体外培养法与RNA等温扩增法对脲原体检测能力比较

目的比较体外培养法与RNA等温扩增法对脲原体的检测能力。方法 2016年1-8月共收集了103份就诊于北京协和医院门诊患者的首次尿标本。标本平均分成3份,分别用于脲原体的检测。第1份采用RNA等温扩增法,第2份采用体外培养法,第3份采用体外培养联合测序法。其中,体外培养联合测序法将作为参考方法,横向评估体外培养法和RNA恒温扩增法对脲原体的检测能力。结果基于体外培养联合测序法,共有24例标本(23.30%)检测出了脲原体。其中,14例(17.50%)来自于男性,10例(43.47%)来自于女性,差异有统计学意义(P=0.022);40～50岁脲原体检出率最高(5/12,41.67%)。与参考方法相比,体外培养法的灵敏度和特异度分别为75.00%(18/24)和100.00%(79/79);RNA等温扩增法的灵敏度和特异度分别为95.83%(23/24)和96.20%(76/79),差异无统计学意义(P0.05)。在24份检测出脲原体阳性标本中,17例(70.83%)为微小脲原体,7例(29.17%)为解脲脲原体,未检查到微小脲原体和解脲脲原体共同存在的情况。18例培养阳性标本进行了体外药敏测定,其中环丙沙星和氧氟沙星的体外敏感性最差。结论与培养联合测序法相比,体外培养法和RNA等温扩增法均表现出了较好的灵敏度和特异度,但从临床应用角度来讲,二者联合使用可能会对脲原体感染的诊断和治疗提供更全面的指导。     

荧光定量PCR与微粒子酶免分析法同步检测HCV对比分析

目的　对荧光定量PCR与微粒子酶免分析法 (MEIA法 )同步检测HCV进行比较。方法　收集北京协和医院 2 0 0 3- 0 1～ 12门诊及住院 5 0例ALT正常 ,无恶心、呕吐、乏力、黄疸临床表现 ,行胃镜和肠镜检查的门诊病人。检查前用MEIA法检测HCV 3抗体弱阳性 (1～ 2 0S/CO) ,对其进行荧光定量PCR检测HCV RNA ;5 0例用荧光定量PCR检测HCV RNA阳性血清 (HCV RNA≥ 5 0× 10 5copies/L) ,再进行HCV 3抗体检测。 结果　MEIA法检测HCV 3抗体阳性在 1～ 2 0S/CO且ALT正常病人 ,用荧光定量PCR检测HCV RNA含量 ,3例(6 % )高于最低检测限 (5 0× 10 5copies/L)。对 5 0例用荧光定量PCR检测HCV RNA阳性血清 (HCV RNA≥ 5 0× 10 5copies/L) ,且ALT正常病人 ,进行HCV抗体检测 ,2例 (4 % )丙肝抗体阴性 ,余丙肝抗体数值在 80～ 15 0S/CO。结论　MEIA法在AXSYM机器上检测HCV 3抗体弱阳性时 ,不能轻易得出丙肝的诊断 ,应检测HCV RNA并结合临床表现。定量PCR不适宜检测含量较低的HCV RNA ,MEIA法在AXSYM机器上检测HCV抗体作为献血员筛查不失为一种好方法。     

一种寨卡病毒富集检测方法的性能评价

  目的  对一种无需核酸提取纯化的寨卡病毒实时荧光定量反转录PCR检测方法的性能进行评价。  方法  该检测方法基于实时荧光定量反转录PCR技术, 样本处理采用病毒富集法: 取100~200 μL待测样本, 加入112~224 μL样本处理液Ⅰ, 5~10 μL样本处理液Ⅱ, 混匀后进行离心富集(12 000 r/min, 离心半径8.6 cm, 离心5 min)。离心后弃上清液, 加入20 μL复溶缓冲液重悬沉淀; 取10 μL重悬液, 加入50 μL PCR反应液上机检测。从定量检测下限、交叉反应、抗干扰性、精密度方面评价该检测方法的性能。收集北京协和医院检验科临床样本(血清、尿液、唾液样本), 随机选取约1/5构建寨卡病毒感染模拟临床样本, 进一步评定该检测方法的性能。  结果  该检测方法对MR766、ZKC2/2016毒株的检测下限均为10¹半数组织培养感染剂量(50% tissue culture infective dose, TCID50)/mL; 对17种常见虫媒病原体检测结果均为阴性, 无交叉反应发生; 潜在干扰物质胆红素(15 mg/L)、血红蛋白(100 mg/L)、甘油三酯(2000 mg/L)、IgG(37.5 g/L)和EDTA-Na₂(2.5 g/L)对其检测结果无干扰; 检测低、中、高浓度寨卡病毒的批次内和批次间Ct值变异系数均＜10%, 精密度良好。共收集344份北京协和医院检验科临床样本, 其中构建寨卡病毒感染模拟临床样本73份。采用该检测方法对344份样本进行检测, 结果均与实际相符, 无假阳性和假阴性。  结论  寨卡病毒简单富集后再检测的方法特异性高、重复性好, 检测结果不受干扰物质的影响, 检测下限满足临床需求, 且操作简便, 但应用效果仍需在真实临床样本中进一步验证。     

