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背景:利用原始生殖细胞技术可以方便地将各种外源基因转入鸡体内,以较快的速度获得转基因鸡,但到目前为止原始生殖细胞的转染效率仍然很低,且很难进行较大基因片段的转染。
目的:拟实现大分子BAC载体对鸡胚原始生殖细胞的转染。
设计、时间及地点:基因水平的细胞学体外观察,于2006-08/2008-07在广东省佛山大学完成。
材料:种蛋来自华南农业大学鸡场粤黄鸡群,受精蛋在37.5 ℃、相对湿度为65%的条件下孵化68~72 h。BAC-TDN-GID载体由佛山大学分子生物学实验室保存。
方法:以rRNA基因及其间隔序列作为同源重组引导序列,构建含GFP基因和hIFN基因的大分子BAC基因打靶载体,将鉴定为阳性的载体进行扩增培养并大量抽提。取课题组孵化至第19期的粤黄鸡胚,挑取其生殖嵴或性腺,胰酶消化法获得原始生殖细胞,并辅以饲养层和生长因子进行培养。采用脂质体介导法在原始生殖细胞内进行基因转移,对存活的细胞进行目的基因DNA水平和RNA水平鉴定。
结果:第19期鸡胚性腺原始生殖细胞体外培养48 h呈桑椹状或者椭圆状,72 h形成细胞集落,过碘酸染色呈紫红色。分子量达30 kb的大分子转基因载体BAC-TDN-GID转染鸡胚原始生殖细胞48 h可见荧光细胞,表明转染成功。经PCR和RT-PCR鉴定,证实扩增的产物大小与预期结果大致相吻合,目的基因hIFN已经整合进入原始生殖细胞基因组,并已开始表达。
结论:实验成功将大分子BAC载体上的外源基因转染入体外分离培养的鸡胚原始生殖细胞。 相似文献
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目的:探索孕期体力活动对分娩方式的影响。方法:在孕中期招募孕妇,跟踪随访至分娩。在分娩前把研究人群按孕中期、孕晚期的记步器读数分成不同体力活动活跃程度的4组,分析体力活动不同组分娩方式即阴道分娩与剖宫产率的差异。结果:在866名孕妇中,剖宫产596名,剖宫产率为68.8%,选择性剖宫产率为51.4%。就孕中、晚期平均的体力活动量而言,低活跃组、较活跃组和活跃组发生剖宫产的风险分别是静坐组的0.60、0.30、0.23倍,发生选择性剖宫产的风险分别是静坐组的0.57、0.32、0.20倍。结论:该研究提示孕期体力活动活跃者剖宫产或选择性剖宫产率降低。 相似文献
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做女人“挺”好,于是不少女人选择了用美乳霜。不过美乳霜也不都像广告宣传的那么完美。几乎所有的美乳霜都说不含激素。但据一位不愿意透露姓名的国内整形外科界权威人士讲:美乳霜如果不含有激素是不会起作用的。据这位大夫多年的临床观察,有的病人用过美乳霜之后乳房色素沉着,乳晕、乳头发黑, 像怀孕妇女的乳房颜色。如果不是激素的作用是不会有这种效果的。在美乳霜的说明书中,通常都有这样的内容:个别女性如果出现经期紊乱和类似妊 相似文献
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目的了解上海市长宁区孕妇产前分娩恐惧的现状及其与计划分娩方式的关联。方法通过横断面研究的方法, 对2020年9月至2021年3月在上海市长宁区妇幼保健院产科门诊招募的1 560例孕晚期孕妇进行问卷调查。采用分娩恐惧量表——中文版分娩预期问卷A版评估孕妇产前分娩恐惧现状, 根据得分是否≥85分将孕妇分为非临床型分娩恐惧组[<85分, 包括轻度(≤37分)、中度(38~65分)、高度(66~84分)]与临床型分娩恐惧组(≥85分), 采用秩和检验、χ2检验或t检验进行单因素分析, 采用二元多因素非条件logistic回归模型对产前分娩恐惧相关因素及分娩恐惧与计划分娩方式的关联进行多因素分析。结果轻、中、高度和临床型分娩恐惧的检出率分别为18.8%(294/1 560)、44.9%(700/1 560)、31.1%(485/1 560)和5.2%(81/1 560)。二元多因素非条件logistic回归分析结果显示, 亲友偏向于剖宫产(OR=3.45, 95%CI:1.29~9.22)、产前焦虑(OR=4.73, 95%CI:2.49~8.97)的孕妇发生临床型分娩恐惧的比例更高, 计... 相似文献
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目的描述孕前女性牙周病与口腔唾液菌群的关联,探索患有牙周病的孕前妇女口腔唾液特征菌群。方法基于复旦大学公共卫生学院孕前队列,选取2016-2019年在上海市嘉定区妇幼保健院孕前体检夫妇中患有牙周病并计划备孕的妇女58例,以及60例牙周健康者作为研究对象,采用16S r DNA测序技术对118份唾液样本进行检测,比较两组口腔唾液菌群的特征和差异菌群。结果两组口腔唾液菌群在群落结构方面差异有统计学意义(F=2.739,P<0.05);与牙周健康者相比,患有牙周病的孕前妇女口腔微生物的丰富度显著更高[646.40(544.57,932.47)vs.777.26(649.64,1018.83),Z=2.740,P<0.05],提示牙周病患者口腔内富集更多微生物。差异菌群分析结果显示,患有牙周病的孕前女性口腔唾液中显著富集了牙周致病菌属如卟啉单胞菌属(Por Phyromonas)、Filifactor菌属和Parvimonas菌属,除此之外,还包括消化链球菌属(Pe Ptostre Ptococcus)、普雷沃菌_7属(Prevotella_7)等;而在健康人群中显著富集伯杰氏菌属(Bergeyella)、弯曲杆菌属(Cam Pylobacter)等(LDA得分>2.000,P<0.05)。结论育龄女性在备孕前应当重视牙周健康,保持良好的口腔环境,建议为备孕女性提供口腔检查,为牙周病患者提供及时的治疗与保健咨询服务。 相似文献
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