福建省新报告经性传播男性HIV感染者的流行特征

目的了解福建省2015年新报告的经性传播男性HIV感染者的流行病学特征,为AIDS防治提供参考。方法以2015年新报告经性传播1 060例男性HIV感染者为研究对象,开展个案调查并统计分析。结果 1 060例中同性性传播者470例、异性性传播者590例。同性性传播患者以未婚为主(62.3%),≥大专学历者居多(35.5%),有异性性行为接触史51.9%,与异性性传播的患者比较,在年龄、婚姻、户籍、文化程度和性行为接触史上差异均有统计学意义;同性性传播和异性性传播患者在近3个月性行为时安全套坚持每次使用率分别为19.3%和19.7%。结论经不同性传播途径感染HIV的男性患者,在部分流行病学特征上存在差异,且安全套使用率均较低。应开展有针对性的健康教育和行为干预策略,采取有效措施提高性行为时安全套使用率。     

福建省艾滋病患者抗病毒疗效和耐药性检测分析

目的 了解我省艾滋病患者的抗病毒疗效与基因耐药性突变发生情况,为抗病毒治疗提供依据.方法 采集我省25例接受抗病毒治疗的艾滋病患者外周静脉抗凝全血进行CD4 T淋巴细胞计数,分离血浆进行HIV病毒载量检测,并提取血浆标本中HIV RNA,用RT-PCR方法扩增HIV pol区蛋白酶基因全序列与部分逆转录酶序列.所得扩增片段进行序列测定后,数据运用Contig Express编辑校正后上传至斯坦福大学HIV耐药数据库进行比对,同时运用Bio-Edit、Clustal和Mega等软件进行系统发生分析.结果 本研究中的17例(68%)患者的病毒载量在1 000cp/ml以下,其中40%(10例)降至检测限之下.RT-PCR获得10例患者的扩增片段.对其序列亚型测试结果表明:7例属于HIV-1 AE亚型,2例HIV-1 B亚型,1例为HIV-1 D亚型;耐药性分析表明:10份序列对PI(蛋白酶抑制剂)药物均表现为敏感,8份序列对NRTI(核苷类逆转录酶抑制剂)及NNRTI(非核苷类逆转录酶抑制剂)表现出至少对3种药物高度耐药,最常见的突变位点为G190A、K103N和M184V,造成对NVP、3TC的高度耐药.结论 目前我省艾滋病患者的抗病毒治疗取得预期效果.随着治疗时间延长,患者免疫功能也逐渐恢复,但耐药性突变发生种类和数量有所增加,出现对现有各类一线药物不同程度的耐药.为保证可持续性治疗策略的施行,需加强对抗病毒治疗患者的依从性教育,同时加强耐药性监测,及时评估治疗失败者耐药性情况,必要时提供二线药品,减少我省HIV病毒耐药株的产生与传播,保障抗病毒治疗的有效进行.     

多引物嵌套式聚合酶链反应在艾滋病病毒感染诊断中的应用

目的 评价多引物嵌套式聚合酶链反应(Nested-PCR)在艾滋病病毒(HIV)感染诊断中的应用。方法 采用柱离心式小量组织/细胞基因组脱氧核糖核酸(DNA)抽提试剂盒提取DNA。用3套分别来自于长末湍重复序列(LTR)-gag、pol、env不同区域的序列引物进行嵌套式PCR扩增。结果 用多引物嵌套式PCR对28例不同来源标本进行检测,其中13例为HIV感染者,4例为HIV可疑感染者,4例为人嗜T淋巴细胞病毒(HTLV)感染者且HIV抗体检测为阴性,7例为正常者。经过检测每一套引物均漏检了1份标本,即每一套引物敏感性均为92.3％。HTLV标本经检测均为HIV阴性。根据判断标准,该检测方法敏感性和特异性均达到100％,最低检测线达到103外周血单核细胞(PBMC)。结论 多引物嵌套式PCR具有高敏感性及特异性,在鉴定HTV感染方面有重要的意义.可作为蛋白印迹试验的补充和辅助诊断。     

