液基薄层细胞学检测联合高危型人乳头瘤病毒检测对宫颈癌前病变的诊断价值探讨

目的 本研究旨在探讨液基薄层细胞学(LCT)检测联合高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)检测对宫颈癌前病变的诊断价值.方法 对门诊进行宫颈癌筛查的4009例患者的宫颈脱落细胞采用LCT联合HR-HPV基因分型,然后与宫颈组织病理学诊断结果进行比较分析,探讨这两种宫颈癌筛查方法的灵敏度和特异度.结果低于21岁的女性受试者的HPV、LCT以及两者联合检测的阳性率明显高于21~29岁、30~65岁、﹥65岁的女性受试者.本研究2716例30~65岁女性人群中,宫颈组织病理学异常者158例,其中HR-HPV阳性者占81.6%(129/158);宫颈细胞学异常者占55.7%(88/158);LCT联合HR-HPV阳性者占88.0%(139/158).LCT联合HR-HPV检测的灵敏度和特异度高于单独的LCT检测或者HR-HPV检测.结论 在宫颈癌筛查中,LCT联合HR-HPV检测的灵敏度和特异度高于单独的LCT检测或者HR-HPV检测,可发现LCT或者HR-HPV漏诊的宫颈组织病变,从而降低癌前病变及宫颈癌的发生率和死亡率,值得在临床大力推广应用.     

深圳地区12960例地中海贫血筛查受检者的地中海贫血基因型分析

目的 探讨深圳地区地中海贫血基因型特征,及其罕见基因型碱基突变位点.方法 选择2014年5月至2015年10月于广东省深圳市第二人民医院拟行地中海贫血筛查的12 960例受检者为研究对象.研究对象纳入标准:①红细胞平均体积(MCV)＜80 fl的门诊及住院患者;②于本院行产前筛查的孕妇.排除标准:①不愿意参加本试验者;②已被确诊为其他血液系统疾病者.受试者先进行血常规MCV、血红蛋白(Hb)电泳和红细胞脆性检测的地中海贫血筛查试验,对筛查试验阳性(红细胞脆性＜70％)的患者,采用跨越断裂点PCR及反向斑点杂交(RDB)技术进行地中海贫血基因常见缺失型和点突变的基因型检测.对常见基因型检测不能确诊的患者,采用巢式PCR和PCR-直接测序(SBT)技术进行罕见基因型分析.本研究遵循的程序符合深圳市第二人民医院制定的伦理学标准,得到该委员会批准,并征得受试对象本人的知情同意,与之签署临床研究知情同意书.结果 12 960例受检者中,地中海贫血筛查试验阳性患者为2 194例,通过常见基因型检测,确诊1 019例为地中海贫血,检出率为46.4％.537例α地中海贫血患者中,以东南亚缺失型(--SEA/αα)比例最高,占66.1％(355/537),其次为α地中海贫血2(-α 3.7/αα)占15.6％(84/537),而基因型(αCS α/αCSα、αQS α/αQS α、αWS α/αWSα)和4种HbH病基因型(-α3.7/αQS ααQS、--SEA /αCS αCS、--SEA/αQS αQS、--SEA/αWS αWS)较为少见.α地中海贫血罕见基因型检出率为0.1％(3/2 194),包括2例HKαα/--SEA及1例HKαα/αα.在456例β地中海贫血患者中,β41-42(-TCTT)/β和β654(C＞T) /βA基因型检出率最高,分别为33.8％(154/456)和30.3％(138/456).在26例β复合α地中海贫血患者中,以β复合α地中海贫血1(--SEA/αα)基因型检出率最高(34.6％,9/26).β地中海贫血罕见基因型检出率为0.2％(4/2 194),包括2例β37G＞A),突变点为413 G＞A或405 G＞A,1例β88-93(-AGTG),突变点为557处出现杂合峰,1例β-88(C＞T),突变点为-88 C＞T.结论 深圳地区地中海贫血基因型有独特的分布特征,巢式PCR技术有助于发现HKαα/--SEA及HKαα/αα基因型.采用PCR-SBT技术能鉴定罕见地中海贫血基因型并发现新突变点.本研究结果为在深圳地区开展遗传咨询和产前诊断提供了参考数据.     

