循环肿瘤细胞在胰腺癌诊疗中的应用

正胰腺癌(pancreatic cancer,PC)是一种预后极差的消化系统恶性肿瘤,2020年全球癌症数据显示:PC的死亡病例数与新发病例数相当[1]。2021年最新数据显示,其5年生存率仅为10%[2,3]。但一组来自日本的研究数据显示,小于2 cm的Ia期PC预后良好,5年生存率可达到68.7%,原位癌的5年生存率更是高达85.8%[4]。因此,提高早期诊断率对于改善PC不良预后至关重要[5]。另一方面,即使接受了根治性切除,许多PC患者仍然死于术后早期复发和转移,可能的原因是术前评估没有办法确定是否已经存在微转移病灶[6]。当前,PC的术前可切除性主要根据影像学,迫切需要研发真正的生物学指标[7]。近年来,以化疗为主的系统治疗、辅助治疗以及新辅助治疗水平的进步在改善PC预后中发挥了重要的作用[8-10]。但目前仍缺乏合适的生物标志物来评估疗效,指导方案的优化。     

大疱性嗜酸性蜂窝织炎1例

患者男,29岁,反复全身红斑丘疹伴瘙痒2个月余,加重3天。抗组胺治疗无效,肌注复方倍他米松后临床症状得到缓解。皮损组织活检提示真皮大量嗜酸性粒细胞浸润,并见到特征性"火焰征"。诊断嗜酸性蜂窝织炎后予以糖皮质激素治疗有效。     

氯化铵裂解法与非裂解法提取人脂肪干细胞生物学特性的差异

文题释义： 氯化铵红细胞裂解液：含有氯化铵成分的红细胞裂解液,此种裂解液被广泛应用于骨髓干细胞及脂肪干细胞的提取,其目的是去除组织内的红细胞,使目的细胞群进一步纯化。其作用机制为：红细胞内有大量碳酸酐酶,可自发将NH₃转化为NH₄⁺,CO₂转化为HCO₃^-,促使胞外NH₃和CO₂连续内流造成细胞裂解。 基质血管成分：脂肪组织中除了含有成熟脂肪细胞外,还包含一组混杂的细胞群,即基质血管成分。基质血管成分包括血管内皮细胞、脂肪祖细胞、成纤维细胞、周细胞、脂肪干细胞,造血干细胞、红细胞等,其具有多向分化潜能及促进组织血管再生等功能,在组织及器官的再生、修复中具有极大的应用前景。 背景：脂肪干细胞的提取及纯化流程尚未建立统一标准。最常用的纯化脂肪干细胞的方法是利用红细胞裂解液处理基质血管成分。但这一步骤是否对脂肪干细胞存在不良影响仍缺乏证据,是否有利于未来临床应用仍有待探讨。 目的：比较氯化铵红细胞裂解液法和非裂解法提取脂肪干细胞的效率,并进一步比较两种方法提取脂肪干细胞的生物学特性。 方法：收集吸脂手术患者脂肪组织,经Ⅰ型胶原酶消化后,利用或不用氯化铵红细胞裂解液对基质血管成分进行纯化,Muse^TM细胞状态分析仪对活细胞计数及活细胞比例评估;将基质血管成分接种后培养人脂肪干细胞至第2代,光学显微镜观察脂肪干细胞形态,流式细胞学分析脂肪干细胞表型,CCK-8法绘制细胞增殖曲线,成脂及成骨培养基诱导后油红O及茜素红染色法分别评估成脂、成骨分化能力。该实验经中国医学科学院整形外科医院伦理委员会批准,并与患者签署相关知情同意书。 结果与结论：①与裂解组相比,非裂解组提取即刻的基质血管成分中非红活细胞数更多,活细胞百分比更大;②两组脂肪干细胞均呈梭形、鱼群状排列;③两组细胞均高表达CD90、CD73、CD105等细胞表面抗原,低表达或不表达CD11b、CD34、CD19、CD45、HLA-DR等细胞表面抗原;④非裂解组细胞增殖速度更快,成脂及成骨能力两组间无明显区别;⑤结果表明,利用氯化铵红细胞裂解液法提取基质血管成分降低了脂肪干细胞提取效率,抑制了脂肪干细胞增殖能力。非裂解过程不影响脂肪干细胞表型及成脂、成骨分化能力。因此不建议在人脂肪干细胞提取过程中进行氯化铵法红细胞裂解。 ORCID: 0000-0002-8958-4975(李梓菲) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

