预测非肌层浸润性膀胱尿路上皮癌患者复发的炎症反应标志物评分系统构建

目的探讨采用4种炎症反应标志物构建预测非肌层浸润性膀胱尿路上皮癌(NMIBC)患者复发的炎症评分系统。方法选取海南医学院第一附属医院在2012-01-01-2016-02-27收治的271例NMIBC患者。术前1周收集患者中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)、血小板与淋巴细胞比值(PLR)、白蛋白与球蛋白比值(AGR)、淋巴细胞与单核细胞比值(LMR)。基于NLR、PLR、AGR和LMR最佳截断值构建中性粒细胞与淋巴细胞比值-血小板和淋巴细胞比值-白蛋白球蛋白比值-淋巴细胞和单核细胞比值(NPAL)评分系统(NPALSS),并结合多因素Cox风险比例模型分析NPALSS的临床价值。结果所有患者均获得随访,随访时间18~89个月,平均时间为(55.84±22.68)个月。随访末期64例患者复发,复发率为23.6%,中位无复发生存时间41个月。NLR、PLR、AGR和LMR 4种炎症反应标志物的曲线下面积(AUC)分别为0.785、0.694、0.866和0.750,最佳截断值分别为2.37、136、1.71和3.64。NLR≤2.37、PLR<136、AGR≥1.71、LMR≤3.64患者的无复发生存率高于NLR>2.37、PLR≥136、AGR<1.71、LMR>3.64患者,均Log-rank P<0.001。NPALSS不同等级的生存曲线比较差异有统计学意义,均Log-rank P<0.001。肿瘤数量(HR多发=1.026,95%CI为1.002~1.051)、T分期(HRT1=1.031,95%CI为1.009~1.054)、NPALSS(HR_1级=1.017,95%CI为1.001~1.034;HR_2级=1.935,95%CI为1.438~2.605;HR_3级=2.213,95%CI为1.646~2.977;HR_4级=2.518,95%CI为1.810~3.503)是NMIBC患者复发的独立危险因素,均P<0.05。结论结合NLR、PLR、AGR和LMR最佳截断值所构建的NPALSS可以有效预测高复发风险的NMIBC患者。     

清肠汤在食管癌根治术后胃功能恢复中的应用

目的探讨清肠汤在食管癌根治术后胃功能恢复中的应用效果。方法选取2016年1月-2017年1月在我院拟行食管癌根治术的78例患者作为研究对象,按照随机数字表的方法分为观察组和对照组,各39例。对照组实施基础性的治疗,包括静脉补液、适量补充维生素以及微量元素等,观察组在对照组基础上予清肠汤治疗,分别对2组术后临床指标、T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+和CD8+)以及生活质量进行客观比较。结果经比较,观察组胃动力恢复时间、腹痛和腹胀缓解时间、住院时间均短于对照组,2者差异明显(P 0.05);2组治疗后T淋巴细胞亚群水平出现不同程度的变化,观察组的变化显著于对照组,差异明显(P 0.05);随访半年后,观察组病情改善情况优于对照组,差异显著(P 0.05)。结论清肠汤有助于提高食管癌根治术后患者的胃功能恢复,在一定程度上调节了患者的免疫功能,提高生活质量。     

肺癌遗传易感差异表达miRNA的筛选及生物信息学分析

目的 肺癌是目前我国死亡率最高的恶性肿瘤,发病率和病死率持续升高,且预后较差,患者的5年生存率小于15％,严重威胁人们的健康。筛选肺癌遗传易感差异表达的miRNA,分析差异表达的miRNA的靶基因功能,可为进一步研究miRNA在肺癌发生发展过程中的作用提供实验基础。方法 采用高通量测序技术检测海南地区汉族肺癌患者和对照患者血清中差异表达的miRNA,通过生物信息学方法预测差异miRNAs的靶基因,并对靶基因进行GO功能富集分析、KEGG信号通路分析和蛋白相互作用分析。结果 肺癌患者和对照患者共筛选出3个显著差异表达的miRNA (P<0.05,|log2 (Fold Change)|≥1) ,且均呈下调状态。差异表达miRNAs所预测的靶基因显著参与癌症通路、 轴突导向通路、代谢通路,NUFIP2、PLAGL2、IGF1R基因编码的蛋白在互作网络中具有重要作用。结论 海南地区肺癌患者和对照患者间存在3个差异表达的miRNAs,这些miRNAs可能通过调控癌症、轴突导向、代谢等信号通路,调节下游靶蛋白参与肺癌的发生过程。     

