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1.
目的:应用噬菌体抗体展示技术,构建大容量天然人源甲状腺髓样癌(medullary thyroid carcinoma,MTC)噬菌体单链抗体库。方法:提取MTC病人癌周淋巴结总RNA,通过RT-PCR方法获得抗体可变区基因VH和VL基因片断,以它们为模板分别扩增VH-Linker和VL-Linker,再用剪切重叠延伸PCR技术将之拼接组装成单链抗体可变区基因片段(single chain fragment variable,scFv)后引入酶切位点SfiⅠ和NotⅠ。将scFv基因克隆入噬菌粒栽体pCANTAB-5E后经电转入大肠杆菌Ecoli TG1,之后经辅助噬菌体M13K07超感染,构建人源MTC噬菌体单链抗体库。PCR鉴定scFv片段阳性插入率,1.0%琼脂糖凝胶电泳鉴定阳性克隆双酶切产物。结果:MTC周围淋巴结总RNA的琼脂糖电泳结果可见清晰的28 S、18 S条带;VH基因的大小约为370 bp,VL基因为350 bp,组装后的scFv基因约为750 bp。用pUC19标准质粒测定转化效率达到108 cfu/μg,scFv的阳性插入率为87.5%(21/24)。结论:成功地构建了人源MTC噬菌体展示文库,为进一步筛选具有MTC细胞特异性的人源噬菌体单链抗体奠定了实验基础。  相似文献   
2.
3.
为深入贯彻胡锦涛总书记在中共中央政治局第二十八次集体学习时的重要讲话精神,全面落实科学发展观,深化人口计生综合改革,扬州市积极将诚信计生工作融入社会化管理服务大局,在群众自治、政务公开、依法行政上求突破,努力构建政府诚信、群众守信、居民互信的人口计生服务管理诚信体系。  相似文献   
4.
构建食品药品安全社会共治格局是新时期构建和谐社会的重大战略举措。当前,食品药品社会共治还存在一些问题:企业诚信缺失,责任感不强,从业人员素质较低;政府对监管部门人财物的投入有限;共治共管乏力,缺少保障机制等。针对以上问题,提出一些不太成熟的对策和建议,与各位同仁进行交流。  相似文献   
5.
本文以中医英语教学实践为出发点,对我国中医院校的中医英语相关课程体系的构建提出了具体的看法,内容涉及教学大纲、课程设置、考核方式等。  相似文献   
6.
张焱  路春阳  朱玉萍 《中国肿瘤》2023,32(7):525-532
在恶性肿瘤高发与肿瘤微创外科技术快速发展的背景下,优化区域肿瘤诊疗资源配置,推动肿瘤微创外科技术应用规范化、标准化成为必然要求.为提升浙江省肿瘤微创诊治能力的整体水平,浙江省肿瘤医院于2019年牵头成立了浙江省肿瘤微创外科联盟.全文通过对浙江省肿瘤微创外科联盟构建模型及运行机制进行协同视角下的分析,归纳总结其运行过程中取得的成效与存在的问题,并提出相应建议,为跨区域专科联盟的建设与发展提供一定的借鉴思路.  相似文献   
7.
随着全球化浪潮的推进与知识经济时代的到来,高等教育面临着越来越多的挑战。在这一新时代,我国高等教育应如何保持自身的健康发展。通过对高等教育价值观的分析与构建,明确高等教育的发展方向,稳步推进社会主义现代化建设进程。  相似文献   
8.
摘 要:[目的] 通过RNA干扰技术致基因沉默和基因过表达的方法研究IER5基因与宫颈癌SiHa细胞系辐射敏感性的相关性,探讨IER5基因不同表达的细胞系对辐射敏感性的差异。[方法] 构建IER5沉默及过表达的真核表达载体,转染细胞并筛选出稳定表达的细胞系,经Western Blot和Real-time PCR鉴定成功。观察IER5基因不同表达的3种细胞系的形态;对细胞系进行4Gy的辐射后使用CCK-8检测细胞生长曲线;对细胞系进行10Gy的辐射后使用流式细胞仪检测细胞凋亡情况;对细胞系进行4Gy的辐射后使用流式细胞仪检测不同时间点细胞周期的情况。[结果] IER5基因沉默使SiHa细胞略有增大,照射后的细胞增殖速度加快;而其过表达可使SiHa细胞缩小呈圆形,并且细胞增殖速度有所减慢。IER5沉默导致辐射诱导的SiHa细胞凋亡率降低,过表达可促进辐射诱导的SiHa细胞凋亡,其凋亡在照射后48h最为显著。照射后细胞周期的G2-M期阻滞效应随IER5表达含量的降低而升高,IER5基因沉默促进细胞的增殖分裂。[结论] IER5基因与宫颈癌SiHa细胞的增殖、凋亡和细胞周期的变化及对辐射的反应有明显相关性,IER5基因可能可提高宫颈癌细胞对放射的敏感性。  相似文献   
9.
文章重点阐述了突发公共卫生事件的概念及特点,分析了突发公共卫生事件期间社会公众疑病?恐慌?焦虑?抑郁?强迫?盲从等社会心理特点,最后提出构建突发公共卫生事件的社会心理支持体系,包括建立良好的风险沟通机制?发挥主流媒体功能?建立应急处理机制?改善认知模式?增进人际交往?  相似文献   
10.
目的建立新的连翘花蕾全长cDNA文库构建方法。方法应用GeneRacer^TM试剂盒,采用改良RNA连接酶介导的快速扩增cDNA末端(RNA ligase-mediated rapid amplication of cDNA ends,RLM—RACE)技术构建连翘花蕾全长的cDNA文库,通过计算菌落数、蓝白斑数、酶切鉴定、序列分析等手段评价文库质量。结果通过增加模板用量的方法成功构建了连翘花蕾全长cDNA文库,该文库容量为3.47×10^5,重组率为81.6%,插入片段多集中在500—1000bp之间,所占比例为71%;随机测序的cDNA克隆中均含有完整开放阅读框的全长cDNA序列。结论应用RACE法成功构建了连翘花蕾全长cDNA文库。  相似文献   
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