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目的 建立针对弗氏枸橼酸杆菌的TaqMan实时荧光定量-聚合酶链反应(real time-PCR)检测方法。 方法 针对弗氏枸橼酸杆菌的特有序列设计引物和TaqMan探针,扩增目的基因建立标准曲线,确定检测方法的灵敏度;对20种其他肠道致病菌及院内感染中常见的致病菌进行检测,评价该检测方法的特异性;使用牛奶模拟标本评价方法在实际检测工作中应用性。 结果 TaqMan real time-PCR检测方法对弗氏枸橼酸杆菌重组质粒的检测灵敏度为1.0101拷贝/反应体系;该检测方法在检测30种其他肠道致病菌及院内感染中常见的致病菌时未出现特异性扩增。该检测方法对牛奶模拟样本中弗氏枸橼酸杆菌检测下限为1.0102cfu/ml的菌量;通过对1.0107、1.0105和1.0103三个浓度质粒标准品的重复检测,确定本方法的组内变异系数为1.90%~3.91%;组间变异系数为1.52%~1.69%。 结论 本研究建立的TaqMan real time-PCR检测方法可作为检测弗氏枸橼酸杆菌灵敏、特异、快速的方法。 相似文献
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血红素加氧酶-1 (heme oxygenase-1, HO-1)是一种细胞保护酶,可催化血红素转化为一氧化碳、胆绿素和铁,共同保护细胞免受氧化和炎症损伤,在维持细胞稳态中有重要作用。近年来, HO-1被广泛发现具有抑制多种病毒的生物学作用, HO-1诱导表达可抑制丙型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒、登革热病毒、埃博拉病毒、A型流感病毒、寨卡病毒、新型冠状病毒、人类呼吸道合胞病毒、甲型肝炎病毒、肠道病毒71等多种病毒的复制。研究显示, HO-1对病毒的抑制和机体的保护作用主要包括3种机制:HO-1及下游产物对病毒复制的直接抑制作用、通过HO-1激活宿主细胞Ⅰ型干扰素相关的先天免疫对抗病毒复制、HO-1及其下游产物抑制病毒感染引起的炎症损伤等。本文主要就HO-1抗病毒作用及其机制的最新进展进行综述,以期为HO-1作为潜在的抗病毒治疗靶点提供研究参考。 相似文献
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目的 研究福氏痢疾杆菌2b血清型菌株中SfII和SfX前噬菌体整合位点及排列方式.方法 根据2b血清型菌株基因组中SFII和SfX前噬菌体可能的整合位点及排列方式,设计引物,对50株2b血清型菌株进行PCR扩增,并对扩增产物测序,根据扩增和测序结果判断噬菌体的整合位点和排列方式.结果 在2b血清型菌株中,SfII和SfX前噬菌体前后相连,整合于宿主菌染色体proA和yaiC基因间的thrW tRNA基因上;以SfII在前,SfX在后,或SfX在前,SfII在后两种方式排列;而以后一种方式为主,在共50株检测菌株中,有49株为此方式.结论 福氏痢疾杆菌血清型相关噬菌体的整合位点及排列方式,对研究福氏痢疾杆菌血清型转换及血清型相关噬菌体的整合机制具有重要意义. 相似文献
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目的 研究弗氏枸橼酸杆菌CF74的T6SS基因组岛功能。方法 构建弗氏枸橼酸杆菌CF74的T6SS基因组岛的精确缺失突变株(CF74T6SS)。对弗氏枸橼酸杆菌CF74和其突变株CF74T6SS的全菌蛋白和上清蛋白进行提取,并进行2-DE分析。结果 在CF74T6SS全菌蛋白中,有4个蛋白表达上调,42个蛋白表达下调,并且FliC的表达下调十分明显;在CF74T6SS的培养上清中,有27个蛋白表达上调,36个蛋白表达下调,并且FliC、FlgK和FliD的表达下调十分明显。结论 弗氏枸橼酸杆菌CF74的T6SS可以影响FliC蛋白的表达和分泌。 相似文献