基于In-fusion技术的高通量HIV表型耐药检测系统的建立及应用研究

目的 构建基于In-fusion技术的高通量新型HIV表型耐药检测系统,用于临床表型耐药检测。方法 扩增LacZ基因,插入并替换原骨架质粒pLWJ-SV40-Luc中耐药检测片段构建新的骨架质粒pLWJ-SV40-Luc-LacZ,利用In-fusion定向克隆技术,将耐药检测片段插入到改造后的骨架质粒中构建耐药检测载体(RTV),并与膜蛋白表达质粒VSV-G共转染293T细胞产生HIV假病毒,在药物干预下,通过检测感染细胞中Luc+表达量来反应其对药物的敏感性。结果 成功引入蓝白斑筛选改造出新的骨架质粒pLWJ-SV40-Luc-LacZ。36例临床检测样本成功扩增出30例,利用In-fusion无缝连接技术成功构建26例RTV,其中21株产生的假病毒具有活性。药物敏感性实验结果显示所得的假病毒表型耐药检测结果与基因型耐药解释结果完全一致。结论 成功构建出基于In-fusion技术的高通量新型HIV表型耐药检测系统,可应用于临床耐药检测,以指导临床抗病毒治疗。     

福建省HIV-1 新近感染者流行毒株基因亚型及其流行特征分析

目的 了解福建省HIV-1 新近感染者流行毒株的亚型分布和流行特征。方法 随机抽取福建省2011－2012 年使用BED捕获酶免疫试验检出的104 例新近感染者血样标本,采用反转录巢式PCR扩增,gag、pol 和env 基因片段,并测定和分析核酸序列。结果 目标人群中存在B亚型和01_AE、07_BC、08_BC、55_01B 四种流行重组型,其中以01_AE 和07_BC 流行重组型为主,分别占45.68%和35.80%。基因亚型的流行特征分析显示,亚型分布中01_AE 所占比例下降,07_BC 所占比例上升;性传播是主要感染途径,其中同性传播比例明显上升。结论 福建省HIV-1 流行毒株亚型分布众多,随着时间推移,亚型构成和传播途径已发生改变,应加强对HIV-1感染的分子流行病学趋势动态监测。     

福建省艾滋病抗病毒治疗患者生存时间影响因素分析

目的了解福建省艾滋病病毒(HIV)感染者/艾滋病(AIDS)患者接受抗病毒治疗后生存时间的影响因素,为进一步改善患者的生存状况,提高抗病毒治疗工作质量提供参考依据。方法利用国家统一的中国疾病预防控制系统艾滋病综合防治信息系统中福建省治疗数据信息,使用SPSS 15.0进行相关分析。通过筛选,本次研究共纳入1 061例患者,死于AIDS相关疾病66例(6.22%)。结果 Cox比例风险模型分析结果表明,基线CD4+T淋巴细胞计数<200、基线时患者有持续或间断发热影响患者抗病毒治疗后生存时间。结论结合抗病毒治疗生存时间影响因素分析,在疾病早期符合抗病毒治疗标准时尽早开始治疗对患者生存预后有益。     

