儿童新型冠状病毒感染诊断、治疗和预防专家共识(第二版)

自2019年12月新型冠状病毒感染暴发以来,我国政府采取了严格的防控措施,国内疫情已得到初步控制,但形势依然严峻,境外多个国家也相继出现疫情。根据世界卫生组织的报告:截至2020年3月5日,全球共报告95333例确诊病例(其中我国累计报告确诊病例80565例),85个国家有确诊病例报告,中国将面临输入性病例的传播风险,这为防治我国儿童的疾病疫情提出了新的挑战[1]。在这次疫情中,与成人病例相比,儿童病例相对较少、症状轻、预后较好。目前国内病例数据显示,18岁以下儿童占所有报告病例的2.4%,尚无死亡病例报告[2]。     

儿童社区获得性呼吸道感染的肺炎链球菌和流感嗜血杆菌耐药性监测

目的监测2000-2004年连续5年5岁以下呼吸道感染患儿鼻咽拭子分离的肺炎链球菌和流感嗜血杆菌对抗菌药物的耐药性.方法采用E试验和K-B纸片法对临床分离541株肺炎链球菌、521株流感嗜血杆菌进行抗菌药物耐药性测定.结果肺炎链球菌对青霉素不敏感率由2000年的22%增加到2004年的32.9%,P＜0.05;对头孢呋辛和头孢克洛不敏感率由7%增加到25%左右,P＜0.01;对红霉素不敏感率由88%增加到94.3%,P＞0.05;对四环素和复方磺胺甲噁唑不敏感率分别为90%以上和80%以上.流感嗜血杆菌对氨苄西林耐药率和产β内酰胺酶率由2000年的5.0%增加到2004年的14.3%,P＜0.05;对阿莫西林-克拉维酸、头孢曲松和头孢呋辛非常敏感;对头孢克洛不敏感率由2%增加到14.3%,P＜0.01.结论肺炎链球菌对青霉素不敏感率和流感嗜血杆菌对氨苄西林耐药率和产β内酰胺酶率呈明显上升趋势.     

儿童患者中分离的746株肠球菌耐药性分析

目的分析我院2001-2005年儿童患者临床标本中分离的肠球菌对10种常用抗菌药物的耐药性。方法药敏试验采用Kirby—Bauer琼脂扩散法，Nithocefin纸片检测β内酰胺酶，数据处理采用WHONET5．3软件。结果746株肠球菌中粪肠球菌、屎肠球菌和坚韧肠球菌分别占47．8％、47．2％和2．1％。未出现对万古霉素和替考拉宁耐药株，住院标本中分离的粪肠球菌对氨苄西林、环丙沙星、高浓度庆大霉素和高浓度链霉素的耐药率高于门诊标本分离株（P〈0．01），住院标本中屎肠球菌对氨苄西林的耐药率高于门诊标本（P〈0．05）；除万古霉素、替考拉宁、红霉素、高浓度链霉素外，屎肠球菌对其他常用抗菌药的耐药率明显高于粪肠球菌（P〈0．01）。结论儿科肠球菌感染以医院感染为主，菌株对氨苄西林、高浓度庆大霉素和红霉素有较高耐药性，对万古霉素和替考拉宁均未出现耐药株。     

发展粘膜免疫B族链球菌荚膜多糖结合物疫苗

育龄妇女直肠和阴道B族链球菌(GBS)带菌是引起新生儿侵袭性感染的最主要原因。有效的疫苗预防应该能够诱导机体产生全身和粘膜局部两方面的免疫力。为了有效地预防新生儿GBS感染的发生,本项目制备了粘膜免疫的B族链球菌荚膜多糖(GBS CPS)结合物疫苗。它应该能够诱导机体产生全身(系统)和粘膜局部两方面的免疫力。这样,     

