青蒿琥酯治疗家犬卫氏并殖吸虫感染的效果观察

目的探讨青蒿琥酯（Art）对双倍体卫氏并殖吸虫病的治疗作用。方法1）卫氏并殖吸虫成虫用含不同浓度Art的RPMI 1640培养基体外培养后作电镜观察;2）实验犬常规感染卫氏并殖吸虫囊蚴,76 d后用青蒿琥酯50和80mg/kg灌胃治疗,103 d解剖犬,作常规病理检查,取出的虫体作电镜观察。结果1）5 mg/kg组体外培养24 h后,虫体萎缩,扫描电镜观察部分体棘消失、倒伏、絮状物附着;透射电镜显示皮层水肿、细胞器及分泌颗粒减少,卵黄腺萎缩,卵巢卵细胞胞浆空泡变等;2）两治疗犬体内虫体萎缩,厚壁囊肿数分别为28和35个,对照犬为16个,差异有显著性（P〈0.05）;透射电镜显示成虫变化与体外培养试验相似。结论青蒿琥酯对卫氏并殖吸虫有损伤作用。     

弓形虫三磷酸核苷水解酶基因克隆、表达与鉴定

目的 对刚地弓形虫三磷酸核苷水解酶基因（NTPase）进行克隆、表达和鉴定。 方法 采用PCR扩增刚地弓形虫RH株的NTPase基因，克隆入pGEM?-T Easy载体，经酶切与测序鉴定后亚克隆至表达质粒pBAD-HisB，并转入大肠埃希菌(E.coli)BL21（DE3）中进行诱导表达。用镍-次氮基三乙酸亲和层析柱纯化重组质粒pBAD-HisB-NTPase表达产生的含组氨酸的重组蛋白，用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和蛋白质印迹（Western blotting）分析蛋白表达产物。 结果 PCR扩增得到特异的刚地弓形虫NTPase-Ⅱ基因序列，经测序鉴定无基因突变。SDS-PAGE结果表明NTPase-Ⅱ基因在E.coli BL21（DE3）中获得高效表达，其融合蛋白相对分子质量（Mr）约70 000，与理论值相近。Western blotting分析结果显示，纯化的重组蛋白可被弓形虫感染的鼠血清及鼠抗重组蛋白血清识别。 结论 所克隆表达的弓形虫NTPase-Ⅱ重组蛋白具有良好的抗原性。     

抗阴道毛滴虫AP33单克隆抗体的制备及其功能初探

目的 制备阴道毛滴虫（T.υ317株）黏附蛋白抗原（AP33）单克隆抗体并初步分析鉴定其功能。　方法　将制备和纯化的融合黏附蛋白33（rAP33）为抗原，免疫BALB/c小鼠，共免疫3次（抗原含量分别为100、50和100 μg），每次间隔2周，末次免疫后3 d取小鼠脾细胞及SP2/0骨髓瘤细胞在聚乙二醇（PEG1500）作用下进行细胞融合，筛选出高滴度分泌的McAb 杂交瘤细胞株，测定其免疫球蛋白亚类及其效价，蛋白质印迹（Western blotting）分析其特异性，间接免疫荧光实验（IFAT）进行定位，并初步探讨其体外对阴道毛滴虫黏附HeLa细胞的抑制作用。 结果 经筛选获得能稳定分泌抗AP33单克隆抗体的5株（4A2， 4F11， 4F8， 4E7和4H11）杂交瘤细胞株，经免疫球蛋白类型和亚型鉴定为IgG1; ELISA和Western blotting分析显示，5 株单抗均能与重组阴道毛滴虫AP33发生特异性结合；IFAT显示其中4株（4F11， 4F8， 4E7， 4H11）可识别培养的阴道毛滴虫，体外滴虫黏附抑制实验显示终浓度分别为200、200、400和200 μg/ml，该4株单抗体外对滴虫黏附HeLa细胞的抑制率分别为50.08%、65.03%、50.70%和49.08%。 结论 制备的抗重组AP33单克隆抗体，体外对阴道毛滴虫黏附有较好的抑制功能。     

弓形虫三磷酸核苷水解酶-II的克隆、表达及初步应用

目的 探讨弓形虫RH株速殖子NTPase-Ⅱ重组蛋白的免疫反应性及其在抗体检测中的应用。方法 通过PCR获得NTPase-Ⅱ基因,克隆入pGEM-T Easy载体,经酶切与测序鉴定后亚克隆至表达质粒pBAD-HisB,构建原核表达重组质粒,在大肠杆菌中以包涵体形式获得高效表达。SDS-PAGE和Western-blot分析蛋白表达产物。用纯化的表达产物作为诊断抗原,通过对反应条件的优化,初步建立检测抗NTPase-Ⅱ抗体的间接ELISA方法 。结果 PCR扩增得到特异的弓形虫NT-Pase-Ⅱ基因序列,经测序鉴定无基因突变。重组质粒诱导表达产物相对分子量约70kD,与理论值相符。经Western-blot证实,重组蛋白可刺激机体产生相应的抗体。具有良好的抗原性和免疫原性。用表达的重组NTPase-Ⅱ蛋白初步建立了用于NTPase-Ⅱ抗体检测的间接ELISA方法 。结论 重组NTPase-Ⅱ蛋白具有较强免疫原性,可作为诊断抗原用于急性弓形虫感染诊断试剂的研发。     

