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目的建立H5亚型禽流感病毒灭活疫苗中病毒核酸的特异、敏感、快速的定量检测方法,分析其与HI抗体效价之间的相关性。探索禽流感灭活疫苗效力体外检验的方法。方法选取H5亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)血凝素(hemagglutinin,HA)基因保守序列,使用Prinler Express 2.0软件设计了特异性引物和TaqMan MGB(minor groove binder)探针,利用实时荧光PCR技术来定量检测禽流感灭活疫苗,通过体外转录,制备含有选定检测序列的RNA标准品,绘制标准曲线。对50批H5亚型禽流感灭活疫苗进行了荧光定量PCR检测,测定了疫苗的HA基因拷贝数,同时测定了50批疫苗相应的HI抗体效价。进行了疫苗的HA基因拷贝数与HI抗体效价之间相关性的分析。结果该方法的灵敏度为10拷贝,反应,标准曲线的相关系数为0.998003,对H9亚型禽流感灭活疫苗和其他禽病疫苗无交叉反应,特异性好、重复性佳。疫苗的HA基因拷贝数与HI抗体效价不相关。结论荧光定量PCR方法为H5亚型禽流感病毒灭活疫苗检测提供了一种特异、敏感、快速的定量检测方法。 相似文献
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目的 为调查中国健康母猪体内猪链球菌的主要致病血清型分布和不同血清型猪链球菌的耐药性差异.方法 采集国内10个省市的健康母猪扁桃体并从中分离鉴定出猪链球菌421株,经与标准血清的凝集反应了解其主要致病血清型分布,并用微量肉汤法对不同血清型的猪链球菌进行耐药性检测,经统计分析了解小同血清型猪链球菌的耐药性差异.结果 健康母猪体内所分离猪链球菌的优势(致病)血清型依次为9、3和7型,所占比例分别为26.6%、23.5%和15.7%.在能分型的其他血清型中,猪链球菌2型所占的比例为7.4%;耐药性研究结果表明,不同血清型的猪链球菌对抗菌药物的耐药性不同,猪链球菌2型对所测12种药物的敏感性最强.结论 健康母猪体内猪链球菌的致病血清型分布结果再次证明猪链球菌是一种条件性致病菌,不同血清型的猪链球菌感染应根据抗生素敏感件测试结果选用不同的药物进行合理防治. 相似文献
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