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1.
目的 分析并确定幽门螺杆菌黏附素A(HpaA)分子中有效T细胞和B细胞联合(T/B)抗原表位.方法 重组表达HpaA(rHpaA)并免疫家兔制备抗血清.采用生物信息学技术预测和分析HpaA分子中T细胞和B细胞表位,PCB扩增T/B联合表位肽片段并构建其噬菌体展示系统.采用PEG/NaCl沉淀法提纯展示了T/B联合表位的重组噬菌体PⅢ蛋白(rPⅢ).分别以商品化幽门螺杆菌全菌IgG抗体和rHpaA抗血清为一抗,采用Western blot和ELISA对rPⅢ蛋白中展示的T/B联合表位进行筛选和鉴定.采用MTT检测rHpaA免疫小鼠脾细胞在不同重组噬菌体蛋白刺激下的增殖情况.结果 HpaA分子中共有5个T/B联合表位:HpaA10、HpaA37、HpaA79、HpaA116和HpaA143.所有T/B联合表位均成功地展示于M13噬菌体PⅢ蛋白表面.Western blot、ELISA和淋巴细胞增殖试验结果 均显示,HpaA116是优势抗原表位,HpaA37和HpaA79为有效抗原表位,HpaA10和HpaA143为无效抗原表位.结论 本研究成功地构建了幽门螺杆菌HpaA的T/B联合表位肽噬菌体展示系统.HpaA37和HpaA79,尤其是HpaA116是HpaA有效T/B联合抗原表位.  相似文献   
2.
目的:检测肿瘤坏死因子受体(sTNF-R1和sTNF-R2)在男性慢性盆腔疼痛综合征(CPPS)患者前列腺液中的表达水平,探讨sTNF-R1和sTNF-R2在CPPS炎症过程中的可能作用机制。方法:cPPS患者均来自2008年3月-2009年1月,其中ⅢA级24例、ⅢB级20例,并与15例健康人作对照。直肠按摩取出前列腺液,EusA法检测前列腺液sTNF-R1和sTNF-R2的蛋白浓度。结果:CPPSⅢA组前列腺液sTNF-R1和sTNF.1t2的蛋白浓度显著高于ⅢB组[(46±6粥41±6),P〈0.05;(13.0±4.8US7.9±4.1)ng/mL,P〈0.01]且ⅢB组前列腺液srINF-R1和sTNF.R2的蛋白浓度显著高于对照组[分别为(25±8)、(2.5±1.9)ng/mL,均P〈0.01]。结论:男性CPPS患者前列腺液中sTNF-R1和sTNF-R2的蛋白浓度增加,两者可能共同参与了CPPS的炎症过程。  相似文献   
3.
 目的:构建葡萄球菌肠毒素A(SEA)基因原核表达系统,了解重组表达产物rSEA促淋巴细胞增殖和抑制肿瘤生长的作用。方法:采用高保真PCR从金黄色葡萄球菌ATCC13565株DNA中扩增全长SEA基因片段,T-A克隆后测序,构建SEA基因原核表达系统pET32a-SEA-E.coliBL21DE3。采用SDS-PAGE检测rSEA表达量,Ni-NTA亲和层析法提纯rSEA。采用TCID50法测定rSEA对Vero细胞的细胞毒性并计算TCIC50值。采用MTT比色法分别检测不同浓度rSEA体外对小鼠脾细胞、人外周血单个核细胞(PBMC)的促增殖作用以及对HepG2细胞(人肝癌细胞)、HeLa细胞(人宫颈癌上皮细胞)的生长抑制作用。结果: 与公布的相关序列比较,所克隆的SEA基因核苷酸序列相似性为100%。rSEA表达量约为细菌总蛋白的25%。rSEA对Vero细胞的TCIC50为3.14 μg。1.0-20.0 mg/L的rSEA对小鼠脾细胞和人PBMC均有明显的促增殖作用(P<0.05)。5.0-20.0 mg/L rSEA作用的人PBMC上清均能有效地抑制HepG2细胞和HeLa细胞生长(P<0.05)。结论:成功地构建了rSEA原核表达系统。rSEA仍然具有生物学活性。所建立的细胞毒性、促淋巴细胞增殖和抑制肿瘤细胞生长作用的检测方法,为以后减毒rSEA突变体的筛选奠定了基础。  相似文献   
4.
目的构建问号钩端螺旋体(简称钩体)lipL32/1-lipL41/2融合基因及其原核表达系统并鉴定其表达产物的免疫性。方法采用连接引物PCR构建lipL32/1-lipL41/2融合基因,常规方法构建其原核表达系统。采用SDS-PAGE和BioRad凝胶图象分析系统检测目的重组蛋白lipL32/1-lipL41/2表达情况。采用Westernblot鉴定lipL32/1-lipL41/2的免疫反应性。采用ELISA检测228例钩体病人血清中lipL32/1、lipL41/2基因和lipL32/1-lipL41/2融合基因表达产物的抗体。结果lipL32/1-lipL41/2融合基因核苷酸和氨基酸序列与报道的相关序列相似性分别为99.9%和99.8%。lipL32/1-lipL41/2表达量约为细菌总蛋白的1D%。rLipL32/1和rLipL41/2兔抗血清均能识别并与lipL32/1-lipL41/2结合。97.4%、78.5%和99.1%病人血清lipL32/1-lipL41/2和lipL32/1-lipL41/2抗体阳性。结论本研究成功地构建了问号钩体lipL32/1-lipL41/2融合基因及其原核表达系统,lipL32/1-lipL41/2不仅同时具有两个单一重组抗原的免疫反应性,且能提高钩体病人血清中抗体检测阳性率,可作为研制钩体属特异性基因工程疫苗或检测试剂盒的候选抗原。  相似文献   
5.