右美托咪定对心外科术后患者睡眠质量的改善作用

目的研究右美托咪定对心外科术后患者睡眠质量的影响。方法利用多导睡眠图对2018年1月至2018年12月长海医院心脏术后患者进行睡眠监测,选择最终符合条件的患者63例为研究对象,按随机数字表法分为试验组32例和对照组31例。试验组患者从晚上22:00试验开始时持续静脉注射右美托咪定,次日晨6:00停止注射,连续注射3晚。镇静目标为镇静程度评估表(richmond agitation-sedation scale,RASS)评分-1~2分,右美托咪定的负荷剂量为0.5μg/kg,时间不超过20 min,然后以0.2~0.7μg/(kg·h)持续静脉注射,期间不使用其他镇静剂。对照组患者晚间不注射右美托咪定以及其他镇静药物。此段时间用多导睡眠仪监测两组患者的睡眠。观察目标为两组患者睡眠总时间、睡眠效率、觉醒次数、睡眠各阶段时间。试验期间白天的睡眠由床旁护士记录患者睡眠次数。结果试验组与对照组比,有更少的觉醒次数[(3.1~3.61)次vs.(8.87~9.77)次,P<0.01],更高的睡眠效率(68%~71.29%vs.25.1%~28.87%,P<0.01),更长的睡眠第二阶段[(249.55~266.89)min vs.(59.12~71.59)min,P<0.01],差异有统计学意义。两组患者睡眠第一阶段比较,差异无统计学意义[(63.61~7.05)min vs.(56.37~63.33)min,P>0.05]。结论夜间持续输注右美托咪定显著提高了患者睡眠效率、减少睡眠觉醒次数、增加睡眠第二阶段的时间,在一定程度上改善了心外科术后患者的睡眠质量。     

尖锐湿疣患者皮肤损伤中Src同源序列酪氨酸磷酸酶的表达

目的 探讨尖锐湿疣(CA)患者皮肤损伤中Src同源序列酪氨酸磷酸酶-1(SHP-1)和Src同源序列酪氨酸磷酸酶-2(SHP-2)的不同表达及意义.方法 应用原位杂交技术诊断人类乳头瘤病毒(HPV)6/11相关CA,采用SP免疫组织化学染色技术检测40例HPV6/11阳性CA患者皮肤损伤、20例健康对照皮肤(包皮)中SHP-1和SHP-2的表达及分布.计数资料采用X2检验.结果 CA患者皮肤损伤中SHP-1和SHP-2表达阳性细胞主要位于棘细胞层,棕黄着色,阳性反应定位胞质;而健康对照包皮少数阳性着色主要定位于基底层细胞的胞质,呈浅黄着色.CA患者皮肤损伤和健康对照中SHP-1阳性率分别为80%和35%(X2=11.87,P<0.01);SHP-2表达阳性率分别为85%和30%(X2=18.15,P<0.01).CA患者中SHP-1和SHP-2的表达差异无统计学意义(rs=1.0,P>0.05).结论 CA中SHP-1和SHP-2在HPV6/11感染角质形成细胞过度增殖中起调控作用.     

以剧烈腹痛伴血便为首发症状的变应性肉芽肿性血管炎二例

例1 男,52岁.因"突发剧烈腹痛伴血便3 d"入院,腹痛以右下腹为主,伴少量鲜红色稀薄血便.发病以来胃纳差,体重无明显变化.既往有高血压病史.入院体检:体温37℃,心率62次/min,呼吸19次/min,血压140/84 mm/ Hg(1 mm Hg=0.133 kPa);心肺无异常;腹平软,全腹压痛,以右下腹为著,无反跳痛,肝脾肋下未及,移动性浊音(-),肠鸣音8次/min.实验室检查:血常规示白细胞15.1×109/L,血小板(PLT)61×109/L,嗜酸性粒细胞0.156,嗜酸性粒细胞计数4.6×109/L;肝肾功能正常.     

