05),病例组和对照组的血清TIMP水平组间比较无统计学意义(P>0.05);双肺受累的肺结核患者的血清TIMP-1、PEPD、sTim3水平显著高于单肺受累组(P<0.05),双肺受累的肺结核患者血清IFN-γ水平显著低于单肺受累组(P<0.05);治疗6个月后,治愈组的血清TIMP-1、PEPD、sTim3水平显著低于治疗失败组(P<0.05),治愈组的血清IFN-γ水平显著高于治疗失败组(P<0.05)。结论检测血清TIMP-1、PEPD、sTim3、IFN-γ水平对于肺结核的辅助诊断、肺部受累病情及治疗结果判断均具有一定的参考意义。     

狂犬病人免疫球蛋白对伤口愈合的影响及对策研究

目的:探索狂犬病人免疫球蛋白对伤口愈合的影响及对策研究。方法:将90例狂犬病Ⅲ级暴露的患者作为研究对象,排除已收入院的患者,采用随机数字表法分为对照组A(拒绝注射狂犬病人免疫球蛋白)、对照组B(注射狂犬病人免疫球蛋白患者,常规处理)和试验组(注射狂犬病人蛋白患者,实行干预),每组患者各30例。对比治疗后患者伤口的感染率、结痂及愈合时间。结果:经治疗后,观察组患者的感染率显著低于对照组A及对照组B,观察组患者的结痂时间和愈合时间均短于对照组A及对照组B,差异均具有统计学意义(P <0. 05)。结论:对于狂犬病Ⅲ级暴露的患者,注射狂犬病人免疫球蛋白才能更有效预防狂犬病,注射狂犬病人免疫球蛋白会延缓伤口愈合,但是通过干预,伤口愈合加快,可有效改善生活质量,有较高临床应用价值。     

苦木水提物外用对变应性接触性皮炎模型小鼠的改善作用研究

目的:考察苦木水提物外用对变应性接触性皮炎(ACD)模型小鼠的改善作用,为其进一步开发利用提供参考。方法:将48只小鼠随机分为空白对照组(生理盐水)、模型组(生理盐水)、氢化可的松组(阳性对照,约0.15 g/耳)和苦木水提物低、中、高剂量组(0.15、0.3、0.6 g/耳,以提取物计),每组8只。耳部涂抹给药,每天上午8点和下午4点分别给药1次,连续给药7 d。除空白对照组外,其余各组小鼠在第1、2天给药后于腹部涂抹含0.5%2,4-二硝基氟苯(DNFB)的丙酮-橄榄油溶液诱导ACD模型。第7天给药结束后,于造模组小鼠左耳涂抹0.25%DNFB的丙酮-橄榄油液诱发皮炎。24 h后,肉眼观察各组小鼠左耳组织变化并进行皮损评分,测定小鼠左、右耳厚度差和质量差,检测小鼠血清中免疫球蛋白E(IgE)和白细胞介素6(IL-6)含量,并在苏木精-伊红染色后于显微镜下观察小鼠耳组织病理形态学变化。结果:与空白对照组比较,模型组小鼠左耳皮损评分显著升高(P<0.01),左、右耳厚度差和质量差以及血清中IgE、IL-6含量均显著增加(P<0.01),显微镜下可见小鼠左耳组织出现淋巴细胞浸润、细胞间水肿、红细胞渗出等病理形态学变化。与模型组比较,氢化可的松组和苦木水提物高剂量组小鼠左耳皮损评分显著降低(P<0.05或P<0.01),各给药组小鼠左、右耳厚度差和质量差均显著减小(P<0.01),氢化可的松组和苦木水提物中、高剂量组小鼠血清中IgE、IL-6含量均显著降低(P<0.01),显微镜下可见各给药组小鼠左耳炎性病变均不同程度减轻。结论:苦木水提物外用对ACD模型小鼠具有较好的改善作用。     

如何根据特异性IgM和IgG评价新型冠状病毒宫内垂直传播

新型冠状病毒能否通过宫内垂直传播感染胎儿是关注的焦点,而如何正确评价新型冠状病毒是否存在宫内垂直传播,更是问题的关键所在。病毒学和血清学证据对诊断病毒宫内垂直传播都有价值。单纯将血清学结果用于确定新型冠状病毒宫内传播时,应至少对新生儿随访3~6个月,动态观察IgM和IgG滴度变化,同时随访其母亲,与母亲特异性抗体的滴度进行比较。     

HIV抗体阳性人免疫球蛋白的代谢和安全性分析

医疗卫生市场对静注免疫球蛋白(Intravenous Immunoglobulin,IVIg)的需求日渐增长,保障安全供血一直以来是一项严峻挑战。作为一种无法根治的血液传播病毒,人类免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency Virus,HIV)严重威胁着供血安全。HIV抗体是HIV既往感染的指标,然而HIV抗体并不具有感染性,含有HIV抗体的制品也不一定具有感染性。本文从抗体代谢、输入性HIV抗体代谢和不同来源HIV抗体的安全性等角度,综述了HIV抗体阳性的血液制品的安全性。     

艾拉莫德联合常规治疗对不同IgG滴度类风湿关节炎患者疗效与安全性的回顾性分析

摘要：目的:探讨艾拉莫德对血清免疫球蛋白G(IgG)升高的类风湿关节炎(RA)患者的远期临床疗效及安全性。方法:采用回顾性分析方法,收集某院2018年1～12月在常规治疗疗效不明显基础上联合使用艾拉莫德的活动性RA患者的临床资料,根据患者IgG滴度分为IgG升高组和IgG未升高组,比较治疗24周后两组的疾病活动性评分(DAS28),以及C-反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)、类风湿因子(RF)、IgG水平变化和药品不良反应。结果:治疗前,两组患者的IgG水平差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,IgG升高组患者的CRP、ESR、RF、IgG较前显著下降(P<0.05),IgG未升高组的CRP、ESR较前显著下降(P<0.05);且IgG升高组的ESR、RF显著低于IgG未升高组(P<0.05)。两组DAS28评分治疗前后均无显著变化,组间也无明显差异(P>0.05)。两组药品不良反应发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:在常规治疗方案基础上联用艾拉莫德对两组均显示出一定的效果,主要表现为各种检验指标的改善,而IgG升高组改善更为明显。