套式逆转录聚合酶链反应在黄热病毒快速检测中的应用

目的 建立灵敏、特异的套式逆转录聚合酶联反应(RT-PCR)快速检测黄热病毒方法。方法 参照黄热病毒标准株D17序列设计套式引物，并检索国际基因序列数据库初步验证其特异性，随后对镁离子、dNTP及引物浓度，PCR反应条件进行优化，建立稳定、特异的套式RT-PCR快速检测黄热病毒方法，并以同属于黄病毒科的登革病毒1～4型、流行性乙型脑炎病毒为对照，验证其特异性。结果 外引物扩增可获得404 bp左右的特异性扩增片断，阴性对照毒株未见设计大小的扩增片断，但可见非特异性片断；内引物扩增可获得349 bp左右片断，阴性对照无扩增条带。结论 套式RT-PCR可快速、灵敏、特异的检测黄热病毒。     

微孔杂交快速检测黄热病及乙型脑炎病毒方法的建立

聚合酶链反应(PCR)技术已广泛应用于疾病诊断，但由于临床标本复杂，常出现非特异性扩增条带或电泳拖尾现象，给结果的判定带来困难。为了探讨更加敏感、特异的流行性乙型脑炎病毒(JEV，乙脑)及黄热病病毒(YF)快速检测方法，我们分别设计了黄热及乙脑病毒的特异性包被探针及检测探针，建立了快速检测YF及乙脑病毒的微孔杂交(PCR-ELISA)方法。     

多重逆转录-聚合酶链反应快速检测登革病毒及其临床应用

目的 建立登革1～4型病毒的多重逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)快速检测及分型方法。方法 参照登革1～4型病毒核酸序列设计多重RT-PCR引物，并检索国际基因序列数据库初步验证其特异性，随后对PCR反应条件进行优化，以同属于黄病毒科的黄热病毒、流行性乙型脑炎病毒为对照，验证其特异性。并对2003年30份临床疑似登革患者血清标本进行了检测，阳性片段克隆测序验证扩增片段特异性。结果 采用多重PCR引物对登革1～4型病毒进行扩增，分别获得295、237、118、347bp片段，与设计相符；而黄热病毒及流行性乙型脑炎病毒均无非特异性扩增条带，对引物的相关性实验结果表明引物之间不会因相互干扰而出现假阳性结果，30份疑似患者血标本RT-PCR扩增阳性率为83．3％(25／30)，其核酸序列与登革1型病毒柬埔寨株以及中国1997、1999年流行株GD14／97、G1305／99同源性分别为97％、97％、98％。结论 实验证明，所建立的多重PCR方法能够快速地检测和鉴定登革1～4型病毒，为登革病毒的检测及分型提供了一种方便易行的方法。     

中国库蠓属三囊亚属的研究(双翅目:蠓科)

目的　调查研究中国库蠓属三囊亚属的种类分布和分类。方法　用帐诱、灯诱和挥网采集蠓。结果　记述了中国库蠓属三囊亚属的鉴别特征 ,其在国内的分布现已知有 3 3种 ,报道了主要鉴别特征的测量值 ,编制了雌虫和雄虫的分种检索表。结论　为我国库蠓属三囊亚属的区系分布和分类研究提供了依据。     

登革热分子流行病学研究概况

登革热 (ｄｅｎｇｕｅｆｅｖｅｒ,ＤＦ)是一种急性虫媒传染病 ,其病原体为登革病毒 (ｄｅｎｇｕｅｖｉｒｕｓ,ＤＶ) ,属于黄病毒科黄病毒属 ,分为 4种血清型 (ＤＶ 1～ 4 )。ＤＶ可引起人类一系列疾病 :隐性感染、登革热和登革出血热 (ｄｅｎｇｕｅｈｅｍｏｒｒｈａｇｉｃｆｅｖｅｒ,ＤＨＦ) ,严重的还可导致登革休克综合征 (ｄｅｎｇｕｅｓｈｏｃｋｓｙｎｄｒｏｍｅ ,ＤＳＳ)。1.登革热的流行概况 :1779年在雅加达首次发生ＤＦ流行 ,此后波及几十个国家和地区。我国最早是 1873年在厦门有ＤＦ报告 ,194 0～ 194 5年 ,本病的流行更加严重。…     

广东省江门地区登革病毒分离株的鉴定及结构蛋白序列分析

目的：对广东省江门地区2001年夏、秋季一批发热、出疹患者进行确诊，并从分子水平分析流行株的可能来源。方法：分别采用免疫荧光、细胞毒力、乳鼠毒力实验以及逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）技术进行病毒鉴定，并对其结构蛋白基因序列进行克隆、测序及同源性搜索。结果：37份患者血清登革病毒（DV）IgM抗体阳性率为97％（36／37），IgG抗体阳性率为59％（22／37），最高抗体滴度均可达1：640。所得病毒可致C6／36细胞病毒，具有乳鼠神经毒力；其结构基因序列长度为2325bp，编码774个氨基酸；与其他登革2型病毒株TSV01、GD06／93、NGC、44、ThNH、04'GD08/98及S1进行比较，其核酸序列同源性（％）分别为98、96、94、94、92、92、92、91。结论：2001年江门地区登革热流行为登革2型病毒感染所致，推测其可能是输入性传染。     

我国甲病毒的研究进展

甲病毒属披膜病毒科 ,以往也称为A组虫媒病毒或甲组虫媒病毒 ,是一类由吸血昆虫或节肢动物叮咬敏感脊椎动物而传播的传染病。蚊虫为其主要传播媒介。目前已发现 2 8种甲病毒[1],其中与人类疾病密切相关的有 8种 :基孔肯雅病毒 (Chikungunyavirus ,CHIKV )、马雅罗病毒 (Mayarovirus ,MAYV)、罗斯河病毒 (Rossrivervirus ,RRV)、辛德毕斯病毒 (Sindbisvirus ,SINV )、东方马脑炎病毒 (easternequineencephalomyelitisvirus,EEEV )、西方马脑炎病毒 (westernequineencephalomyelitisvirus ,WEEV)、委内瑞拉马脑炎病毒(Venezuelane…