青蒿琥酯对卫氏并殖吸虫童虫体内外杀虫效果观察

目的观察青蒿琥酯对卫氏并殖吸虫童虫的杀虫效果。方法卫氏并殖吸虫囊蚴腹腔注射法感染大鼠,10d后按不同剂量服用青蒿琥酯,首次剂量加倍,连用6d。30d后剖解大鼠,观察青蒿琥酯减虫率;并与吡喹酮作比较;正常对照组童虫做体外培养,观察童虫在药液中的活动情况。结果服药后,青蒿琥酯低、中、高三个剂量组、吡喹酮组及对照组童虫检出率分别为26.1%、16.9%、15.9%、2.25%、83.6%,童虫重量减轻,体形减小(P<0.05);体外培养,病理组织切片表明:用药组童虫体棘都有改变。结论青蒿琥酯对卫氏并殖吸虫童虫有一定的杀灭效果。     

弓形虫P30乳酸球菌口服免疫小鼠血清中IFN-γ、IL-2及NO含量的测定

目的 观察弓形虫P30乳酸球菌（L．1actis／P30）口服免疫鼠血清中细胞因子IFN-γ、IL-2及NO的变化情况。方法 L．1actis／P30口服免疫BAI。B／c小鼠，以gp42乳酸球菌组和生理盐水组为对照，在第3周、第9周及第12周分别收集各实验组小鼠血清，ELISA法测定血清IFN-γ、IL-2含量；酶法测定N0浓度。结果L．1actis／P30i21服免疫鼠血清中IFN-γ，IL-2含量均显著高于两对照组，血清中N0含量随着免疫时间延长与两对照组差异逐渐明显。结论 L．1actis／P30口服免疫能有效刺激小鼠细胞因子IFN7和IL2的产生及N0分子的释放。     

浙南人与猪感染带绦虫初报

带绦虫病是人畜共患病,我省至今尚乏报告。作者等于1968～1985年在浙南,先后发现在外省流行区感染的5例患者,其中一例已引起当地放养的肉猪感染,为提高警惕特予报道。(一)猪囊尾蚴自然感染:1984年9月永嘉县岩头区孤山乡潘××家饲养的一头     

浙南猪冠尾线虫病及人患蚴移行症的发现

目的：了解浙南猪冠尾线虫病流行情况和危害及其蚴对人的致病性，方法：检验尿中肾虫卵及肾虫分布处的病态，从猪舍分离感染性蚴，并经口、肤感染豚鼠、观察杀虫药疗效。同时以免疫学检测易感人群与皮炎患者。结果：母猪冠尾线虫感染率为50．1％，肉猪为14．1％，成虫寄生于输尿管周围占66．7％，猪的多处脏器有病变。猪舍内冠尾细虫蚴较多，清理猪舍者易遭蚴侵袭致皮炎，从匐行疹处获蚴，结论：浙南猪冠尾线虫病流行广，危害性大；发现人患该蚴移行症。     

ELISA法诊断实验性大鼠肝毛细线虫病

目的：实验研究肝毛细线虫对大鼠的血清抗体水平的影响，为人体肝毛细线虫病的免疫诊断提供科学依据。方法：捕获阳性鼠分离肝毛细线虫虫卵，将虫卵培养至感染期，感染大白鼠。制作虫卵可溶性抗原，用ELISA法对大鼠体内血清抗体作动态检测，并选用5种对照血清作比较，以观察该法的特异性。结果：大鼠在感染4周后可全部阳性检出，该法对大鼠旋毛虫、日本血吸虫、犬弓蛔虫、广州管圆线虫和肺吸虫抗体阳性血清分别有2／10、2／10、2／10、1／10和0的假阳性。结论：ELISA法具有较高的敏感性和特异性，适用于检测肝毛细线虫感染。     

温州地区腹泻患者圆孢子虫感染情况调查

圆孢子虫是一种新近引起人们重视的、导致腹泻的重要病原之一 [1 ] ,国内 1995年在福建首先发现人体圆孢子虫病病例[2 ] 。以后 ,广东、南京、西安、陕西等省市均有病例报道。为了解圆孢子虫在温州市腹泻人群中的感染情况 ,作者于 1998年 5月～ 2 0 0 1年 6月收集市区 3所医院 86 0例腹泻患者粪便标本进行检查 ,现将结果报道如下。1　对象和方法1.1　调查对象　 1998年 5月～ 2 0 0 1年 6月间收集温州市区 3所医院肠道门诊或住院腹泻患者粪便标本 ,共 86 0例。1.2　检查方法　送检的粪便先行颜色、性状等观检记录 ,于收集当天进行直接涂片 ,…