SE基因探针的研制及初步应用

过去几年间,基因探针的应用为细菌诊断、分类鉴定及流行病学调查等研究开辟了新的途径。国外学者预言,今后十年用基因探针直接检测临床标本有可能淘汰某些耗物、费时的常规化验。从而为一些不易培养和生化反应不敏感的病原菌的诊断提供数据。     

成人支原体肺炎病原检测与临床分析

肺炎支原体（MP）在呼吸道感染中越来越受到重视，MP肺炎占各年龄组发病的10～20％[1]，而且是成人慢阻肺急性发作的重要病原之一[2]。由于本病缺乏特异临床表现，确诊依靠病原或抗体的检测。病原分离培养固然可靠，但无助于早期诊断[3]。抗体测定，仅能证明血清中有无MP抗体，恢复期抗体滴度升高四倍，虽有诊断意义，但已失去早期诊断价值。近年来国内外开展了聚合酶链反应（PCR）技术检测MP，此法快速，可靠、特异性高，成为MP感染早期特异诊断的有力武器[4，5]。PCR技术检测成人肺炎研究尚少，我们在1993年8月～12月对住院50例肺…     

肠毒素大肠杆菌LTh－STIb二价基因探针的克隆及其应用研究

在肠毒素大肠杆菌（ＥＴＥＣ）ＬＴｈ－ＳＴＩａ－ＳＴＩｂ三价基因探针的基础上，用限制性内切酶ＥｃｏＲｌ酶切，回收片段．重新构建ＬＴｈ－ＳＴＩｂ二价基因探针的克隆株。用辣根过氧化物酶复合物（ＨＲＰ）直接标记二价基因探针，建立了增强型化学发光反应（ＥＣＬ）检测ＥＴＥＣ的方法．其敏感性可测到０．１ｐｇ的质粒ＤＮＡ或由１０个菌体培养而来的ＥＴＥＣ细胞，与同位素标记杂交方法的敏感性一致．且此探针仅与产ＳＴＩｂ、ＬＴｈ肠毒素的人源性ＥＴＥＣ菌株杂交，与ＳＴＩａ肠毒素菌株及其它非ＥＴＥＣ菌株均无杂交信号．该探针与三价探针及ＬＴｈ单价探针联合使用，能间接将ＬＴｈ、ＳＴＩａ和ＳＴＩｂ３种肠毒素分型。结果表明该方法简便快速、特异敏感，无放射性污染，是ＥＴＥＣ实验室诊断及分子流行病学调查的有效工具。     

不同裂解液处理支原体肺炎临床标本对聚合酶链反应的影响

不同裂解液处理支原体肺炎临床标本对聚合酶链反应的影响黄庆华，卢强，孙利炜，林万明我们在聚合酶链反应（ＰＣＲ）用于检测肺炎支原体（ＭＰ）ＤＮＡ的实验室研究的基础上，将该技术直接用于临床标本的检测研究中，发现ＭＰ纯培养物及支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＡｓ）模...     

产肠毒素脆弱拟杆菌性腹泻

脆弱拟杆菌是大量存在于人和动物肠道的一种革兰阴性无芽孢专性厌氧菌,为肠道正常菌群成员之一。其某些菌株可以产生肠毒素,从而导致腹泻。本文介绍了产肠毒素脆弱拟杆菌的发现及其肠道致病性的研究过程、动物模型、病理改变及发病机理。     

用热变性温度法测定沙眼衣原体DNA中G+C的含量

本文报告了使用林万明等改进的半导体热敏电阻探针直接测温装置的热变性温度法(Tm),测定沙眼衣原体DNA中G+C的含量。此法简单、方便并且重复性好。本结果表明,沙眼衣原体TE55株DNA中G+C的含量,与国外文献值相近,今后,可用此法鉴别临床分离的衣原体及进一步确立衣原体的分类位置。     

产肠毒素大肠杆菌不耐热肠毒素基因探针的研制及临床应用

<正> 近几年来,应用基因探针检测产毒性大肠杆菌(ETEC)取得了很大进展。本文报告用含有LT-B基因和部分LT-A基因序列的800bpDNA片段作探针,从腹泻患儿粪便标本中检测ETBC LT。 材料和方法 一、菌种 探针供体菌大肠杆菌C600(pMMO_(30)),由军事医科院生物工程研究所陈锦光惠赠。该pMMO_(30)质粒中含编码LT-B亚单位590bpDNA序列和210bpLT-A亚单位基因片段,用作探针的序列全长800bp。实验所用的标准ETEC菌株和临床分离大肠杆