鞘氨醇激酶2(SphK2)基因敲除小鼠繁殖及基因型鉴定

目的 繁殖和快速鉴定鞘氨醇激酶2(SphK2)基因敲除小鼠.方法 将SphK2敲除杂合子小鼠进行配种繁殖,提取子代小鼠尾部DNA,用PCR方法检测子代小鼠基因型.结果 SphK2杂合子小鼠的饲养及繁殖均获得成功,获得子代小鼠,基因型分别为杂合子(SphK2+/-)、纯合子(SphK2-/-)和野生型(SphK2+/+).结论 SphK2基因敲除小鼠的繁育和鉴定均获得成功,为进一步研究SphK2生物学功能提供了理想的动物模型.     

昆明地区571例门诊患者HPV感染情况分析

目的探讨昆明地区女性子宫颈感染人乳头瘤病毒(human Papillomavirus,HPV)的基因型分布和感染率情况。为预防HPV感染和宫颈癌防治提供依据。方法以MY09/MY11为外引物,GP5+/GP6+为内引物,通过巢式PCR(n PCR)检测妇科门诊样本571例,并将扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳,将在150bp处有条带的样本送测序,测序结果通过NCBI网站blast功能开展核酸比对,并进行基因分型。结果 535例门诊患者中阳性病例111例,阳性率20.75%,其中高危型77例,占总阳性率69.37%,低危型34例,占总阳性率30.63%。结论昆明地区女性子宫颈感染HPV最常见的亚型依次为16、58、33、35、18和31。低危型最常见的亚型依次为6、81、11、91。高危型为常见类型,占总阳性率的69.37%,16型和58型为主要高危感染亚型,6型为主要低危感染亚型。     

安徽东部地区结核分枝杆菌基因分型及耐药情况的初步分析

目的 了解安徽东部地区结核分枝杆菌基因分型及耐药情况,为本地区肺结核的防治提供依据.方法 对从临床收集的80例结核菌株进行培养,分别通过可变数目串联重复序列分型技术、药敏实验对菌株进行分型、耐药情况分析.结果 单耐药菌株占25.00％,多耐药菌株占23.75％.单耐药菌株以利福平和对氨基水杨酸占多数,分别为28.75％和22.50％;多耐药菌株以对异烟肼和利福平耐药最多,占52.63％.初治病人和复治病人对吡嗪酰胺耐药差异有统计学意义(P =0.032),对其他药物的耐药差异均无统计学意义(均有P＞0.05).15个基因位点均呈现等位基因多态性,QUB11a位点多态性最高为0.85,Mtub31位点仅为0.11.80株菌株可分为33个基因型,仅有16例患者的分离株为单一基因型,其余菌株可归入14个簇.结论 本地区结核分支杆菌的耐药率较高,基因分型复杂.     

不同基因型HBV感染患者血清Lp(a)检测及其临床意义分析

目的 探讨乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染患者不同基因型与健康人血清脂蛋白(a)[lipoprotein (a),LP(a)]水平相关性的临床意义.方法 分别取HBV感染患者A基因型35例,B基因型57例,C基因型56例,D基因型52例和健康对照64例血清,采用全自动生化分析仪对其脂蛋白(a)进行检测.结果 A,B,C,D四个基因型HBV感染患者的Lp(a)均低于健康对照组(P＜0.05).而且不同基因型HBV感染患者的最终治疗转归率和治愈率不同.结论 HBV能抑制脂蛋白(a)的表达,且其血清中表达水平与乙肝的基因型相关.     

长链非编码RNA H19基因多态性与早发冠心病患者易感性研究

目的:探讨编码一段长链非编码RNA的 H19基因多态性与早发冠心病(pCAD)患者易感性的相关关系?方法:采用TaqMan技术分析 213 例早发冠心病患者和 776 例对照的H19基因 4个多态位点(rs2067051?rs2251375?rs217727?rs4929984)的基因型,用 SPSS 软件进行统计学分析?结果:早发冠心病组H19基因rs217727位点的CT基因型?TT基因型及T等位基因分布频率均高于对照组?多元Logistic回归分析显示:rs217727多态性与早发冠心病发病独立相关(P < 0.01)?T等位基因携带者?TT纯合基因患早发冠心病的风险分别是CC纯合基因型的2.42倍(OR=2.42,95%CI=1.55~3.71)和3.01倍(OR=3.01,95%CI=1.87~4.85)?结论:H19 rs217727多态性与早发冠心病易感性有关,T等位基因可能是早发冠心病的遗传易感因素?     