乙型肝炎病毒DNA定量值与HBeAg、抗-HBe的相关性分析

目的探讨乙型肝炎(乙肝)病毒DNA的拷贝数(HBV DNA)与HBeAg、抗-HBe的相关性。方法对883例乙肝患者采用美国雅培公司AXSYM全自动酶免疫分析仪及配套试剂,进行微粒子酶免分析(MEIA)法检测HBeAg、抗-HBe和Roche COBAS AMPLICOR定量PCR仪及COBAS AMPLICOR HBV MONITORTM试剂盒内标法检测患者的HBV DNA,并进行相关性分析。结果(1)HBV DNA与HBeAg呈线性正相关(r=0．505,P<0．01 Mean:HBV DNA:7．12×1012拷贝／ml; HBehg:218．31 S／CO)。DNA含量104拷贝／ml对应HBeAg:104 S／CO;DNA含量在105-108拷贝／ml,HBeAg:112 S／CO;DNA含量109-1015拷贝／ml,HBeAg:252S／CO。(2)HBV DNA与抗-HBe无线性正相关(r=-0．052,P=0．477>0．05 Mean:HBV DNA 8．0×1010拷贝／ml,抗-HBe:0．18 S／CO)。结论HBV DNA与HBeAg呈线性正相关,HBeAg>100 S／CO,HBV DNA>104拷贝／ml,病毒复制活跃。HBV DNA与抗-HBe无线性正相关性,HBeAg阴性、抗-HBe阳性,病毒复制有所下降,但病毒载量仍较高,不可忽略其传染性。     

诊断肝细胞癌的一个新肿瘤标志物——异常凝血酶原

异常凝血酶原(DCP)是1994年Liebman等在肝细胞癌患者血浆中检出的，而正常人血浆中未检出。DCP与正常凝血酶原均是肝细胞合成的，其与正常凝血酶原的差异仅在于氨基端特定位置上的谷氨酸残基未经羧化，即去羧基凝血酶原。由于γ-谷氨酸残基的羧基是与钙结合的一个功能区，它的缺乏。失去与钙结合的结构基础，故无凝血酶原的功能。这个特定的谷氨酸残基的羧基来自肝细胞粗面内质网内的转移过程。     

肿瘤标志物联合检测提高消化道肿瘤的诊断阳性率

目的研究联合检测肿瘤标志物CEA、CA199、CAS0和CA242对消化系肿瘤的诊断价值。方法分别采用微粒子酶免分析和ⅡJSA法测定了结直肠癌，结直肠癌合并肝转移或肝癌患者血清CEA、CA199、CAS0和CA242水平。结果结直肠癌患者CEA、CA199、CAS0和CA242单项检测灵敏度(阳性率)分别为71．4％、80％、48．3％和80％，四项联合检测灵敏度为91．4％；肝癌患者单项检测灵敏度分别为0．0％、61．3％、20％和25．8％，联合检测灵敏度为80．6％，结肠癌肝转移患者单项灵敏度均为100％。结论CEA、CA199、CAS0和CA242四项联合检测能够提高对消化系肿瘤的诊断灵敏性和诊断价值，并有利于结直肠癌肝转移和原发性肝癌的鉴别诊断。联合检测可以明显提高消化道肿瘤的检测率。     

人群CagA阳性幽门螺杆菌感染调查

自1983年Warren及Marshall在人胃粘膜中发现螺状弯曲菌(即幽门螺杆菌,HP)以来,国内外进行了大量临床病理的研究,人们发现HP在人群中发病率很高,流行广泛.幽门螺杆菌与慢性胃炎消化性溃疡,胃癌和粘膜相关性淋巴样组织淋巴瘤密切相关.1996年WHO将其列为一级致癌因子,在我国普通人群中,HP感染率以达50%到60%.根据其CagA蛋白的有无将HP分为两型,I型菌:有CagA,表达CagA蛋白,具有毒素活性.Ⅱ型菌,元CagA,不表达CagA蛋白,无毒素活性.     

前列腺特异抗原（PSA）与前列腺癌及前列腺增生的相关性研究

目前前列腺癌的发病率逐年升高，“早期诊断”技术的提高是其中原因之一。前列腺特异抗原(PSA)测定的广泛开展为其早期诊断提供了有效信息。近年来又开展了总PSA(T-PSA)及游离PSA(F-PSA)测定，RPSA与T-PSA比值等方法来提高前列腺癌的诊断率。现将我院近年来应用微粒子酶免法测定的183例正常男性，63例前列腺增生患者和45