两种生物活性植骨材料对小鼠骨髓干细胞增殖和分化的影响

生长因子作用于拔牙后的牙槽窝,有可能阻止或减少牙槽骨的破坏吸收,从而维持牙槽骨原有的结构。为了奠定临床拔牙后、牙槽嵴位点保留的实验基础,本研究首先通过乳液交联法合成壳聚糖微球,负载生长因子BMP-2及脂联素(APN),再将其复合于小牛松质骨支架形成生物活性植骨材料。将两种生物活性材料与小鼠前成骨细胞(MC3T3-E1)共培养,比较材料对细胞增殖和分化的影响。结果表明,负载BMP-2的缓释微球表面更为光滑,微球平均直径为9.634μm。cck-8结果表明,随着BMP-2浓度的增加,细胞增殖速度较脂联素组增加更快。实时定量PCR结果表明,ALP、BMP-2、OCN和Adipor2基因在APN处理组增加倍数高于BMP-2组。Western-Blot结果表明,APN植骨材料更有利于小鼠前成骨细胞MC3T3-E1的增殖和分化。     

ETS1/2对非洲爪蛙胰腺发育的影响

目的：探讨ETS1/2对非洲爪蛙胚胎胰腺发育的影响。方法：设计并合成特异性抑制ETS1/2表达的反义吗啉代寡核苷酸(morpholino oligonueleitide,MO),通过显微注射的方法将MO转入爪蛙胚胎,利用整胚原位杂交和定量RT-PCR检测标志性基因的表达变化。结果：单独敲降ETS1或ETS2对爪蛙胚胎发育无明显影响,共同敲降ETS1/2后会使爪蛙胚胎发育异常,胰腺标志基因表达上升,肠道标志基因表达下降,肝脏和胃标志基因无明显变化;胰腺标志基因ngn3、igf1、foxa1的启动子区存在ETS1/2的结合位点。结论：单独敲降ETS1或ETS2对爪蛙胚胎发育无明显影响,敲降ETS1/2促进爪蛙胚胎胰腺发育,抑制肠道发育,对肝脏和胃的发育无明显影响。     

市售青风藤饮片的显微鉴别研究

目的对市售青风藤饮片进行显微鉴别。方法通过徒手切片,采用显微鉴别法对购自全国各地的91份青风藤饮片进行了鉴别。结果上述样品中有87份为正品,4份为混伪品,正品率为95.6%,说明青风藤的整体市场状况良好。4份混伪品的性状及显微特征与药典描述的青风藤不符,均被鉴定为萝藦科植物黑龙骨Periploca forrestii Schltr.的干燥藤茎。结论结果可为青风藤的临床用药和产品开发提供依据。     

过表达miR⁃155对斑马鱼胚胎发育的影响

目的：探讨过表达miR?155对斑马鱼胚胎发育的影响和机制。方法：利用qRT?PCR检测miR?155在斑马鱼胚胎发育各阶段的表达;通过显微注射的方法将miR?155 mimic转入斑马鱼胚胎,实现基因的过表达;利用qRT?PCR和Western blot方法检测过表达miR?155后发育相关标志性基因的表达变化;利用ETS1的mRNA对过表达miR?155的胚胎进行补救实验。结果：miR?155在胚胎发育时期均有表达,在器官形成期表达量明显增高;过表达miR?155导致斑马鱼胚胎发育迟缓、褪膜延迟、腹部及心包积液、尾部变短变粗,肝脏、小肠、心脏及肌肉发育相关标志性基因表达下调;ETS1能缓解过表达miR?155所致发育畸形。结论：过表达miR?155可能通过负向调控ETS1而影响斑马鱼胚胎肝脏、小肠、心脏及肌肉的发育。     

KLF7b对斑马鱼胚胎发育的影响

目的：探讨KLF7b对斑马鱼胚胎发育的影响。方法：体外转录野生型KLF7b mRNA、KLF7b 乙酰化位点突变体mRNA;设计合成特异性KLF7b反义吗啉代寡核苷酸（morpholino oligonueleitide,MO）;在1~2细胞期注射到斑马鱼胚胎体内以实现KLF7b的过表达、位点突变与敲降;观察胚胎表型并利用定量PCR检测发育相关基因的表达变化,钙黄绿素染色观察斑马鱼骨骼发育情况。结果：过表达KLF7b对斑马鱼胚胎的发育无明显影响;敲降KLF7b或注射乙酰化位点突变的KLF7b后,斑马鱼胚胎出现心包积液、体轴和头部发育的异常,肌肉发育标志基因表达下调。结论：KLF7b可通过乙酰化修饰影响斑马鱼的发育。     

一步一步做好美学临时修复

美学设计、美学表达和美学实现是口腔美学修复诊疗的3个阶段。临时修复体是美学表达的重要手段,是美学设计和美学实现的桥梁和纽带。临时修复体的功能包括美学诊断、功能诊断和软组织美学处理。本文重点讨论口腔美学修复中临时修复体的功能、类型和临床应用。     