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目的 研究福氏痢疾杆菌2b血清型菌株中SfII和SfX前噬菌体整合位点及排列方式.方法 根据2b血清型菌株基因组中SFII和SfX前噬菌体可能的整合位点及排列方式,设计引物,对50株2b血清型菌株进行PCR扩增,并对扩增产物测序,根据扩增和测序结果判断噬菌体的整合位点和排列方式.结果 在2b血清型菌株中,SfII和SfX前噬菌体前后相连,整合于宿主菌染色体proA和yaiC基因间的thrW tRNA基因上;以SfII在前,SfX在后,或SfX在前,SfII在后两种方式排列;而以后一种方式为主,在共50株检测菌株中,有49株为此方式.结论 福氏痢疾杆菌血清型相关噬菌体的整合位点及排列方式,对研究福氏痢疾杆菌血清型转换及血清型相关噬菌体的整合机制具有重要意义. 相似文献
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目的 研究福氏痢疾杆菌2b血清型菌株中SfII和SfX前噬菌体整合位点及排列方式.方法 根据2b血清型菌株基因组中SFII和SfX前噬菌体可能的整合位点及排列方式,设计引物,对50株2b血清型菌株进行PCR扩增,并对扩增产物测序,根据扩增和测序结果判断噬菌体的整合位点和排列方式.结果 在2b血清型菌株中,SfII和SfX前噬菌体前后相连,整合于宿主菌染色体proA和yaiC基因间的thrW tRNA基因上;以SfII在前,SfX在后,或SfX在前,SfII在后两种方式排列;而以后一种方式为主,在共50株检测菌株中,有49株为此方式.结论 福氏痢疾杆菌血清型相关噬菌体的整合位点及排列方式,对研究福氏痢疾杆菌血清型转换及血清型相关噬菌体的整合机制具有重要意义. 相似文献
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目的运用实验室信息管理系统(LIS)中数据,建立适于吉林大学第一医院的血清尿素、肌酐参考区间,并验证间接法的可行性。方法调取2019年1月至12月吉林大学第一医院LIS中体检中心数据。"Stem-and-LeafBox Plots"剔除离群值;Z检验与Kruskal-Wallis H检验分别分析性别、各年龄组间差异;偏度系数-中位数-变异系数(LMS)法拟合连续百分位数曲线分析血清尿素、肌酐随年龄的变化趋势;非参数排序法获得参考区间上下限。使用2020年1月至12月健康体检人群数据进行适用性验证。结果最终纳入79 025例体检者。血清尿素、肌酐性别间差异有统计学意义(ZZ~*)。血清尿素于50岁起呈上升趋势,20~49岁男性参考区间为3.0~7.4 mmol/L,女性为2.4~6.6 mmol/L,50~79岁男性参考区间为3.4~8.4 mmol/L,女性为3.2~7.8 mmol/L。血清肌酐于60岁起呈上升趋势,20~59岁男性参考区间为57~101μmol/L,女性为40~72μmol/L,60~79岁男性参考区间为57~109μmol/L,女性为43~82μmol/L。本研究建立的参考区间通过适用性验证。结论本研究建立的血清尿素、肌酐参考区间适用于本医院,间接法建立参考区间简便可靠,值得推广。 相似文献
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目的 建立基于O抗修饰基因的福氏志贺菌血清型PCR鉴定方法.方法 根据福氏志贺菌O抗原合成及修饰特异基因设计引物,以常见的14种福氏志贺菌血清型(包括1a、1b、1c、2a、2b、3a、3b、4a、4b、5a、Y、X、Xv和F6)为标准菌株,建立福氏志贺菌血清型单重PCR鉴定方法;并以痢疾志贺菌、宋内志贺菌、鲍氏志贺菌和腹泻相关的其他菌属菌株验证特异性;应用该方法对106株福氏志贺菌临床分离株进行PCR血清分型.结果 建立一种福氏志贺菌血清型单重PCR鉴定方法,通过8个PCR反应,能够鉴定目前已知的15种血清型中的14种(Xv除外).检测灵敏度在10 pg至1 ng DNA(20μl反应体系).对106株福氏志贺菌临床分离株的检测结果提示,PCR分型方法与玻片凝集法具有很高的一致性.结论 本研究建立的福氏志贺菌血清型单重PCR鉴定方法具有特异性、灵敏性,可用于临床检测. 相似文献