CARP相互作用蛋白HTRM的表达谱分析及亚细胞定位

目的观察CARP相互作用蛋白HTRM的组织表达谱和亚细胞定位及其对血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的作用。方法我们利用CLONTECH公司的成人多组织膜，通过Northern杂交的方法，检测HTRM在心脏、脑、胎盘、肺、肝、骨骼肌、肾脏以及胰腺中的表达情况。将HTRM带上GFP标签转染HEK293S细胞，观察其亚细胞定位情况。再将HTRM及对照载体转染VSMC细胞，通过细胞计数以及MTr两种方法检测细胞的增殖情况。结果NorthernBlot实验显示HTRM有两个转录本，2．4kb的转录本主要在心脏和骨骼肌中表达，1．35kb的转录本主要在胎盘中表达；亚细胞定位显示HTRM是一个胞浆蛋白；高表达HTRM可以轻微的促进VSMC细胞增殖。     

风湿性心脏病心房颤动心房肌缝隙连接蛋白40和43 mRNA表达水平的变化

目的测定风湿性心脏瓣膜病(风心病)心房颤动(Af)心房肌缝隙连接蛋白(Connexin)40(Cx40)和Connexin43(Cx43)mRNA表达水平的变化。方法11例风心病患者[Af8例,窦性心律3例;男4例,女7例;平均年龄(50.8±13.7)岁;平均Af时间(5.6±6.5)年]的右心耳心肌1小块,提取所有标本的总RNA,等量转移至尼龙膜上,用PCR合成的特异cDNA探针,标记上放射性同位素(α32PdCTP)后与尼龙膜杂交,然后将杂交膜与X光胶片行放射自显影,在灰度扫描仪下得到每例标本mRNA水平的灰度值,为了进一步矫正转膜时可能的定量不统一,将同1块杂交膜先后与Cx40探针、Cx43探针和内参照βactin杂交,以Cx40/βactin和Cx43/βactin的百分比作为统计变量进行分析。结果在Af与窦性心律标本中,Cx40和Cx43的mRNA表达量未发生明显改变(P>0.05)。结论在风心病Af患者中,未发现缝隙连接蛋白Cx40和Cx43的mRNA表达量明显改变。     

FWA116基因在心衰动物模型心脏血管内皮的表达

建立亚急性和慢性心衰SD大鼠模型，用RNA-RNA原位杂交方法观察新基因FWA116在心脏组织的表达。以重组质粒FWA116／PGEM-T线性cDNA为模板，在T7或SP6RNA聚合酶作用下，体外合成地高辛（DIG）半抗原标记的FWA116cRNA探针。结果表明：与对照组相比，该基因在两种心衰大鼠心脏的中、小动脉内皮组织的mRNA表达均明显增高；与Northern blot及免疫组化的结果相一致，这提示DIG标记cRNA原位杂交方法的敏感和可靠。同时，FWA116基因在心衰缺血缺氧心脏动脉内皮中的转录和翻译水平的高表达，说明该基因可能在心衰的病理过程中起到重要的作用。     

血管生成素相关蛋白基因多态性与冠心病的关系

目的:研究中国人群血管生成素相关蛋白(ANGPTL3)基因单核苷酸多态性与冠心病的关系。方法:采用聚合酶链反应和限制性酶切的片段长度多态分析方法检测冠心病患者389例,健康人503例的AN-GPTL3基因 90782C/G多态性并统计各组的多态性频率。结果:冠心病亚组与对照组、冠心病心肌梗死组与对照组之间的基因型频率分布差异有统计学意义,C等位基因频率在冠心病组、冠心病心肌梗死亚组和对照组分别为49.6%、51.5%和41.6%(P<0.05)。结论:ANGPTL3基因rs1168013位点C/G多态性与中国人冠心病心肌梗死发病相关,ANGPTL3可能是冠心病发病的易感基因。     

OX40配体蛋白基因多态性与冠心病的相关性研究

目的研究中国人群OX40配体蛋白基因（TNFSF4）单核苷酸多态性与冠心病的关系。方法从北京同仁医院和北京朝阳医院选取冠心病患者369例和匹配的对照组360例。并记录所有研究对象的病史、体格检查等临床资料及其它流行病学资料，采取聚合酶链式反应和限制性酶切片断长度多态性分析方法（PCR—RFLP）检测各组TNFSF4基因rs3850641位点A／G的基因型并统计各组的基因型频率。结果冠心病组rs3850641G等位基因型频率显著高于对照组（P〈0．05）。并在校正了年龄、性别、高血压病史、糖尿病史、甘油三脂和胆固醇等传统危险因素的影响后，这种相关性依然存在（P=0．039）。结论TNFSF4基因rs3850641位点A／G多态性中G等位基因可能是中国人冠心病发病的独立危险因素之～。     