自酸蚀粘接剂治疗牙颈部牙本质敏感症的临床研究

目的通过VAS（visual analogue scale）表评价两步法自酸蚀粘接荆Contax治疗牙颈部牙本质敏感症的有效性。方法从临床就诊病人中选择20例确诊为牙颈部牙本质敏感症的患者，用Contax进行脱敏治疗，在应用前后及应用之后的第2周，第4周，第8周和第12周相继进行敏感性测定并以VAS值记录临床测定结果，进行Friedman统计分析。结果统计结果显示，使用Contax前后及应用之后测得的vas值呈逐渐下降趋势，其差异有高度统计学意义（P〈0．01）。结论Contax可以作为一种牙本质脱敏荆有效地降低牙颈部牙本质敏感症状。     

HPLC法测定金莲花汤中绿原酸、咖啡酸、葛根素、牡荆素、迷迭香酸

目的 建立金莲花汤中绿原酸、咖啡酸、葛根素、牡荆素、迷迭香酸的HPLC含量测定方法,并对采用不同来源的药材制备的3批金莲花汤中的上述5种成分进行含量测定。方法 采用HPLC法,色谱柱为Synergi Polar-RP苯基C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm,4 μm）;流动相为1%乙酸（A）～乙腈（B）;洗脱程序（0～30 min,5%～14% B;30～40 min,14%～14% B;40～42 min,14%～19% B;42～60 min,19%～25% B;60～63 min,25%～5% B;63～64 min,5%～5% B）;柱温35℃;检测波长286 nm;进样量10 μL。结果 测定3批金莲花汤中绿原酸、咖啡酸、葛根素、牡荆素、迷迭香酸含量分别为：0.34、0.08、9.73、0.93、0.32 mg/g;0.13、0.03、8.37、0.33、0.21 mg/g;0.37、0.07、8.36、0.12、0.26 mg/g。结论 该方法精密度、稳定性、重复性良好,适用于金莲花汤中上述5种成分的含量测定;用不同来源的药材制备的金莲花汤中上述5种成分的含量存在差异,其中葛根素的含量最高。     

HPLC测定市售青风藤中青藤碱和木兰花碱含量

目的:建立青风藤中青藤碱和木兰花碱的含量测定方法,并用于评价市售青风藤的质量。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为Synergi Polar-RP苯基C18柱(250 mm×4. 6 mm,4"m),流动相为乙腈(B)-1%乙酸水溶液(A),梯度洗脱(0～15 min,10%→15%B; 15～17 min,15%→20%B; 17～22 min,20%→40%B; 22～30 min,40%→40%B),柱温为30℃;检测波长为280 nm,流速为1 m L·min-1。结果:本方法的精密度、准确度和重现性的RSD皆小于2%,青藤碱和木兰花碱在0. 01～0. 40 mg·m L-1线性关系良好;在测定的62批样品中,除了4批伪品之外,只有1批样品中青藤碱含量低于《中华人民共和国药典》要求,青藤碱和木兰花碱的含量分别为0. 236%～4. 735%和0. 256%～3. 682%。结论:本方法精密度、准确度和重现性良好,适用于青风藤中青藤碱和木兰花碱的含量测定;大多数市售青风藤的质量符合《中华人民共和国药典》要求,但主要成分青藤碱和木兰花碱的含量存在差异。     

基于分子对接技术的金莲花主要成分抗病毒和抗炎机制预测

目的利用分子对接技术预测金莲花中牡荆素、荭草素、牡荆素-2"-O-β-L-半乳糖苷、荭草素-2"-O-β-L-半乳糖苷、藜芦酸、金莲花碱的抗病毒和抗炎机制。方法运用Discovery Studio 2.5软件和药物化学数据库,将金莲花的6个活性成分与Toll样受体蛋白(TLRs)及神经氨酸酶(NA)靶点进行分子对接,通过模拟运算,分析对接结果及其功能区域的相互作用关系。结果牡荆素、荭草素、牡荆素-2"-O-β-L-半乳糖苷、藜芦酸、金莲花碱均作用于1种或多种TLR,而荭草素-2"-O-β-L-半乳糖苷与3种TLR均无相互作用;黄酮类化合物,即牡荆素、荭草素、牡荆素-2"-O-β-L-半乳糖苷、荭草素-2"-O-β-L-半乳糖苷均可与NA结合,而藜芦酸和金莲花碱与NA无相互作用。结论金莲花的6个活性成分中,5个成分可影响TLRs介导的信号通路,TLR3、4、7是其抗病毒抗炎作用的潜在靶点;4个黄酮类化合物可通过作用于NA而影响流感病毒活性。本研究可为探讨金莲花的抗病毒和抗炎有效成分及其进一步开发利用提供依据。