新型冠状病毒肺炎疫情下检验科管理

检验科在抗击新型冠状病毒肺炎疫情中发挥着重要作用,检验人员奋斗在抗击疫情的第一线,接触到大量可能携带病毒的血液和体液标本,成为感染的高危人群。加强疫情期间检验科的管理工作,及时对检验人员进行必要的心理干预是打赢抗疫攻坚战的关键。该文从实验室管理(生物安全原则、优化检验流程、医疗垃圾处理、实验室分区管理)和检验人员管理(提高重视程度、人员培训及考核、科学排班、加强心理干预)方面出发,对相关措施和方法进行了概述。     

EDTA-K3依赖性血小板假性减少症分析

EDTA盐是国际血液学标准化委员会(ICSH) 1993年建议用作血液分析的抗凝剂,但EDTA盐有时可导致血小板发生聚集从而导致血液分析仪做血小板计数时出现假性偏低的现象,即EDTA依赖性血小板假性减少症(EDTA dependentpseudothrombocytopenia ,EDTA dependentPTCP)。现报道该类患者2例。1　病例介绍及相关检验结果病例1:患者男,36岁,因上呼吸道感染就医。取EDTA K3 抗凝静脉血做血液常规分析,红细胞、白细胞及各参数均正常,但血小板计数结果偏低(2 0×10 9/L) ,询问患者并无出血倾向如鼻、牙龈出血、紫癜等。将抗凝静脉血涂片镜检,…     

实时荧光定量端粒重复扩增法检测大肠癌患者单个核细胞端粒酶基因表达

目的 研究大肠癌患者外周血单个核细胞(PBMC)端粒酶基因表达与临床病理的关系.方法 用实时荧光定量端粒重复扩增法(RTQ-TRAP)检测71例大肠癌和20例良性大肠疾病患者,以及25名健康人PBMC端粒酶基因表达,同时检测大肠癌患者血浆癌胚抗原(CEA)含量.结果 71例大肠癌患者中,50例端粒酶基因表达阳性,阳性率70.4%;20例良性大肠疾病表达阳性1例,阳性率为5.0%,大肠癌组与良性大肠疾病组和健康对照组的PBMC端粒酶基因表达差异有统计学意义(χ2=24.521,P<0.001).大肠癌患者在不同性别(χ2=0.114,P=0.736)、年龄(χ2=0.113,P=0.735)、肿瘤部位(χ2=1.523,P=0.677)、Dukes分期(χ2=2.282,P=0.320)间的端粒酶基因表达差异无统计学意义.71例大肠癌患者PBMC端粒酶基因表达阳性率与CEA阳性率(63.4%)比较,差异无统计学意义(χ2=2.286,P=0.125).结论 RTQ-TRAP是一种快速、准确、定量检测端粒酶基因表达的方法,大肠癌患者PBMC端粒酶活性是一项有效的辅助诊断大肠癌的分子标志.     

湖北汉族人IL-18基因编码区105位点多态性及其血清含量相关性研究

白细胞介素-18（interleukin-18，IL-18）是一种分布广泛的细胞因子，具有诱导γ-干扰素（IFNγ）等细胞因子的产生、增强自然杀伤（NK）细胞活性及促进T辅助（Th1）细胞的分化、增强Th1类反应等多种生物学活性，在介导炎症、调节机体的免疫功能方面具有重要作用。人IL-18基因位于11号染色体的长臂上（11q22．2-q22．3），由6个外显子和5个内含子组成。其中转录起始区位于第2外显子上，2个启动子分别位于第2外显子上游6．7kb的区域和5’端非编码区。目前发现IL-18基因启动子区和编码区存在突变位点，而且启动子-137和-607位点多态性与IL-18的转录和表达有关。我们的主要目的是调查健康汉族人IL-18基因编码区105A／C位点多态性的情况，同时测定血清IL-18含量，并进行健康汉族人IL-18基因编码区105A／C位点多态性与血清IL-18含量相关性分析。     

Amp C酶检测方法的探讨

目的 建立简便检测肠杆菌科细菌中Amp C酶的方法。方法 分别采用双纸片确证法和多剂量协同法检测35株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,并用三维试验和Amp C酶酶量直接测定法进行对比,同时检测这些菌产ESBL的情况。结果 双纸片确证法检测出12株Amp C酶,不受ESBL的干扰,与直接酶量检测法完全一致,敏感性高于三维试验,多刑量协同法敏感性较差。结论 双纸片确证法可作为临床检测Amp C酶的方法。     