猪源产志贺毒素大肠埃希茵耐药性及超广谱β内酰胺酶基因型分析

目的了解我国猪源产志贺毒素大肠埃希菌（Shigatoxin-producingEscherichiacoli，STEC）产超广谱8内酰胺酶（Extended—spectruml β-lactamases，ESBLs）情况及其基因型。方法对22株分离自重庆地区2个规模化养殖场健康猪粪的STEC菌株进行药物敏感性检测、ESBLs表型确证及7种类型（blaSHV，blaLEN,blaOKP，blaTEM，blaCTX-M,blaGES及blaKPC）ESBLs基因型PCR检测和测序分析。结果22株携带stx2e的STEC菌株中2株对所有23种测试抗生素敏感，其余菌株除对亚胺培南和美罗培南敏感外，对其他抗生素均存在不同程度耐药。10株sTEc菌株（占45．45％）产ESBLs酶。PCR检测其中1株为blaCTX-M-1基因型，其余9株为blaCTX-M-9 ＋blaTEM-1基因型。结论重庆地区猪源STEC中存在较高比例的产ESBLs菌株。在加强人和动物STEC感染检测与监测的同时，应进行细菌耐药性监测。     

蛋白磷酸酶1调节亚基11基因多态性与丙型肝炎病毒自发清除的相关性分析

目的 探讨蛋白磷酸酶1调节亚基11（PPP1R11）基因多态性与丙型肝炎病毒（HCV）感染自发清除的相关性.方法 选择2009年1月至2013年5月于广州血液中心行无偿献血的献血者中,血液样品HCV抗体的酶联免疫吸附试验（ELISA）检测结果呈阳性的328例献血者为研究对象.将研究对象随访结果中,HCV RNA检测结果呈阴性,但经重组免疫印迹试验（RIBA）确证为HCV抗体呈阳性献血者纳入自发清除组（n=134）;HCV RNA检测结果呈阳性献血者纳入慢性感染组（n=194）.采用序列特异性引物聚合酶链反应（PCR-SSP）检测PPP1 R11基因rs3807031位点基因型,分析其与HCV自发清除的相关性.结果 自发清除组献血者的平均年龄为（28.8±10.2）岁低于慢性感染组的（31.0±9.0）岁.二者比较,差异有统计学意义（t=2.135,P=0.034）.自发清除组中女性比例为35.8％,高于慢性感染组的21.6％.二者比较,差异有统计学意义（x2 =7.994,P=0.005）. rs3807031的等位基因A和C在自发清除组的基因频率分别为30.6％和69.4％,在慢性感染组中则为22.4％和77.6％.两组献血者rs3807031等位基因频率比较,差异有统计学意义（x2 =5.538,P=0.023）.多因素非条件logistic回归分析结果表明,性别（OR=1.957,95％CI：1.118～3.224,P=0.008）和rs3807031基因型（OR=0.650,95％CI：0.450～0.973,P=0.021）是HCV自发清除的独立影响因素.结论 PPP1R11基因rs3807031位点基因型与HCV自发清除显著相关,可作为HCV感染自发清除的预测因素,为进一步研究机体自发清除HCV的机制及分子标志物提供了科学证据.     

结核性脑膜炎临床分离株的耐药性和基因型相关性分析

目的 了解结核性脑膜炎（tuberculous meningitis,TBM）的致病菌在耐药性和基因型方面的相关性.方法 从500例疑似TBM患者脑脊液标本中经MGIT（Mycobacteria growth indicator tube）960培养仪分离培养出25株结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis,Mtb）,对这25株Mtb分别进行间隔区寡核苷酸分型（Spoligotyping）法基因分型、14种抗结核药物的药物敏感性试验、10个耐药基因测序.结果 20株为北京基因型,占80.0％（20/25）;耐多药结核性脑膜炎（MDR TBM）有3株（3/25）,都属于北京基因型;测序结果显示inhA、embB、gyrB、eis 基因未发生突变,katG、rpoB、gyrA、rrs-KAN、rpsL、gidB基因发生突变.结论 北京基因型在耐药TBM中所占比例高,尤其是MDR-TBM.耐药TBM临床分离株与相关耐药基因突变有关系.