儿童患者中对碳青霉烯类耐药的绿脓假单胞菌产金属酶基因型研究

目的研究儿童患者中对碳青霉烯类抗生素耐药的绿脓假单胞菌产金属酶的基因型。方法本研究收集了2003年12月至2005年11月我院住院患儿中分离出的对碳青霉烯类抗生素耐药的绿脓假单胞菌59株。使用E试验法检测产金属酶的耐药表型，PCR技术检测编码金属酶的IMP、VIM、SPM和GIM4种基因型。PCR反应产物进行纯化后，使用双脱氧末端终止法进行DNA测序。将得到的拼接序列与GenBank中Blast进行同源分析，确定其基因亚型。结果59株对碳青霉烯类抗生素耐药的绿脓假单胞菌中，纸片法检测金属酶表型结果阳性29株，占49．2％。PCR检测金属酶基因型阳性39株，占66．1％，其中IMP型阳性35株，占89．7％，VIM型阳性4株，占10．3％。未检测出SPM和GIM型金属酶。测序结果显示，IMP型测序结果均为产IMP．1亚型金属酶的绿脓假单胞菌。VIM型测序结果均为产VIM-2亚型金属酶的绿脓假单胞菌。结论儿童患者中对碳青霉烯类抗生素耐药的绿脓假单胞菌，产金属酶率高于成人报道。产生的金属酶同时存在IMP-1和VIM-2两种基因型，其中以IMP-1亚型为主，少部分为VIM-2亚型。产金属酶是儿童患者对碳青霉烯类抗生素耐药的绿脓假单胞菌的重要耐药机制。在儿科进行对碳青霉烯类耐药的绿脓假单胞菌产金属酶的监测十分重要。     

对碳青霉烯类抗生素耐药铜绿假单胞菌耐药机制及耐药性的研究

目的了解目前儿科临床分离对碳青霉烯类抗生素耐药铜绿假单胞菌外膜孔蛋白OprD2缺失和金属β内酰胺酶（MBI．）产生的情况，及具有不同耐药机制菌株的耐药特点。方法收集2004年1月--2006年12月从我院住院患儿中分离出的75株对碳青霉烯类抗生素耐药铜绿假单胞菌。用PCR方法进行oprD2基因、金属酶IMP、VIM、SPMT和GIM基因检测。用琼脂稀释法进行药敏试验，按照2006年CLSI推荐标准判断结果。使用WHONET5．3和SPSS13．0软件进行数据分析。结果检测75株对碳青霉烯类抗生素耐药的铜绿假单胞菌中外膜孔蛋白OprD2缺失者50株，占66．7％；产金属酶的46株．占61、3％，其中IMP阳性38株（82．6％），VIM阳性8株（17．4％）。外膜孔蛋白OprD2缺失同时产金属酶的34株，占45．3％，其对口内酰胺类抗生素的耐药率、MIC50和MIC90均高于其他菌株。结论目前从儿科临床分离对碳青霉烯类抗生素耐药铜绿假单胞菌外膜孔蛋白OprD2缺失和产生金属酶都十分严重，菌株的耐药性也很高，并且产MBI．菌株存在IMP和VIM2种基因型。     

儿童临床分离多重耐药铜绿假单胞菌的耐药性分析

目的了解儿童临床分离多重耐药铜绿假单胞菌的耐药特征。方法收集我院住院患儿中分离的120株多重耐药铜绿假单胞菌，作药敏试验，用琼脂稀释法测定抗菌药物的MIC值，按照2005年CLSI推荐标准判断结果。数据分析使用WHONET5．3软件。结果多重耐药铜绿假单胞菌对氨曲南的耐药率最高（86．7％），头孢他啶仍具较好的抗菌活性；环丙沙星耐药率最低（2．5％）。亚胺培南和美罗培南的耐药率分别达到34．2％、35．8％，两者MIC50和MIC50相同，分别为4和32mg／L。59株细菌对碳青霉烯类抗生素耐药，占49．2％。碳青霉烯类抗生素耐药株与非耐药株对头孢他啶、头孢吡肟、头孢哌酮-舒巴坦、哌拉西林-三唑巴坦的耐药率差异有显著性（P〈0．05）。结论目前从儿科临床分离多重耐药铜绿假单胞菌的多重耐药现象严重。     

