结核分枝杆菌katG S315T突变频率及突变株特征的研究

近年来分子遗传学研究表明，异烟肼（INH）耐药机制复杂，涉及多个基因，至少包括katG、inhA、kasA以及ahpC等基因。研究表明，INH耐药与编码过氧化氢酶．过氧化物酶的katG基因突变的联系最强，其中katG基因的一种特定替换，315位密码子的AGC→ACC（Ser→Thr，或katG S315T）颠换报道最多。该突变可降低INH耐药菌株中过氧化氢酶活性，但可保持足够水平的该酶的过氧化物酶活性，后者为细菌解毒所必需。世界各地结核分枝杆菌菌株中，katG S315T突变的流行率一般为26．0％～93．6％，结核病高发区流行率高。在俄罗斯圣彼德堡地区，该突变还与耐多药性有关，在荷兰该突变亦与高水平耐药、耐其他药物有关。研究我国农村耐多药结核病（MDR-TB）高发地区INH耐药分离株中katG S315T突变的发生频率与突变株特征有利于耐药结核病的防治。     

苏北农村结核分枝杆菌临床分离株耐药特征分析

目的分析苏北农村结核分枝杆菌临床分离株的耐药现状和特点,为结核病防制提供依据。方法应用间接比例法药敏试验测定苏北两县2001年结核病人的初始分离株对异胭肼(INH)、利福平(RIF)、乙胺丁醇(EMB)和链霉素(STR)的敏感性。结果152株临床分离株的总耐药率为32.9%,初始耐药率和获得性耐药率分别为28.6%和48.5%;耐多药率为17.1%,初始和获得性耐多药率分别为16.0%和21.2%。同时耐INH和STR是最常见的耐两药或多药类型,其次是耐INH和RIF。四种抗结核药物的耐药率依次为INH(26.3%)、STR(24.3%)、RIF(18.4%)、EMB(10.5%)。RIF耐药株中,92.9%的同时耐INH。结论当地农村结核病耐药水平较高,耐药性的发生趋向于对多种药物同时耐药,RIF耐药可作为耐多药的标志。     

结核分枝杆菌可变数目串联重复基因分型

目的运用可变数目串联重复（VNTR）分型方法研究农村结核病研究现场的结核分杆菌分离株的分子特征,分析与VNTR优势基因型相关的因素.方法经PCR扩增各分离株的5种确切串联重复位点（ETR-A～ETR-E）.根据扩增产物大小,确定各串联重复单元的拷贝数,得出每个菌株的VNTR基因型.结果研究现场的101株菌株共分为37个不同的VNTR类型,22名病人分离株为单一基因型,79名病人的菌株分属于15个簇,VNTR42435类型占研究菌株总数的38.6%,但该基因型与卡介苗（BCG）接种耐4种一线药的相关性差异均无统计意学义.结论VNTR分型方法简单快速、分型结果数字化,可以把研究菌株分为不同的群.尚不能认为VNTR 42435的优势来自某些抗痨药和BCG接种.     

农村结核分枝杆菌临床分离株耐药谱分析

目的分析苏北农村结核分枝杆菌临床分离株的耐药类型特点,为结核病防治提供依据。方法应用间接比例法药敏试验测定苏北两县2001年结核病人的初始分离株对异胭肼(INH)、利福平(RIF)、乙胺丁醇(EMB)和链霉素(STR)的敏感性。结果152株临床分离株的总耐药率为32.9%,耐多药率为17.1%,同时耐INH和STR是最常见的耐两药或多药类型,其次是耐INH和RIF,RIF耐药株中,92.9%的同时耐INH。结论当地农村结核分枝杆菌临床分离株趋向于对多种抗痨药物同时耐药,RIF耐药可作为耐多药的标志。     

结核分枝杆菌rpoB基因突变的研究

目的 研究农村结核病人中利福平（RIF）耐药结核分枝杆菌（M．TB）临床分离株rpoB基因突变情况。为农村结核病防制提供分子遗传学依据。方法 以标准菌株H37Rv为对照，采用聚合酶链反应-单链构象多态性（PCR—SSCP）分析技术，对来自苏北2个县2001年的145株M．TB分离株（其中敏感株117株。耐RIF或含RIF耐多药株28株）的rpoB基因突变的发生率进行研究。结果 农村RIF耐药或含RIF耐多药M．TB临床分离株中rpoB基因突变的发生率平均为71．4％，所有受试117株敏感株rpoB基因均无突变。与药敏试验结果对比PCR—SSCP试验的灵敏度为71．4％；其特异度为100％。结论 M．TB耐RIF与rpoB基因突变密切相关，PCR—SSCP方法可检出RIF耐药M．TB的rpoB基因突变。有助于M．TB耐药性的快速检测和耐药性防治。     

苏北农村耐药结核病现状及影响因素的研究

目的 探讨农村耐药结核病的流行现状与可能的危险因素及保护因素。方法 对实施直接面视下短程化疗(DOTS)的苏北某项目县2002年全部结核病患者和某非项目县同期患者的一个样本进行问卷调查和痰菌培养,对新分离株进行比例法药敏试验,以单因素及多因素非条件logistic回归方法分析资料。结果 共有152例患者的药敏结果可以分析。其中32.9％的病例耐至少1种一线药,26.3％耐异胭肼(INH),18.4％耐利福平(RIF),17.1％同时耐INH和RIF。INH耐药和RIF耐药共同的独立危险因素是结核病治疗史和来自非项目县,而不重视自身健康和就医延误1个月以上的患者更可能耐RIF。耐多药(MDR)的独立预告因素包括:就医延误1个月以上(OR=4.66,95％CI:1.26～17.24)、来自非项目县(OR=3.01,95％CI:1.10～8.22)、不重视健康(OR=5.13,95％CI:1.06～24.90)和患有慢性病(OR=0.22,95％CI:0.05～0.87)。结论 当地农村耐药结核病疫情严重,耐药性主要与人为因素有关,但可能存在一定的传播。