云南省1999年HIV/AIDS监测报告

目的摸清云南省HIV感染的流行势态.方法哨点监测、现患调查、常规监测和献血员筛查结果的综合分析.结果(1)新报告感染州1个、县8个,至今全省16个地州、市,111个县、市均报告感染,感染以静脉吸毒、男性、汉族、农民和无业为主,15～49岁占98.5%.(2)首次检出1例男性同性恋感染者.(3)全省哨点监测各类人群的HIV感染率分别为静脉吸毒波动于2.6%～75.0%之间,全省平均感染率为27.8%(335/1 204),比1998年的24.4%上升了13.9%,潞西为47.1%,比1998年上升了125.4%;卖淫人群的平均感染率为2.2%(19/847),男性性病病人为1.8%(53/2951),孕产妇为0.2%(14/6417),与1998年比均无显著性差异,但昆明市皮防院哨点嫖娼人群为1.1%(1/95),比1998年的0.3%(1/325)上升了266.7%,保山性病哨点的男性性病病人感染率为4.1%,比1998年的1.0%上升了310%;瑞丽无关联人群的HIV感染率为1.4%(11/800),比1998年上升了1 300%,比历史最高的1995年(0.8%)上升了75%.(4)献血员检出率为0.01%.结论 HIV感染已在我省普遍播散,静脉吸毒仍为我省主要流行因素,且平均感染率仍呈上升趋势,性传播以及孕产妇的HIV平均感染率与1998年比无显著性差异,但值得注意的是HIV感染在静脉吸毒高流行区瑞丽的无关联人群中已超过了1%,昆明市皮防院哨点嫖娼人群,保山男性性病病人的HIV感染率与1998年比有明显上升.     

人类免疫缺陷病毒假病毒检测系统的构建

目的构建人类免疫缺陷病毒(HIV)感染性克隆并在此基础上建立携带荧光素酶基因(Luc+)的HIV假病毒感染系统。方法利用长片段PCR技术分别扩增福建省HIV分离株LWJ前后半长基因序列,以pCR-XL-TOPO为载体构建HIV感染性克隆pLWJ。将Luc+表达基因片段替换感染性克隆pLWJ中部分env区序列,从而构建出携带Luc+基因的报告基因病毒载体pLWJ-SV40-Luc+。将报告基因病毒载体和膜蛋白表达质粒VSV-G共转染293T细胞,获得携带Luc+基因的HIV假病毒。将HIV假病毒感染293T细胞,利用化学发光法检测感染细胞中Luc+相对荧光单位(RLU)。结果以HIV感染性克隆pLWJ为基础,构建出携带荧光素酶基因的VSV-G/HIV假病毒感染系统,其所产生的VSV-G/HIV假病毒仅有单轮感染活性,被感染细胞中报告基因的表达水平与加入病毒量呈剂量依赖性关系。结论成功建立具有单轮感染活性的VSV-G/HIV假病毒检测系统,为开展HIV相关基础研究提供一个技术平台。     

异源双链泳动分析法在人类免疫缺陷病毒1基因亚型分析中的应用

目的 运用异源双链泳动分析法（HMA）进行人类免疫缺陷病毒1（human immunodeficiency virus-1,HIV-1)基因亚型分析。了解福建省HIV-1亚型的流行情况。方法 收集细胞培养中HIV-1感染的外周血单个核细胞（PBMC），聚合酶链反应（PCR）扩增HIV-1膜蛋白基因（env)区的核酸片段，与标准亚型的对照质粒的PCR产物进行杂交，形成异源双链二聚体，根据其在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的泳动率确定其亚型，并进一步对标本进行序列测定和系统树分析，结果 15份标本中，80.00%为E亚型，6.67%为B亚型，2份不能确定其亚型，比较异源双链泳动法和序列测定法的结果，显示两种分析方法对HIV-1病毒基因分型有较高的一致性，其亚型一致率为86.67%。结论 福建省流行的HIV-1毒株以E亚型为主，亚型分析5法具有快速，简便，经济和高特异性的特点，可用作对HIV流行毒株进行长期监测的重要手段。     

双抗原夹心法ELISA在肾综合征出血热诊断中的应用

目的建立一种敏感、特异的检测肾综合征出血热(HFRS)血清总抗体的双抗原夹心法ELISA。方法应用重组汉坦病毒(HV)NP抗原e1.3S作为包被抗原和e6-119-HRP作为酶标抗原建立双抗原夹心法ELISA,检测血清总抗体,并与间接免疫荧光法(IFA)相比较。结果共检测188份人血清和378份鼠血清标本,2种方法的总符合率为97.70%。以IFA为参照标准,双抗原夹心法ELISA的敏感性为97.54%,特异性为97.87%。结论双抗原夹心法ELISA检测HFRS血清总抗体具有很高的敏感性和特异性,适用于大规模的流行病学调查。