隐孢子虫病的若干进展   总被引:4,自引:0,他引:4  
近年来发现引起免疫缺陷性疾病 ,特别是艾滋病患者机会性感染的病原体约有十几种 ,其中原虫主要有隐孢子虫 ,卡氏肺孢子虫 ,弓形体 ,孢子球虫等 ,而在胃肠型的艾滋病机会性感染中 ,以隐孢子虫(cryptosporidium)为最常见。有人统计 5 7例艾滋病患者感染者中有 4 2例死于本病 ,故国外对艾滋患者检查隐孢子虫已列为常规项目[1] 。因其常以并发感染且易造成临床误诊增加了死亡率 ,本文对隐孢子虫的病原生物学特性及临床流行等研究的若干进展予以介绍。1 病原生物学特性隐孢子虫最初于 190 7年被Tyzer发现并描述。对人类致病的报道始见于 1976…  相似文献   
6.
家用微波辐射ELISA诊断日本血吸虫病   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的 探索简便、经济和敏感性及特异性高的快速免疫学诊断方法。方法用家用微波ELISA和医用微波ELISA同步检测各期日本血吸虫病患者血清 94份。结果 两种方法的血清抗体阳性检出率分别为 76 .6% (72 /94 )和 74 .5 % (70 /94 ) ,无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 家用微波ELISA具有医用微波ELISA相当的敏感性和特异性 ,但前者具有微波炉价格低廉 ,易于推广的优点。  相似文献   
7.
问号钩端螺旋体(简称钩体)感染引起的钩体病是全球流行最广的人兽共患病.由于问号钩体无外毒素,所含有的内毒素样物质也不能合理地解释其致病性,故问号钩体致病机制至今未明.近年国外学者分别报道了问号钩体内鞭毛、一些糖脂或糖肽类物质、溶血素、部分外膜蛋白分别与体外生存、侵袭力、粘附宿主细胞、细胞膜损伤、诱导炎症因子和细胞凋亡等有关,从而与问号钩体致病密切相关.研究资料还提示,问号钩体致病机制可能与传统的细菌主要以内、外毒素致病有明显差异.  相似文献   
8.
荔枝核总皂甙提取物对糖尿病小鼠的降糖疗效观察   总被引:4,自引:0,他引:4  
目的 观察荔枝核总皂甙提取物对糖尿病小鼠降血糖作用。方法 采用四氧嘧啶建立糖尿病小鼠模型。从荔枝核中提取总皂甙混合物。以荔枝核总皂甙提取物为试验药、优降糖和黄连素为对照药,糖尿病小鼠经灌胃连续给药3周后测定小鼠空腹血糖值,比较不同药物降血糖效果。结果 荔枝核总皂甙提取物、优降糖和黄连素均能有效地降低糖尿病小鼠的血糖浓度(均P〈0.05),其降糖率分别为59.57%、43.64%和43.93%。荔枝核总皂甙提取物用药组糖尿病小鼠的血糖浓度明显低于糖尿病对照小鼠(P〈0.01)。荔枝核总皂甙提取物降血糖效果明显优于优降糖和黄连素(P〈0.01)。结论 荔枝核总皂甙提取物具有较强的降低糖尿病小鼠血糖功能,且其降血糖效果优于优降糖与黄连素。  相似文献   
9.
蔷薇科植物果核油性提取物的体内外抗幽门螺杆菌作用   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的观察蔷薇科植物果核油性提取物初提液和提纯液体内外抗幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)的作用。方法从胃炎和消化性溃疡患者胃黏膜活检标本中分离Hp临床菌株。分别采用二倍平皿稀释法和试管法测定油性提取物初提液和提纯液对96株Hp的M IC和MBC。建立Hp小鼠感染模型,检测油性提取物初提液和提纯液体内抗Hp的效果。结果从患者胃黏膜活检标本中分离获得96株Hp。油性提取物初提液和提纯液对上述Hp菌株的M IC90分别为体积分数0.16%和0.32%。体积分数为0.16%油性提取物初提液作用5 m in及体积分数为0.16%的提纯液作用15 m in即可杀灭HpNCTC11637株、临床菌株75b和81 a株。所有感染小鼠胃窦部组织Hp SS1株分离培养结果均阳性,体积分数为0.5%的油性提取物初提液和提纯液灌小鼠Hp分离培养结果均阴性。结论较低浓度的蔷薇科植物果核油性提取物初提液和提纯液即有体内抗Hp的作用,具有进一步开发抗Hp口服液的价值。  相似文献   
10.
探索敏感性高、特异性及重现性好的快速血吸虫病免疫血清学诊断方法是血吸虫病研究领域急需解决的课题[1].  相似文献   
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