血管紧张素原基因多态性与肥厚型心肌病的相关性分析

目的 探讨血管紧张素原(AGT)基因的单核苷酸多态性(SNP)位点A943580G与肥厚型心肌病(HCM)的相关性.方法 用PCR-RFLP方法对225个HCM病人和243个正常人的AGT的SNP位点A943580G进行基因分型(此位点与黑色人种中的高血压病人的最大早期充盈速度有关).结果 携带AA和AG基因型的HCM病人的左心室流出道梗阻率明显高于GG基因型的梗阻率(30.1%比17.0%,P＜0.05).通过对发病年龄,性别,室间隔厚度,HCM家族史以及家族猝死史进行调整后,携带A等位基因(AA AG)的HCM病人左心室流出道梗阻率要高于GG基因型病人(OR=2.4,95%CI 1.2 to 4.8).结论 AGT的A等位基因可能是HCM病人发生左心室流出道梗阻的危险因子.     

CX3CR1基因多态性与冠心病关联的荟萃分析

目的 探讨CX3CR1-V249I、T280M与冠心病(CAD)的关联性.方法 检索中英文数据库,以得到CX3CR1-V249I、T280M与CAD易感性关系的病例对照研究,采用Meta分析方法 合并V249I、T280M与CAD关联的OR值,同时进行文献发表偏倚检验.结果 共纳入文献6篇.对于V249I,共纳入病例1 551人,对照1 804人,I型相对于V型合并OR=0.85(95%CI=0.67～1.08,P＞0.05);对于T280M,共纳入病例1 555人,对照1 801人,M型相对于T型合并OR=0.82(95%CI=0.70～0.96,P＜0.05).结论 T280M为CAD的保护性因素,V249I与CAD的发生无关联.

Abstract：

Objective To find whether CX3CR1 V249I and T280M are associated with CAD. Methods Database in English and Chinese, including PUBMED, EMbase, were searched to get the case-control studies on the associa-tion between V249I, T280M and CAD. Results Six studies were reviewed. The pooled OR of V249I compared to wild type allele was OR =0. 85(95% CI =0. 67 ～ 1. 08,P >0. 05). The pooled OR of T280M compared to wild type allele was OR =0. 82(95% CI =0. 70 ～ 0. 96, P < 0. 05). Conclusion The T280M is a protective factor of CAD, while the V249I is not associated with CAD.     

外周血基因表达分析内参基因的优选

目的明确外周血RNA定量分析最佳内参基因组合。方法采用实时荧光定量PCR方法检测5种管家基因的表达情况,应用qBASE+软件对基因表达稳定性进行分析并筛选最佳内参基因组合。结果采用冠心病病例对照人群共98例,常用内参基因ACTB的表达水平变化最大。内参基因的表达稳定度由高到低依次为DECR1GAPDHTRAP1PPIBACTB,并分析出最佳内参基因组合为DECR1、GAPDH和TRAP1。结论研究结果为冠心病外周血的内参基因的选择提供了可靠的依据,可为该类样品的基因表达定量分析在基础研究和临床诊断的应用提供技术支撑。     

脂滴包被蛋白PLIN基因多态性与代谢综合征易感性的关联性研究

目的研究脂滴包被蛋白PUN基因多态性与代谢综合征的关系。方法从河南省信阳市选取代谢综合征及对照共2068例，病例组1021例，对照组1047例。所有研究对象记录其病史、体检等临床资料及吸烟、饮酒等流行病学资料，采用聚合酶链式反应．限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）技术检测各组PLIN基因rs8179078和rs6496589两个SNPs位点的多态基因型并统计各组的多态性频率。结果rs6496589在女性中CC基因型的频率病例组明显高于对照组（P〈0．01）。与对照组比较，代谢综合征组rs6496589cc基因型的频率显著高于对照组（代谢综合征组：rs6496589CC为56．6％；对照组rs6496589CC为48．8％；P=0．002）。校正了年龄、性别、高血压史、糖尿病史和高脂血症史等传统危险因素的影响后，这种相关性仍然存在。rs8179078的等位基因和基因型频率在病例组和对照组的分布无显著的统计学差异。结论PUN基因rs6496589多态性中CC基因型是中国汉族人群代谢综合征发病的独立危险因素之一，rs8179078多态性与中国汉族人群的代谢综合征发病无显著相关性。     

家族性混合型高脂血症与脂蛋白脂酶基因的连锁分析

目的 探讨脂蛋白脂酶基因与家族性混合型高脂血症是否连锁，以期发现家族性混合型高脂血症遗传易感位点。方法 从北京地区搜集12个（81人）家族性混合型高脂血症家系选择脂蛋白脂酶基因及其附近的微卫星遗传标记（LPLGZ14／15与D8S282）进行连锁分析。结果 CENEHUNTER软件包多点连锁分析显示微卫星遗传标记最大LOD score(HLOD)值如下：HLODLPLGZ14／15＝－8．9及HLODD8S282＝－10．5。结论 中国北京地区家族性混合型高脂血症家系提示，脂蛋白脂酶基因不是影响家族性混合型高脂血症表型的遗传易感基因。