绝经后血清BMP-7、OCN水平与骨质疏松的相关性研究

目的探究骨形态发生蛋白-7(BMP-7)、骨钙素(OCN)在绝经后骨质疏松(OP)患者血清中的水平与骨代谢指标骨特异性碱性磷酸酶(BAP)、I型胶原交联氨基末端肽(NTX)及骨密度(BMD)的相关性。方法选取2017年5月至2019年3月收治的93例绝经女性OP患者作为OP组;并以同期来我院进行健康体检的86例绝经女性作为对照组进行研究;以实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测两组受试者血清BMP-7、OCN表达水平;以酶联免疫吸附法(ELISA)检测两组受试者血清BAP、NTX水平,计算BAP/NTX比值;利用双能X线骨密度仪测定两组受试者骨密度;分析OP患者血清BMP-7、OCN表达水平与骨代谢相关指标、BMD的相关性及BMP-7表达水平与OCN的关系; Logistic回归分析OP发生的影响因素。结果 OP组患者雌二醇水平、血清BMP-7、OCN、BAP/NTX、BMD水平均明显低于对照组(t=11.962、9.969、12.823、4.052、18.215,P均0.05); OP组患者血清BAP、NTX水平均明显高于对照组(t=4.014、9.092,P均0.05); OP患者血清BMP-7、OCN表达水平与BAP、NTX均呈负相关(P均0.05),与BAP/NTX、BMD均呈正相关(P均0.05),BMP-7表达水平与OCN呈正相关(P 0.05);雌二醇、BMD是影响OP发生的保护险因素(95%CI=0.536～0.978、0.335～0.916,P均0.05),BAP、NTX是影响OP发生的危险因素(95%CI=1.336～1.859、1.427～2.357,P均0.05)。结论绝经女性血清BMP-7、OCN表达水平下调,BMP-7、OCN与骨代谢指标及BMD密切相关,两者可能与BAP、NTX、BMD相互影响,从而在OP发展进程中发挥作用。     

慢性阻塞性肺疾病继发肺部感染的炎性因子及TLR7/IL-23/IL-17信号通路作用

目的探究慢性阻塞性肺疾病(Chronic obstructive pulmonary disease,COPD)继发肺部感染的炎性因子及Toll样受体7/白细胞介素-23/白细胞介素-17(Toll like receptor-7/Interleukin-23/Interleukin-17,TLR7/IL-23/IL-17)信号通路作用。方法选取2015年6月-2019年1月海口市中医医院收治的COPD患者120例,根据是否并发肺部感染及感染严重程度分组,选取同期于医院体检的健康者30名作为对照组,患者均抽取空腹静脉血5 ml,部分置于含有EDTA的抗凝管中,部分离心上清,-80℃保存待测。取部分血液样本,采用荧光定量PCR法(qPCR)检测外周血单个核细胞TLR7表达;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测白细胞介素-2(Interleukin-2,IL-2)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、IL-17、IL-23、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、γ-干扰素(γ-interferon,IFN-γ)水平;采用流式细胞术检测pDC及T细胞亚群比例;采用免疫比浊法检测免疫球蛋白A(Immunoglobulin A,IgA)、免疫球蛋白G(Immunoglobulin G,IgG)、免疫球蛋白M(Immunoglobulin M,IgM)水平。结果轻度感染组和重度感染组的TLR7表达水平均高于对照组(P<0.05);重度感染组的TLR7表达水平高于未感染组(P<0.05);轻度感染组和重度感染组的IL-6、IL-17、IL-23、TNF-α、IFN-γ水平高于对照组和未感染组,IL-2水平低于对照组和未感染组(P<0.05);轻度感染组和重度感染组的pDC、CD4^+、CD4^+/CD8^+比例高于对照组,CD8^+低于对照组(P<0.05);重度感染组的pDC、CD4^+、CD4^+/CD8^+比例高于未感染组,CD8^+低于未感染组(P<0.05);重度感染组的IgA、IgG、IgM水平低于对照组和未感染组(P<0.05)。结论COPD继发肺部感染患者的TLR7表达上升,抑炎因子水平下降,促炎因子分泌增加,提示炎症反应持续。     

颅内深静脉血栓形成的临床诊治

目的　探讨颅内深静脉血栓形成（deep cerebral venous thrombosis，DCVT）的临床诊断与治疗策略。 方法　回顾性分析10年来影像学诊断为DCVT的5例患者的临床表现、影像学特征、治疗及预后情况。 结果　DCVT最常累及Rosenthal基底静脉、大脑内静脉、Galen静脉和直窦，其临床表现不典型，常见有头痛、意识障碍、复视、偏瘫等，常见诱发因素有口服避孕药、产褥期、妊娠期等。丘脑水肿为DCVT患者最常见的影像学征象。肝素抗凝治疗简单有效，大脑深静脉可恢复再通，临床症状缓解。 结论　DCVT患者临床症状缺乏特异性，早期诊断困难，特殊成像技术和特定影像学特征有助于其明确诊断，及时正确的抗凝治疗可获得良好的预后。     

