莱姆病螺旋体60kD抗原的基因克隆及表达

利用质粒ｐＡＴ１５３为载体，构建了莱姆螺旋体全细胞ＤＮＡ基因文库，用菌落原位固相酶斑法从文库中初选出一株表达６０ｋＤ抗原的克隆子，命名为ｐＬＷ２２７。经免疫印迹分析、核酸杂交、连续亚克隆分析，证明此重组菌株表达了莱姆螺旋体６０ｋＤ抗原，编码该抗原的基因表达单位为２．２ｋｂ或更小，位于莱姆螺旋体的染色体上。该抗原的表达为进一步研究莱姆病的致病机理打下了基础。     

中国莱姆病螺旋体流行菌株的蛋白分析

本文利用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ．ＤｏｔＥＬＩＳＡ等分子流行病学方法分析了２１株不同地区、不同来源的中国莱姆病螺旋体菌株的蛋白组成及单克隆抗体反应性。研究发现中国菌株主要蛋白呈现高度多态性和异质性，主要外膜蛋白ＯｓｐＡ、ＯｓｐＢ及ＰＣ蛋白有数种不同的表型，并呈现出紧密的相关性。所有的菌株均与单克隆抗体Ｈ９７２４（抗４１ＫＯ鞭毛抗原）呈阳性反应。除几株菌株外，绝大多数中国菌株均不与Ｈ６８３１（抗ＯｓｐＢ单克隆抗体）反应。中国菌株与单克隆抗体Ｈ５３３２（抗ＯｓｐＡ单克隆抗体）呈现不同的反应性，有强、弱和无反应等。根据中国菌株的蛋白组成及单克隆抗体反应性可大致将其分成三组，其中第Ⅰ组菌株具有与北美代表株Ｂ３１完全一致的蛋白组成及单克隆抗体反应性。第Ⅱ、Ⅲ组蛋白组成及单克隆抗体反应性更接近欧洲菌株。     

一株特殊莱姆病螺旋体的分子特征

对慢性脑膜炎病人胞脊液分离株Ｒ９的研究表明，该菌株除具有２８ｋＤＯｓｐＡ外，其它特征（包括质粒组成、限制性内切酶图谱和核酸杂交图谱）均与第Ⅱ组相同，其２８ｋＤＯｓｐＡ与第Ⅲ组菌株同样与单克隆抗体５３３２呈现弱反应。这些结果提示，２８ｋＤＯｓｐＡ可能是第Ⅱ组菌株所共有的３２ＫＤＯｓｐＡ变异所致；同时也提示，Ｂ，ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉ的抗原变异不仅在体外，而且可能发生在宿主体内。这种抗原的变异，可能与莱姆病的发生有关。     

我国莱姆病的流行病学和病原学研究

１９８７－１９９６年对２２个省市（市、区）的６０个县、区进行了莱姆病的调查研究。血清流行病学证实２２个省市（市、区）林区人群均存在莱姆病感染，感染率平均为５．０６％（１７２４／３４１０４）。病原学证实１７个省（市、区）存在莱姆病自然疫源地。１１个省（市、区）有典型病例存在。     

中国莱姆病螺旋体质粒分析

利用低浓度琼脂糖凝胶电泳、限制性内切酶消化及转印杂交等方法，分析不同地区与来源的21株中国莱姆病螺旋体菌株的质粒组成，并与北美菌株B31进行比较。中国菌株的质粒组成呈现明显的不均一性和多样性，且与北美代表株B31的质粒同源性较弱。质粒分析结果可将中国莱姆病螺旋体菌株分为3组，其中1组具有北美菌株的特征，较为少见；另2组较为多见，具有近似欧洲菌株的特征。