三种白纹伊蚊监测方法在登革热风险指示中的适用性探讨

  目的  了解三种常用白纹伊蚊监测方法在登革热风险指示中的适用性。  方法  2017年12月~2018年7月，在广州市白云区两农村同时用三种监测方法进行白纹伊蚊幼虫和成蚊密度监测，并收集同期气象数据和登革热病例情况。  结果  幼虫和成蚊密度消长均受气温影响，各监测指标反映的白纹伊蚊密度消长趋势一致，但幼虫与成蚊密度存在差异。2017年12月-2018年2月，两监测点布雷图指数为5.66~24.53，指示风险为1~3级，诱蚊诱卵指数和成蚊密度指数分别为0~4.00和0~1只/人·h，指示风险均为0级；3月份，布雷图指数反映风险等级为3级，而诱蚊诱卵指数分别为2.13和3.77，风险为0级，成蚊密度指数分别为4只/人·h和6只/人·h，指示风险为1级和2级；4月份之后，各监测指标反映的登革热风险等级趋于一致。  结论  布雷图指数指示的登革热风险总是高于或等于诱蚊诱卵指数和成蚊密度指数指示的风险。诱蚊诱卵指数和成蚊密度指数能较敏感地反映白纹伊蚊的活动情况，指示登革热风险的准确性高。     

广东省2017－2018年冬季流感流行特征研究

目的 分析广东省2017-2018年冬季流感流行特征,为流感季节性多样化的防控应对提供进一步的科学依据。方法 收集广东省2016年1月至2018年4月每周流感监测数据,分析2017-2018年冬季28家哨点医院门诊流感样病例（ILI）就诊比例、流感病毒阳性率、病原型别构成和暴发疫情特点,并使用χ²检验和Fisher确切概率法与2016年春季、2017年夏季流行期比较。结果 2017-2018年冬季ILI就诊比例平均水平为4.99%（157 235/3 149 656）,超过既往5年同期水平。门诊ILI和住院严重急性呼吸道感染病例（SARI）中,流感病毒阳性率分别为28.33%（2 137/7 543）和14.93%（256/1 715）,乙型Yamagata亚型分别占70.43%（1 505/2 137）和73.05%（187/256）。2017-2018年冬季流感暴发疫情257起,小学占82.49%（212/257）。冬、春季流感6~14岁儿童病例阳性率高于夏季（P<0.05）。夏季≥ 60岁老年人病例阳性率高于冬、春两季（P<0.05）。结论 广东省2017-2018年冬季流感流行主要由流感病毒乙型Yamagata亚型导致。针对流行季节多样性特点,广东省需要完善监测和提高流感疫苗接种率,以利于在不同季节流行有效防控。     

丁酸钠通过Ca~(2+)-CaMKK β信号通路诱导结直肠细胞自噬

目的研究丁酸钠(sodium butyrate,Na B)诱导结直肠癌细胞HCT-116自噬的分子机制。方法免疫印迹法和实时荧光定量PCR检测Na B诱导结直肠癌细胞自噬标志蛋白微管相关蛋白1A和1B(microtubule-associated protein1A/1B-light chain 3,LC3)的蛋白与m RNA表达水平,以及免疫印迹法检测钙调素依赖蛋白激酶的激酶β(Ca~(2+)/calmodulin-dependent protein kinase kinaseβ,Ca MKKβ)的磷酸化蛋白表达水平;免疫印迹法检测RNAi下调Ca MKKβ表达对Na B诱导结直肠癌细胞自噬的影响;免疫印迹法和荧光定量PCR检测细胞内钙离子螯合剂(BAPTA-AM)对Na B诱导结直肠癌细胞自噬的影响,以及免疫印迹检测其对p-Ca MKKβ蛋白表达水平的影响。结果Na B可上调LC3-II蛋白与m RNA表达水平,即诱导结直肠癌细胞自噬;Na B可诱导Ca MKKβ蛋白磷酸化;RNAi下调Ca MKKβ表达可显著抑制Na B诱导的LC3-II蛋白的表达,即抑制Na B诱导的结直肠癌细胞自噬;BAPTA-AM预处理可抑制Na B诱导的Ca MKKβ蛋白磷酸化以及下调LC3-II蛋白与m RNA表达水平。结论 Na B可通过Ca~(2+)-Ca MKKβ信号通路诱导结直肠细胞自噬。     