冷冻切片后甲醛固定石蜡包埋组织DNA质量分析

目的分析冷冻切片后再行甲醛固定、石蜡包埋组织的DNA质量,探讨其在分子病理检测中的应用价值。方法收集已行术中快速冷冻病理诊断的肺腺癌14例,分别提取同一病例冷冻切片后剩余组织蜡块及常规包埋组织蜡块DNA,检测DNA浓度及OD260/OD280值,行内参基因PCR扩增以检测DNA完整性,并以ARMS法行EGFR基因突变检测。结果冷冻切片后固定包埋组织提取DNA浓度及OD260/OD280均值,分别为157.33 ng/μL及1.96,均较常规包埋组织低;所有冷冻后包埋组织提取的DNA均具有100 bp及200 bp的PCR产物,但仅部分能扩增出300 bp及400 bp的PCR产物,DNA完整性稍逊于常规固定包埋组织;冷冻后包埋组织与常规包埋组织EGFR基因突变检测结果完全一致。结论组织冷冻后再行甲醛固定及石蜡包埋,会使得组织DNA进一步降解及片段化,但仍适用于ARMS法的分子病理学检测。     

姜黄素抑制硝普钠诱导的大鼠软骨细胞凋亡机制研究

目的 探讨姜黄素抑制硝普钠(SNP)诱导的大鼠软骨细胞凋亡的机制研究。 方法 每组取4只SD大鼠关节软骨，细胞进行原代培养，将软骨细胞分成6组，分别为空白对照组(A组)，SNP损伤组(B组)，SNP+5 μmol/L姜黄素组(C组)，SNP+10 μmol/L姜黄素组(D组)，SNP+20 μmol/L姜黄素组(E组),SNP+30 μmol/L姜黄素组(F组)。用CCK8法检测不同浓度的姜黄素对软骨细胞增殖的影响，同时检测各组中软骨细胞的活性；用RtPCR检测软骨细胞MMP-13、caspase-3、Bax和Bcl-2基因的表达情况；用Hoechst 33342染色观察软骨细胞核凋亡情况；Western Blotting检测线粒体凋亡途径相关蛋白的表达情况。 结果 ①当姜黄素的浓度为20 μmol/L时，姜黄素对软骨细胞的促增殖作用最为明显；②CCK8法检测各组细胞的活性率从大至小依次为A组＞E组＞D组＞C组＞F组＞B组；③RtPCR检测软骨细胞caspase-3、Bax和Bcl-2表达量经姜黄素处理后均有显著变化；④Hoechst 33342染色结果表明姜黄素能改善SNP诱导的软骨细胞核染色质的损伤，减少软骨细胞中的线粒体膜电位；⑤Western boltting检测各组软骨细胞中caspase-3、Bax、蛋白的表达情况，表达量依次为B组＞E组＞A组；Bcl-2蛋白的表达情况，表达量依次为A组＞E组＞B组。 结论 姜黄素通过抑制线粒体凋亡途径，从而减少SNP诱导的大鼠软骨细胞的凋亡。      

血清Asprosin水平与绝经后女性骨密度、平衡能力和骨折发生率的相关性

目的探讨血清Asprosin(白脂素)水平与绝经后女性骨密度(bone mineral density,BMD)、平衡能力和骨折发生率的相关性。方法回顾性分析海南医学院第一附属医院收治的164例绝经后女性骨质疏松症(osteoporosis,OP)患者的临床资料。记录患者一般临床资料以及骨折发生率、髋部骨密度、平衡指数评分(BIS),前后比(FBR)和左右比例(RLR)。分析白脂素与BMD、BIS、FBR、RLR以及骨折发生率的相关性。结果非骨折组血清白脂素水平为(3.56±0.54)pg/mL,骨折组血清白脂素水平为(6.56±1.01)pg/mL,两组血清白脂素水平比较差异有统计学意义(P<0.05);Spearman试验结果显示,白脂素与BIS、FBR和RLR及BMD呈负相关(P<0.05);白脂素与年龄(r=0.384)、身高(r=0.343)、体质量指数(r=0.181)和髋部BMD显著相关(r=0.387),但与体重无显著相关性(r=0.022,P>0.05)。Logistic回归分析与线性回归分析显示,髋部BMD、身高、年龄和体质量指数是影响白脂素的独立因素。结论白脂素可能是绝经后女性出现骨密度降低和平衡能力下降及出现骨折的危险因子,与髋部BMD、身高、年龄和体质量指数密切相关。