卡他莫拉菌耐药性与β内酰胺酶分型

目的对卡他莫拉菌BROβ内酰胺酶进行分型分析，并对其与抗菌药物耐药的关系进行探讨。方法采用BSAC(british society for antimicrobial chemotherapy，BSAC)琼脂稀释法对本院呼吸道感染患儿鼻咽部分离的80株卡他莫拉菌株进行8种药敏试验，用Nitrocefin纸片检测β内酰胺酶，采用限制性内切酶分析方法进行bro基因分型，同时将bro-1基因阳性和bro-2基因阳性菌株对β内酰胺类抗菌药物的耐药性进行比较。结果(1)80株卡他莫拉菌β内酰胺酶阳性率为95．0％。对氨苄西林MIC90为32μg／ml，对头孢呋辛、头孢克洛和头孢噻肟的MIC90分别为4、8、1μg／ml，对四环素的MIC90为16μg／ml；环丙沙星为最敏感的抗菌药。(2)80株卡他莫拉菌bro基因分型结果：6株(7．5％)bro阴性，55株(68．8％)bro—1阳性，19株(23．8％)bro-2阳性。其中有2株bro基因阴性经Nitrocefin纸片法检测，β内酰胺酶结果为阳性，其他菌株基因检测与产酶结果一致。(3)bro-1阳性菌株对氨苄西林、头孢克洛的MIC90值与bro-2阳性菌株相比，有不同程度的升高。结论我国儿童携带的卡他莫拉菌产酶率高，对氨苄西林高度耐药。目前应加强该菌对头孢类和四环素的耐药监测。限制性内切酶分析方法在检测bro基因、筛选卡他莫拉菌对β内酰胺类抗生素的耐药及分子流行病学调查方面有一定的应用价值。     

16S～23SrDNA内转录间隔区序列聚合酶链技术鉴定凝固酶阴性葡萄球菌

目的采用分子生物学技术鉴定凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)。方法用16S-23SrDNA内转录间隔区序列PcR(ITS-PCR)技术，对6株质控菌和171株已通过AutoScan-4微生物分析仪鉴定过的CNS临床分离株进行分型鉴定。结果质控菌株及经APIStaph系统确证的11种CNS得到各自不同的ITS-PCR电泳类型，建立了该技术在本实验室的CNS初级数据库，包括表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、人葡萄球菌、腐生葡萄球菌、木糖葡萄球菌、华纳葡萄球菌、头部葡萄球菌、孔氏葡萄球菌解脲亚种、松鼠葡萄球菌、耳葡萄球菌和模仿葡萄球菌。只有松鼠葡萄球菌表现了多态性。该ITS-PCR数据库对所研究的临床株的识别率为93．57％(160／171)，准确率达93．75％(150／160)。API Staph系统证明，ITS-PCR法鉴定结果较为准确，AutoScan-4微生物分析仪检测CNS至少有9．36％(16／171)是不确切的。结论ITS-PCR证明是一项有价值，对CNS可选用的简便、快速、可靠，廉价的分子生物学鉴定技术。     

小儿呼吸道感染的细菌病原

引起小儿上呼吸道感染的病原以病毒为主,而下呼吸道感染常由细菌性病原引起,尤其是严重肺炎.引起小儿呼吸道感染的常见细菌病原有肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、金黄色葡萄球菌,以及卡他莫拉菌、百日咳杆菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯杆菌、铜绿假单胞菌等.了解各种细菌的病原学特点及引发感染的机制,并给予及时、正确的治疗,对临床防治呼吸道感染具有重要意义.现就引起小儿呼吸道感染的几种常见细菌病原的临床特点、发病机制及其治疗进行阐述.