大鼠髓核细胞体外衰老模型的建立

目的：评价生长因子受体结合蛋白2(growthfactorreceptorboundprotein2,Grb2)表达水平与结直肠癌进展及预后的关系。方法：对Grb2的蛋白表达及细胞定位进行免疫组化检测。用t检验、chisquare检验等分析Grb2的表达与年龄、性别、肿瘤部位、分化等级、淋巴结转移个数、TNM分期、辅助化疗、血清癌胚抗原（CEA）和血清CA199之间的关系。用KaplanMeier法分析Grb2的表达水平对患者生存率的影响;用Cox回归分析结直肠癌预后的影响因素。结果：Grb2主要表达于结直肠癌上皮细胞的胞质。结直肠癌组织中胞质Grb2的表达显著高于腺瘤和癌旁组织（P<0.05),而结肠癌组织、腺瘤、癌旁组织中胞核Grb2中的表达水平差异无统计学意义。癌上皮细胞胞质中Grb2高表达与年龄、性别、肿瘤部位、分化等级、TNM分期、辅助化疗、血清CEA、血清CA199之间均无相关性,Grb2表达与淋巴结转移个数有相关性（P=0.001）。Cox单因素分析发现,胞质Grb2高表达能预测患者的不良预后;进一步纳入TNM等指标,Cox多因素分析发现,Grb2是结直肠癌预后的独立影响因素［无瘤生存风险比（HR）=2.664,P=0.015;总体生存风险比（HR）=2.574,P=0.019］。结论：Grb2高表达与结直肠癌进展密切相关,是结直肠癌预后的独立危险因素。     

胃癌组织中G9a 表达的预后意义及其对胃癌细胞增殖和凋亡的影响

目的：探究组蛋白甲基转移酶G9a 在胃癌组织中的表达及其与预后的相关性,并观察G9a 抑制剂对胃癌细胞增殖和凋亡的影响。方法：通过Kaplan-Meier Plotter 和Oncomine 数据库分析G9a 在胃癌组织中的表达水平及其与预后的相关性。选用人胃癌细胞株SGC-7901 和MKN-45 为研究对象,Western blotting 方法检测细胞中G9a 蛋白表达水平,以G9a 抑制剂BIX01294处理胃癌细胞,观察细胞形态变化,CCK-8 法和集落形成实验检测胃癌细胞增殖能力和集落形成率的变化,流式细胞术检测细胞凋亡的变化。结果：G9a 在胃癌组织中高表达（P<0.01）,其高表达与预后不良呈正相关（P<0.01）。BIX01294 能使胃癌细胞体积缩小、细胞间连接消失,甚至细胞皱缩、变圆、脱落等。BIX01294 能显著抑制胃癌细胞集落形成和胃癌细胞的增殖（均P<0.05）,同时促进胃癌细胞凋亡（P<0.05）。结论: G9a 在胃癌组织中高表达,其高水平表达与预后不良呈正相关;抑制G9a 的表达可显著抑制胃癌细胞的增殖和促进细胞凋亡。     

大鼠髓核细胞体外衰老模型的建立

目的:建立大鼠椎间盘髓核细胞体外衰老模型。方法:提取大鼠椎间盘髓核细胞,在完全培养基中培养,作为对照组;在对照组基础上加入终浓度为100μmol/L三丁基过氧化氢(t-BHP)培养2 h,构建髓核细胞体外衰老模型(衰老模型组)。采用Western印迹法检测两组髓核细胞的衰老相关指标微囊蛋白-1(caveolin-1)、β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)的表达量,同时采用CCK-8细胞增殖实验检测两组的细胞活性。结果:与对照组比较,t-BHP作用2 h后,衰老模型组caveolin-1、SA-β-gal表达量明显升高,且髓核细胞增殖速率减慢,细胞活性明显降低。结论:采用t-BHP诱导的方法能成功构建髓核细胞体外衰老模型,caveolin-1在此过程中诱发了髓核细胞的衰老。     

肠内菌群对七叶皂苷体外代谢转化产物的研究

目的 通过离体实验观察人肠道内细菌对七叶皂苷的代谢。方法 离体培养人肠道内细菌，与七叶皂苷厌氧温孵，采用硅胶柱色谱和制备型高效液相色谱等方法对七叶皂苷的肠菌代谢产物进行分离和代谢转化产物的鉴定。结果 代谢产物经IR、MS和NMR鉴定为：21β-巴豆酰基原七叶皂苷元(I)，21β-当归酰基原七叶皂苷元(Ⅱ)，21β-巴豆酰基-22α-乙酰基原七叶皂苷元(Ⅲ)，21β-当归酰基-22α-乙酰基原七叶皂苷元(Ⅳ)。其中Ⅲ和Ⅳ为首次发现的新天然产物。结论 在离体条件下，七叶皂苷可被人肠内菌代谢为21β-巴豆酰基原七叶皂苷元(I)、21β-当归酰基原七叶皂苷元(Ⅱ)，21β-巴豆酰-22α-乙酰基原七叶皂苷元(Ⅲ)、21β-当归酰基-22α-乙酰基原七叶皂苷元(Ⅳ)。     

也谈“人群"是流行病学认识疾病现象的视角

流行病学研究疾病在人群中的分布,不仅是分析疾病及其影响冈素在个体间的变异从而在个体特征上发现病因的方法,也是分析以人群为基本测量单位的群体特征、认识造成人群之间疾病发生和存在状态差异及其影响因素的方法：流行病学不仅是研究疾病和健康现象的方法,且更应恪守降低发病率、患病率和病死率等公共卫生目标,探索在人群层面防制疾病、促进健康的策略和措施。要改善人群健康,不仅需要多学科的方法和视角,还应采用系统科学的思维,才能对影响健康因素的多层次结构关系和作用过程及其背景等有整体认识。