ABT-263诱导A431细胞凋亡及其对AKT下游信号通路影响

目的 观察抗凋亡蛋白抑制剂ABT-263对人皮肤鳞状细胞癌细胞系A431细胞功能的影响,并探讨相关分子机制。方法 (1)取对数生长期的人永生化表皮细胞(Ha Ca T细胞)与A431细胞提取总蛋白,采用蛋白印迹法检测B淋巴细胞瘤-2(BCL-2)和BCL-XL的蛋白表达水平。(2)分别以浓度为50μmol/L的ABT-263(抑制剂组)和二甲基亚砜(对照组)处理A431细胞,培养4和9 h后,采用透射扫描电子显微镜(TEM)检测各组细胞的形态变化。(3)以剂量为0、10、25、40和50μmol/L的ABT-263处理A431细胞24 h后,采用CCK-8法检测细胞活力。(4)以不同剂量的ABT-263处理A431细胞,采用蛋白印迹法检测活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase-3)、活化聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶-1(PARP-1)、磷酸化蛋白激酶B(p AKT)ser473、磷酸化糖原合成酶激酶-3β(p GSK3β)和磷酸化组蛋白H2AX(γH2AX)的蛋白相对表达水平。结果 A431细胞中的BCL-2和BCL-XL蛋白相对表达水平均高于Ha Ca T细胞(P0.01)。TEM检查结果显示,抑制剂组A431细胞从正常的形态逐渐变化为凋亡的形态,表现为微绒毛消失,核染色质密度增高并凝聚在核膜周边,核仁裂解。10、25、40和50μmol/L剂量组A431细胞的细胞活力均低于对照组(P0.05)。10、30和50μmol/L剂量组A431细胞的活化Caspase-3和活化PARP-1蛋白的相对表达水平均高于对照组(P0.05)。10、25、40、50μmol/L剂量组A431细胞的p AKT(ser473)和p GSK3β的蛋白相对表达水平均低于对照组(P0.05),γH2AX蛋白相对表达水平高于对照组(P0.05)。A431细胞活力和p GSK3β蛋白相对表达水平均随抑制剂剂量的增加而减少(P0.01),活化Caspase-3和γH2AX的蛋白相对表达水平均随抑制剂剂量的增加而增加(P0.01),均呈剂量-效应关系。结论 ABT-263可诱导A431细胞发生线粒体途径的凋亡,并可诱导AKT/GSK3β信号通路失活,从而促进A431细胞凋亡,呈一定程度的剂量-效应关系。     

不同体模刻度剂量计测量眼晶状体受照剂量差异性

目的探讨采用不同类型体模刻度不同类型剂量计时对眼晶状体受照剂量的影响,选择合适的剂量计刻度方案。方法将Hp(3)眼晶状体剂量计和Hp(10)全身体表剂量计分别放置于距正圆柱形水体模与ISO板状水体模15 cm处(模拟眼晶状体位置),采用镭-226放射源分别以一般公众、职业人群以及眼晶状体最大受照剂量标准(分别为1.0、5.0、20.0 m Sv)的剂量照射后,检测各剂量计的受照剂量。结果以1.0和5.0 m Sv照射时,Hp(3)眼晶状体剂量计测得的眼晶状体受照剂量高于Hp(10)全身体表剂量计(P0.05);眼晶状体受照剂量在刻度体模类型的主效应、剂量计类型与刻度体模类型的交互效应上差异均无统计学意义(P0.05)。以20.0 m Sv照射时,眼晶状体受照剂量在剂量计类型、刻度体模类型的主效应和两者的交互效应上差异均无统计学意义(P0.05)。结论 2种刻度体模均可用于眼晶状体剂量计的刻度,在剂量计类型的选择上应根据剂量等级或水平做出适宜的选择。     

