方格星虫提取物对膜性肾病模型的治疗作用及机制初探

目的:初步探讨方格星虫粗提物(SNP)对膜性肾病(MN)的治疗作用及其可能机制。方法:50只SD大鼠随机分为模型组和对照组,模型组大鼠腹腔一次注入抗FxlA血清建立被动性Heymann肾炎模型,模型建立1周后依24 h尿蛋白排泄量(24 h UPE)随机将Heymann肾炎大鼠分为SNP治疗组和未治疗组,治疗组用SNP灌胃治疗。考马斯亮蓝法每周测定24 h UPE。治疗4周结束后处死大鼠取双肾,光镜、电镜观察肾脏病理改变,RT-PCR法检测肾组织nephrin mRNA和podocin mRNA的表达量。结果:SNP治疗4周后大鼠24 h UPE较未治疗组降低(P<0.05);模型组大鼠肾小球基底膜增厚,上皮下电子致密物沉积,足细胞足突融合等病理改变,SNP治疗组大鼠上述病变较未治疗组减轻,经测定,足细胞足突融合率较未治疗组显著降低(P<0.01);SNP治疗组nephrin mRNA和podocin mRNA表达量较未治疗组升高(P<0.05)。结论:SNP可通过上调膜性肾病大鼠足细胞nephrin和podocin基因表达水平,一定程度上减轻足细胞足突融合,进而减少尿蛋白滤过,可能对人类膜性肾病具有辅助治疗作用。     

Nrf2-Keap1信号通路在急性肾损伤中的研究进展

急性肾损伤(AKI)是一组极具危害的临床综合征,表现为肾功能快速下降,伴高发病率、高致死率。氧化应激反应被大量研究证实是各种因素下促进AKI发生发展的共同通路,而核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)介导大量涉及氧化还原反应的基因表达,其活化是细胞的主要防御机制之一。本文将近年关于Nrf2-Keap1信号通路在AKI中的研究进展做一总结,并且对Nrf2激活剂在临床应用中的研究现状展开讨论,以期为AKI的防治提供依据。     

宫颈癌HeLa细胞特异性结合肽的筛选及鉴定

背景与目的:宫颈癌的分子靶向治疗具有很好的疗效,同时可以显著减少抗癌药物对人体自身的损伤,因此备受关注。本研究利用噬菌体体内展示技术筛选及鉴定宫颈癌特异性结合肽,将有可能成为化疗药物的靶向载体,为宫颈癌靶向药物治疗奠定基础。方法:体外培养宫颈癌HeLa细胞接种裸鼠,建立肿瘤动物模型。将随机肽库尾静脉注入裸鼠体内,循环15 min,心脏灌注后回收肿瘤组织噬菌体扩增、纯化并以此作为起始物进行第2轮的筛选,如此进行3轮体内筛选后挑取噬菌体克隆,进行免疫组化及ELISA实验,初步鉴定噬菌体克隆对宫颈癌细胞的亲和力及特异性,并将具有强亲和力的克隆进行测序。结果:ELISA结果显示,随机挑选10个噬菌体单克隆中8个克隆对HeLa细胞具有很强的亲和力,将这8个克隆进行测序,获得相同短肽序列LLRSTGF。结论:利用噬菌体展示技术筛选出与宫颈癌细胞HeLa特异性结合的短肽,进一步与化疗药物结合,为宫颈癌靶向治疗提供新的方法。     

日间手术患儿家长术前焦虑现状调查

目的:探讨日间手术患儿家长术前焦虑现状,为采取有针对性的护理干预措施提供理论依据。方法:采用状态焦虑量表(S-AI)对2019年5月1日～7月31日某儿童医院日间外科接受日间手术的199例患儿家长进行术前焦虑情况调查,并对调查结果进行统计分析。结果:日间手术患儿家长术前焦虑评分高于国内常模,差异有统计学意义(P 0. 05);家庭收入水平、患儿手术种类是影响日间手术患儿家长术前焦虑的相关因素(P 0. 05)。结论:日间手术患儿家长术前普遍存在焦虑情绪,护理人员应充分评估患儿家长的术前焦虑情况,采取有针对性的护理干预措施,以减少患儿家长术前焦虑。     

狼疮性肾炎患者肾组织Epstein-Barr病毒感染状况及其致病作用初探

并感染之间以及不同病理类型之间差异均无统计学意义(P＞0.05).肾组织EBER和EBV LMP1表达阳性的LN患者的血清中anti-Sm-Ab阳性率显著高于两标记物表达阴性的LN患者(EBER:34.3%vs 8.7%,EBV LMP1:35.3%vs 9.1%,P均＜0.05).结论 肾组织EBV感染可能参与了LN的发病,其机制可能部分与诱导机体产生自身抗体anti-Sm-Ab有关.     

