运用酵母双杂交系统筛选与埃博拉病毒GP、VP30、NP、L蛋白存在相互作用的宿主蛋白

目的 运用酵母双杂交技术从人肝cDNA文库中筛选出与埃博拉病毒(EBOV)GP、VP30、NP、L蛋白存在相互作用的宿主蛋白,用于研究GP、VP30、NP、L蛋白在EBOV传染病中的生物学功能.方法 利用重组PCR技术构建诱饵质粒pGBKT7-GP、pGBKT7-VP30、pGBKT7-NP、pGBKT7-L,将诱饵菌株与人肝cDNA文库菌株进行杂交筛选,对筛选到的阳性克隆进行DNA测序和生物信息学分析,然后再利用酵母回复性实验进一步验证,排除假阳性结果.结果 成功构建了诱饵质粒pGBKT7-GP、pGBKT7-VP30、pGBKT7-NP、pGBKT7-L,筛选出6个可能与GP、VP30、NP、L蛋白有相互作用的宿主蛋白,分别是COMMD1、ALB、PSMD8、APOA2、CYP2E1、HP.酵母回复性实验进一步说明了COMMD1和APOA2与NP蛋白可能存在相互作用.结论 酵母双杂交筛选出多个可能与EBOV的GP、VP30、NP、L蛋白存在相互作用的捕获蛋白,为研究EBOV的致病机制提供了参考.     

ROS影响有丝分裂时期细胞内线粒体的形态及分布

目的：利用稳定表达线粒体荧光信号的细胞系,检测活性氧（ reactive oxygen species,ROS）对有丝分裂时期细胞的线粒体形态及分布的影响。方法构建表达线粒体荧光信号的病毒表达载体,经测序鉴定和Western印迹检测正确后,通过病毒包装及感染的方法构建稳定表达线粒体荧光信号的HeLa s3细胞系HeLa s3-COX4tp-EGFP;进一步用免疫荧光法观察线粒体在ROS影响下形态及分布的变化。结果成功构建表达线粒体荧光信号的病毒表达载体及稳定细胞系,通过激光共聚焦显微镜观察,发现H2 O2处理能显著影响有丝分裂时期细胞线粒体的形态及分布。结论初步证明ROS可影响线粒体有丝分裂时期的形态及分布,为后续研究线粒体功能与细胞有丝分裂的调控奠定基础。     

直接数字X线摄影在尘肺病诊断中的应用价值

目的 探讨直接数字X线摄影(DR)在尘肺病诊断中的应用价值.方法 对随机抽取的298例接尘对象分批组织同期分别摄高仟伏和DR胸片,先由6名具有尘肺病诊断资质的医师随机均分甲、乙两组分别进行诊断,然后甲、乙两组合并阅片,使分组诊断不一致的结果得到统一.对DR和高仟伏两种胸片统一后诊断的胸片质量、小阴影的形态和大小、总体密集度、小阴影分布肺区数、尘肺分期等结果进行分析比较.结果 DR胸片质量等级集中在优片(97.99％),高仟伏胸片集中在良片(93.63％);DR胸片和高仟伏胸片小阴影的形态和大小、小阴影总体密集度、尘肺分期经一致性检验Kappa值分别为0.642、0.406、0.436,符合率分别为88.26％(263/298)、67.79％(202/298)、65.77％(196/298);小阴影分布肺区数在下肺区DR胸片明显多于高仟伏胸片.结论 DR胸片质量明显优于高仟伏胸片,可用于尘肺病的诊断.     

细胞色素氧化酶P450（CYP4F3A）的纯化及动力学研究

目的：纯化细胞色素氧化酶P450（CYP4F3A）以及测定酶促反应动力学参数。方法：应用免疫共沉淀技术纯化CYP4F3A酶,通过LTB4降解实验测定其米氏常数。结果：纯化的CYP4F3A浓度为0.12 mg/ml,Km=2.643±0.106μmol/L,Vmax=24.97±1.163 nmol/（min.nmol）。结论：获得从哺乳动物细胞中纯化的CYP4F3A具有较强LTB4降解活性,并通过测定其酶动力学常数,为研究CYP4F3A活性调节机制打下基础。     

铜陵有色金属（集团）公司尘肺发病规律及直接死因调查

铜陵有色金属（集团）公司是以矿山为基础的大型铜的采选、冶炼和加工联合企业，是我国有色金属工业八大重点基地之一。１９９６年在职职工２．８万人。主要产品有粗铜、电解铜、铜材、硫酸等。粉尘是其覆盖面最广、危害性最大的职业危害因素，４０．７４％的职工是接触粉...     

严重急性呼吸综合征患者恢复期血清的中和反应及抗体滴度变化

2002年11月以来，严重急性呼吸综合征(severe acute respiratory syndrome，SARS)，首先在广东省佛山市出现，迅速在全球30多个国家和地区传播，给人民的身体健康造成严重危害，在发病早期，大部分病例表现为家庭聚集性和医院聚集性。为进一步了解SARS家庭聚集病例的流行病学特点和探讨其恢复期血清的中和反应及抗体滴度变化，对14例SARS家庭聚集性患者进行连续8个月的追踪观察。     

翻译偶联对霍乱毒素A,B亚基比例表达的影响

目的：证实霍乱毒素操纵子Ａ,Ｂ基因间存在翻译联,解释霍乱毒素Ｂ亚基基因表达水平是Ａ亚基５倍的机理。方法;构建了适合翻译调控研究的报告质粒,通过在ｃｔｘＡ基因５’及３’端进行移码突变,研究突变对Ｂ亚基基因表达水平的影响。结果：建立合适的研究霍乱霉素基因翻译调控的系统,在ｃｔｘＡ基因的近Ｃ移码突变后,Ｂ基因的表达水平降低到１／５（８０％）。结论：霍乱霉素Ａ,Ｂ亚基基因间存在翻译联调控,这种调控是霍乱毒