一致性评价系数应用于无序多分类资料的效果评价

目的 基于AC1系数的构建思想,建立一致性评价系数（CEA）在两评价者无序多分类结局的评价方法,并可避免Kappa系数的缺陷。方法 通过随机抽样生成诊断试验类型数据,使用Monte Carlo模拟,在样本量、指定事件在总体的占比、偶然评价率、类别数等不同参数组合下进行重抽样,比较Kappa系数、AC1系数和CEA系数的均方误、方差和方差的期望。通过从总体中随机抽样1000次得到CEA系数的分布描述。结果 偶然评价率的不一致会导致CEA系数的均方误波动较大。与Kappa系数相比,AC1系数和CEA系数在指定事件的占比为极端值的情况更为稳定。在小样本、偶然评价率不一致的情况下,Kappa系数的方差和方差的期望变大,CEA系数变化较小。大样本条件下,CEA系数近似服从正态分布。结论 Kappa系数、AC1系数、CEA系数均受偶然评价率的影响最大,样本量次之。针对无序多分类结局,CEA系数在不同的样本量、偶然评价率下具有更稳健的性质。     

基于Adaptive Elastic Net与加速失效时间模型的亚组识别方法的应用拓展

目的 针对适应性设计下的Adaptive Elastic Net与加速失效时间模型亚组识别方法进行更多适用条件下的研究,以获得该方法最佳应用效果所对应的参数。方法 基于前期所提出的亚组识别方法,进一步探讨协变量间相关性、二阶段显著性水准([α1]和[α2])、协变量与样本量比例对该方法的影响。通过模拟研究,探讨含/不含协变量主效应的惩罚模型在不同情形下的亚组识别效果。结果 协变量间的相关性r=0、0.3、0.5时,检验效能（power）表现稳定;在二阶段自适应设计中,当[α1]和[α2]分别为0.035和0.015时,模型的power最高;固定样本量n的情况下,power随着待选协变量个数与n比例的上升而下降,比例升到1之后power呈现平稳趋势;对于不同生存时间的参数分布,单变量模型表现出不同的模式,而惩罚AFT模型相对稳定。结论 协变量间的相关性不影响检验power;（0.035,0.015）可作为自适应设计显著性水准的参考设置;获益亚组与非获益亚组间的治疗效果差异较小时,含协变量主效应的惩罚性AFT模型（Penalized,Eq_in）优于不含协变量主效应的单变量AFT模型（Univariate,Eq_ex）;当协变量数量与样本量的比值小于1时,“Univariate,Eq_ex”的power更高;否则,“Penalized,Eq_in”的效果会更好;生存数据的参数分布对单变量模型的影响较大,但对惩罚模型的影响较小。     

登革病毒IgG抗体的检测:基于登革病毒E蛋白的荧光素酶免疫吸附法

目的 建立基于登革病毒E蛋白特异性抗原的荧光素酶免疫吸附法（DENV-LISA）,用于检测DENV IgG抗体。方法 分别构建DENV1-E1、DENV2-E2与荧光素酶的融合表达质粒,转染293T细胞后获得含特异性抗原与荧光素酶的融合蛋白,建立DENV-LISA,评价其特异度和灵敏度,并与商用登革病毒IgG抗体检测试剂盒比较。结果 DENV-LISA阳性检出率32.4%,特异度96.6%,商用检测试剂盒阳性检出率35.3%,差异无统计学意义（P>0.05）;阳性样本稀释6400倍可判断阳性,灵敏度高;同批板间、板内检测值差异无统计学意义（P>0.05）;重复性良好。结论 建立基于登革病毒E蛋白的荧光素酶免疫吸附法,对登革病毒IgG抗体有较高特异度和灵敏度,可用于登革病毒感染的早期筛查、监测预警、流行病学调查等。