血小板参数参考范围的建立与分析

目的:调查武汉地区正常体检人群的血小板平均体积(MPV)、血小板压积(PCT)、血小板分布宽度(PDW)、大血小板比率(P-LCR)4项参数的参考范围。方法:采用国际先进的SYSMEX XE-5000全自动血细胞分析仪,检测2 375例正常人的MPV、PDW、PCT以及P-LCR 4项参数,将所得数据进行统计学处理。结果:正常男性MPV(10.995±0.923)fl、P-LCR(33.090±7.592)%与女性MPV(10.990±0.948)fl、P-LCR(32.931±7.753)%差异无统计学意义(P0.05),PCT男性(0.251±0.047)%显著低于女性(0.270±0.046)%(P0.05),PDW男性(13.606±2.189)%显著高于女性(13.363±2.069)%(P0.05)。正常人群MPV、PDW、PLCR各年龄组间均差异无统计学意义(P0.05),而PCT则在不同年龄组间差异有统计学意义(P0.05)。结论:初步建立了武汉地区正常人群血小板相关参数的参考范围,对临床医生诊断和评估15~95岁年龄组患者血液以及其他相关疾病有很好的参考价值。     

血液分析仪避免有核红细胞影响血液分析

目的：评估使用血液分析仪检测外周血有核红细胞以避免影响白细胞计数及分类的可行性。方法：使用血液分析仪和显微镜对250例外周血标本进行有核红细胞检测,以镜检法结果为金标准来判断血液分析仪进行有核红细胞计数的可行性。结果：血液分析仪可有效检出外周血中的有核红细胞。结论：使用血液分析仪进行外周血有核红细胞检测可有效避免有核红细胞对血液分析时白细胞计数及分类的干扰。     

肝硬化、肝癌患者血清sFas和TGF-β1水平的探讨

目的　探讨血清可溶性Fas(sFas)和转化生长因子 β1(TGF β1)水平的变化与乙肝后相关性肝硬化、肝癌的关系。方法　对 2 0例肝炎、2 8例HBV相关性肝硬化及 2 0例肝癌患者血清sFas、TGF β1、血清透明质酸、Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原进行检测 ,同时对其中 4 3例慢性乙肝和肝硬化患者进行HBV DNA的定量检测。结果　HBV相关性肝硬化、肝癌患者血清sFas和TGF β1水平明显升高 ,与正常对照比较 ,差异有显著意义 (P <0 0 5 ) ;并且其结果与肝纤维化指标有一定的相关性 ;而慢性肝炎、肝硬化患者血清sFas和TGF β1水平与HBV DNA复制程度无显著关系。结论　乙肝后肝硬化、肝癌的发展进程可能与血清sFas及细胞因子TGF β1水平密切相关 ,而与血浆中HBV复制程度无显著关系。     

Eotaxin-3基因多态性与变应性哮喘相关研究

目的研究湖北地区汉族成人 2497T/G单核苷酸多态性与哮喘易感性、嗜酸性粒细胞计数以及血浆总IgE水平相关性。方法用聚合酶链反应-单链构象多态性-4引物聚合酶链反应的方法进行分析。结果eotaxin-3 2497位G等位基因的频率在哮喘组与对照组、哮喘组中TT、TG基因型的IgE浓度及EOS数量差异有显著性,P值分别为0.011,0.021和0.029。结论eotaxin-3 2497T/G多态性与哮喘易感性、EOS数量及IgE水平相关。     

A抗原表位模拟多肽融合表达载体的构建及鉴定

目的:构建血型A抗原模拟多肽融合表达载体,初步鉴定融合表达蛋白结合抗A抗体的能力.方法:PCR扩增血型A抗原模拟多肽(P17)和谷胱苷肽S-转移酶(GST)编码基因,并连接成P17-GST.双酶切后克隆入原核表达质粒pET 28 b,酶切、测序鉴定.以BL21(DE3)为表达菌,在IPTG诱导下表达P17-GST融合蛋白,Ni-NTA柱纯化蛋白.红细胞凝集抑制实验分析融合蛋白模拟血型A抗原的能力.结果:成功构建P17基因和GST基因融合的原核表达质粒pET28b-P17-GST,目的基因可以高效表达,纯化的融合蛋白以浓度依赖的方式抑制A型红细胞的凝集作用.结论:血型A抗原的模拟多肽序列与GST的融合表达蛋白可特异性结合抗A抗体,具有替代血型A多糖抗原潜能,为发展新型的抗A抗体滤除材料提供了依据.