永生化人前软骨干细胞株的构建

背景:前软骨干细胞体外培养增殖能力有限,但永生化细胞株可以提供大量性状稳定的永生化细胞,并且猿肾病毒40大T抗原基因(simian virus 40 large tumor antigen,SV40Tag)是较为常用且有效的体外永生化细胞的基因片段之一.目的:以SV40Tag转染的人前软骨干细胞构建永生化人前软骨干细胞株.方法:采用酶消化法及免疫磁珠筛选技术分离纯化人胚胎前软骨干细胞.利用脂质体介导基因转染技术将含有SV40Tag的质粒pCMVSV40T/PUR转染原代胚胎前软骨干细胞,以未转染细胞作阴性对照.阳性克隆扩大培养,观察细胞形态学以及传代复苏情况,计算细胞存活率和群体倍增时间,绘制细胞生长曲线.以免疫荧光细胞化学技术检测永生化人前软骨干细胞成纤维生长因子受体3,以RT-PCR检测永生化人前软骨干细胞及人前软骨干细胞中SV40Tag和成纤维生长因子受体3表达.结果与结论:贴壁培养的永生化人前软骨干细胞形态与原代人前软骨干细胞形态无明显差别.传代、冻存、复苏对人永生化前软骨干细胞的存活率无影响,第6,10代人前软骨干细胞的存活率降低(P<0.01).与第6,10代人前软骨干细胞相比,永生化人前软骨干细胞增殖较旺盛,群体倍增时间短、增殖率高(P<0.01).第2代永生化人前软骨干细胞成纤维生长因子受体3染色阳性.成纤维生长因子受体3的RT-PCR结果显示在约400 bp处有一特异形扩增条带,SV40Tag的RT-PCR结果显示在约560 bp处有一特异形扩增条带,未转染的原代细胞未见条带.提示以免疫磁珠筛选技术及脂质体转染技术成功构建了SV40Tag永生化人前软骨干细胞株.     

脊髓N-myc下游调节基因2对奥沙利铂诱导神经病理性疼痛及星形胶质细胞分化影响

目的探讨星形胶质细胞N-myc下游调节基因2(NDRG2)是否参与奥沙利珀诱导的神经病理性疼痛(OINP),并探索其对脊髓星形胶质细胞表型分化的影响。方法选取清洁级(SPF级)雄性SD大鼠32只。实验分为两部分,第一部分,将16只雄性大鼠随机分为Vehicle组(腹腔注射5%葡萄糖溶液,n=8)和Oxaliplatin组(腹腔注射奥沙利铂溶液,n=8);第二部分,将16只雄性大鼠随机分为对照腺病毒+OINP组(AD-control+OINP组,鞘内注射AD-control,腹腔注射奥沙利铂溶液,n=8)和Ndrg2干扰腺病毒+OINP组(AD-Ndrg2-RNAi+OINP组,鞘内注射AD-Ndrg2-RNAi,腹腔注射奥沙利铂溶液,n=8)。行为学检测各组大鼠机械缩足阈值(MWT)、热缩足潜伏期(TWL)。蛋白免疫印迹和实时荧光定量聚合酶链反应检测星形胶质细胞标记物GFAP、A1型星形胶质细胞标记物C3、A2型星形胶质细胞标记物S100A10及NDRG2的蛋白及mRNA表达,免疫荧光检测GFAP和C3、NDRG2的荧光表达。结果腹腔注射奥沙利铂7、11、18、25 d,Vehicle组的MWT、TWL均高于Oxaliplatin组,差异有统计学意义(P<0.05)。Oxaliplatin组脊髓星形胶质细胞标记物GFAP蛋白含量、A1表型星形胶质细胞标记物C3蛋白含量均高于Vehicle组,而A2表型星形胶质细胞标记物S100A10蛋白含量低于Vehicle组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Oxaliplatin组脊髓NDRG2蛋白含量显著高于Vehicle组,差异有统计学意义(P<0.05)。AD-Ndrg2-RNAi+OINP组NDRG2蛋白含量及Ndrg2相对mRNA含量显著低于AD-control+OINP组,差异有统计学意义(P<0.05)。给药11 d,AD-Ndrg2-RNAi+OINP组的MWT和TWL显著高于AD-control+OINP组,差异均有统计学意义(P<0.05)。AD-Ndrg2-RNAi+OINP组A1表型星形胶质细胞标志物C3的蛋白含量及mRNA含量低于AD-control+OINP组,而A2表型星形胶质细胞标志物S100A10的蛋白含量及mRNA含量显著高于AD-control+OINP组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论脊髓背角NDRG2促进星形胶质细胞向神经毒性A1表型分化,从而促进OINP雄性大鼠产生机械痛觉过敏和热痛觉过敏,为治疗OINP提供潜在的干预靶点。