UPLC-MS结合网络药理学及实验验证罗欧咳祖帕对哮喘气道重塑的作用

目的 基于超高效液相色谱-质谱联用（UPLC-MS）、网络药理学及实验验证探讨罗欧咳祖帕干预哮喘气道重塑的作用研究。方法 基于UPLC-MS指认罗欧咳祖帕中化学成分信息；借助中药系统药理学数据库和分析平台（TCMSP）的口服利用度（OB）和类药性（DL）、SwissADEM的Lipinski五规则及查阅文献筛选罗欧咳祖帕潜在有效成分；通过SwissTargetPrediction数据库筛选罗欧咳祖帕的成分靶点；利用在线人类孟德尔遗传目录（OMIM）、GeneCards、DrugBank及DisGeNET数据库获取哮喘气道重塑的相关靶点；利用STRING数据库对主要靶点进行蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）分析，通过DAVID数据库进行基因本体（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析；最后构建卵蛋白（OVA）诱导小鼠建立哮喘气道重塑模型，采用苏木素-伊红（HE）染色、过碘酸雪夫染色（PAS）染色、马松（Masson）染色观察肺组织病理情况，检测小鼠肺泡灌洗液（BALF）中炎症细胞，并用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测小鼠肺组织中蛋白的表达水平，进一步验证关键的信号通路。结果 UPLC-MS检测负离子模式下82个成分，正离子模式下74个成分；通过网络药理学研究共得到罗欧咳祖帕36个候选成分和578个预测靶点，并得到与哮喘气道重塑共同靶点173个，包括癸二酸、柳穿鱼黄素、柚皮素、芹菜素等关键化合物和蛋白激酶B1（Akt1）、低氧诱导因子1α重组蛋白（HIF1A）等潜在的作用靶点；KEGG富集分析预测罗欧咳祖帕主要通过磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）、HIF-1α、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）等信号通路发挥抗哮喘气道重塑作用；动物实验表明，复方可减少哮喘小鼠气道杯状细胞增生，改善气道上皮下胶原沉积情况，降低小鼠因OVA致敏激发而上调的磷酸化（p）-Akt/Akt、HIF-1α的相对表达水平（P<0.05，P<0.01），与网络药理学结果相符。结论 采用UPLC-MS结合网络药理学的方法，初步明确了罗欧咳祖帕的化学组成及其干预哮喘气道重塑的潜在作用机制，罗欧咳祖帕可能通过以Akt1、HIF-1α为代表的核心靶点及以PI3K/Akt、HIF-1α通路为代表的多通路，起到协同干预哮喘气道重塑的作用，为罗欧咳祖帕后续进一步研究提供思路。     

正交试验优化神香草中的迷迭香酸和蒙花苷提取工艺

目的 优化神香草中的迷迭香酸和蒙花苷提取条件,确定最佳的提取工艺。方法 在单因素试验的基础上,采用超声法提取神香草中的迷迭香酸和蒙花苷,选取提取溶剂、料液比、提取时间、提取次数为主要考察因素,采用L9(34)正交试验对迷迭香酸和蒙花苷提取工艺进行优化。结果 确定最佳提取条件,平行操作3次,神香草中迷迭香酸和蒙花苷的最佳提取工艺为提取溶剂为60%甲醇、料液比为1∶20、提取时间为20 min、提取次数为1次。结论 该方法操作便捷、快速,适用于神香草中的迷迭香酸和蒙花苷的提取。     

儿童咽拭子标本406份中EB病毒的检测及其基因型鉴定

目的了解湖南省株洲、湘潭和衡阳地区儿童鼻咽部EB病毒的感染状况及其基因型,为EB病毒的治疗、预防和临床检验提供指导。方法从株洲、湘潭和衡阳部分医院收集疑似EB病毒感染的儿童咽拭子标本406份,采用荧光定量聚合酶联反应（FQ—PCR）检测标本中的EB病毒-DNA;阳性标本分别用特异性引物从中扩增3个目的基因片段,其中PCR扩增的EBNA-3C片段直接电泳以分析1／2分型,BamHI片段和BamHI WI／I1交界区基因片段采用PCR-RFLP分析鉴定F／f和C／D分型,测序和Blast比对验汪分型结果。结果从406份标本中共检出 EB病毒-DNA阳性株159份,株洲74份（38．5％）,其中1型72份（97．3％）,2型2份（2．7％）;湘潭42份（38．9％）,1型40份（95．2％）,2型2份（4．8％）;衡阳43份（40．6％）,1型43份（100％）,2型未发现、从159份阳性株中随机扩增了73份做F／f分型,68份做C／D分型,共检测到F型73份,C型68份,3个地区均未检测到f型和D型。结论株洲,湘潭和衡阳儿童鼻咽部EB病毒感染的检出率分别为38．5％,38．9％,40．6％,且其主要感染的3种独立基因型以1、C、F型为主,3个地区间儿童鼻咽部EB病毒-DNA的检出率及其基因型的差异无统计学意义。     

社区老年人衰弱状态的过渡及其恶化影响因素分析的前瞻性研究

目的 探讨社区老年人衰弱状态的过渡情况,以及衰弱状态恶化的影响因素。方法 在四川省都江堰市平义社区建立≥ 65岁老年人队列,分别于2014年1月和2017年1月进行面对面问卷调查,内容包括衰弱状态、认知功能、营养状况和功能状态等。采用二元logistic回归分析衰弱状态恶化的影响因素。结果 2014年1月调查了653名老年人,2017年1月进行随访,146名失访,共对507名老年人进行分析。基线调查时衰弱和衰弱前期的患病率分别为11.2%（57人）和26.2%（133人）。3年后,205名（40.4%）老年人衰弱状态恶化,276名（54.5%）老年人保持不变,26名（5.1%）老年人衰弱状态改善。在校正基线衰弱状态后,失能（OR=8.27,95% CI：1.62~42.26）、视力障碍（OR=2.02,95% CI：1.27~3.22）、认知功能障碍（OR=1.94,95% CI：1.08~3.48）、自评健康状态差（OR=1.89,95% CI：1.07~3.31）、慢性疼痛（OR=1.57,95% CI：1.03~2.40）和年龄（OR=1.12,95% CI：1.08~1.17）是衰弱状态恶化的危险因素;而超重是衰弱状态恶化的保护因素（OR=0.54,95% CI：0.34~0.85）。结论 衰弱是一种动态综合征,失能、视力障碍、认知功能障碍、自评健康状态差、慢性疼痛和年龄是衰弱状态恶化的独立危险因素,而超重是其保护因素。     

衰弱综合征对社区老年糖尿病患者跌倒影响的队列研究

目的 探讨衰弱综合征与社区老年糖尿病患者跌倒之间的关系。方法 在都江堰市平义社区建立≥ 65岁老年人队列,分别于2014年1月和2017年1月进行问卷调查,包括自报糖尿病、跌倒、衰弱状态、认知功能和营养状况等。采用多因素logistic回归方法分析基线衰弱水平与随后3年内跌倒发生风险之间的关系。结果 653名老年人接受了第一次调查,473人完成第二次调查。糖尿病的患病率为13.3%,糖尿病合并衰弱综合征老年人的跌倒发生率为62.5%。衰弱综合征是非糖尿病老年人（OR=3.87,95%CI：1.45~10.28）发生跌倒的独立危险因素,且对糖尿病老年人（OR=6.68,95%CI：1.14~38.99）的影响更强。结论 衰弱综合征是老年糖尿病患者未来发生跌倒的强烈预测因子,需要早期发现和干预。