miR-324-5p靶向调控CARD9对急性胰腺炎腺泡细胞增殖、凋亡的影响及机制

目的探讨微小RNA-324-5p(miR-324-5p)靶向调控胱天蛋白酶募集域蛋白(CARD)9对急性胰腺炎(AP)腺泡细胞增殖、凋亡的影响及机制。方法采用雨蛙肽处理大鼠胰腺腺泡细胞株AR42J构建急性胰腺炎模型。实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)与Western印迹技术分别检测miR-324-5p、CARD9 mRNA及蛋白表达。应用脂质体转染技术分别将miR-NC、miR-324-5p mimic、si-NC、si-CARD9转染入AP腺泡AR42J细胞,噻唑蓝(MTT)与流式细胞仪分别检测AR42J细胞增殖及凋亡。双荧光素酶报告实验验证CARD9与miR-324-5p的作用关系。Western印迹检测细胞周期蛋白(Cyclin)D1、p21、p27、Bcl-2、Bax、酶切含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)-3蛋白表达。结果雨蛙肽素处理后AR42J细胞中miR-324-5p表达水平显著低于对照组,而CARD9 mRNA及蛋白表达水平显著高于对照组(P<0.05);分别转染miR-324-5p mimic、si-CARD9后,由雨蛙肽素诱导的AR42J细胞凋亡明显受到抑制,而细胞增殖能力明显增强,CyclinD1、Bcl-2蛋白表达上调,p21、p27、Bax、酶切caspase-3蛋白表达下调(均P<0.05);CARD9是miR-324-5p的靶基因;CARD9过表达逆转了miR-324-5p过表达对雨蛙肽诱导的胰腺炎腺泡细胞AR42J增殖和凋亡的作用。结论miR-324-5p可通过抑制CARD9表达进而促进AR42J细胞增殖,抑制细胞凋亡。     

经典型蛋白激酶C在不同肾小球疾病患者肾组织的表达

目的:检测4种经典型蛋白激酶C同工酶(PKC-α、PKC-βⅠ、PKC-βⅡ和PKC-γ)在正常及不同肾小球疾病患者肾组织的表达,探讨其在肾小球疾病中的作用。方法:收集广东医科大学附属医院肾病内科行肾脏病理活检确诊的肾小球疾病患者肾组织50例,其中肾小球轻微病变、膜性肾病、局灶节段性肾小球硬化症、Ig A肾病及狼疮性肾炎各10例;收集6例来自肾肿瘤患者手术切除远离肿瘤部分、病理检查无异常的肾组织做为正常组。免疫组化法检测并分析4种经典型蛋白激酶C同工酶在正常及肾小球疾病肾组织的表达变化。结果:PKC-α、βⅠ和βⅡ在正常肾组织肾小管上皮细胞和肾小球均有表达,PKC-γ仅表达于肾小球足细胞,在肾小管间质均无表达;各经典型PKC同工酶在肾小球疾病肾组织中表达部位与正常肾组织相同,但表达量不尽相同。结论:在肾小球疾病中,PKC-α和PKC-βⅠ可能参与肾小管间质纤维化,是慢性肾脏病的潜在治疗靶点,PKC-γ可能参与足细胞生理功能的维持,不参与肾小管间质的损伤。     

儿童日间手术当日手术取消的原因分析及对策

目的探讨儿童日间手术当日手术取消的原因,提出相应对策,以降低此类手术取消率,提高医疗效率。方法通过查阅医院的数字化病案系统进行资料收集,对2014年3月至2016年12月的儿童日间手术当日取消手术进行原因分析。结果儿童日间手术当日手术取消率为6.13%;取消手术原因主要包括疾病因素512例(91.27%),医方因素36例(6.42%),患方因素10例(1.78%)。结论儿童日间手术当日手术取消原因多样,医院应改革日间手术运行模式,医务人员应加强自身业务能力,全面评估患儿基本情况,做好患儿及其家长的健康教育,尽量减少可控制因素对手术取消的影响,降低手术取消率。     

蛋白激酶C-ε在尿蛋白所致肾小管上皮细胞损伤中的作用

目的 探讨蛋白激酶Cε(PKC-ε)在尿蛋白所致肾小管上皮细胞(RTECs)损伤中的作用.方法 将体外培养的人肾小管上皮细胞株(HK-2细胞)分为对照组、尿蛋白组(4mg/mL),激动剂组(10μmol/LPKC-ε激动剂+4 mg/mL尿蛋白)及抑制剂组(10μmol/L PKC-ε抑制刹+4 mg/mL尿蛋白)分别处理48h,用Western Blotting法检测PKC-ε活性和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;用ELISA方法检测培养上清人纤维连蛋白(FN)、转化生长因子β (TGF-β)的分泌水平;用全自动生化分析仪检测细胞LDH释放率.结果 尿蛋白明显抑制HK-2细胞PKC-ε的活化(P＜0.01),增加HK-2细胞α-SMA表达(p＜0.05)、上清液FN和TGF-β分泌(P＜0.01)以及LDH释放率(P＜0.01);PKC-ε激动剂减轻尿蛋白所致HK-2细胞培养上清液TGF-β分泌(P＜0.01),而不影响α-SMA表达、FN分泌以及LDH释放率;PKC-ε抑制剂进一步增加尿蛋白所致HK-2细胞α-SMA表达、FN和TGF-β分泌以及LDH释放率(均P＜0.05).结论 PKC-ε高活性是维持RTECs正常形态和功能的基础,尿蛋白抑制RTECs正常PKC-ε高活性,减轻尿蛋白对PKC-ε活性的抑制可能有利于维持RTECs正常的形态和功能.