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目的 建立一种快速、特异、灵敏的SARS冠状病毒(SARS CoV)核酸检测方法。方法 根据GenBank中SARS CoV基因序列,自行设计引物、荧光探针,在PE 770 0扩增仪上探讨工作参数,形成试剂盒,并用研制的试剂检测76份临床SARS样本。结果 简套式荧光RT PCR方法对血清样本、漱口液样本、正常人样本检出率分别为33.3% (12 36 )、6 7.5 % (2 7 4 0 )、0 (0 / 16 0 ) ,与经典套式检测结果一致。而传统一步法荧光RT PCR对样本的检出率分别为13 9% (5 36 )、5 2 5 % (2 1 4 0 )、0 (0 / 80 )。结论 简套式荧光RT PCR核酸检测法是SARS临床早期诊断快速、特异、灵敏的方法。 相似文献
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目的:探讨用核酸扩增(PCR)-液相杂交法检测沙眼衣原体DNA的效果。方法:用PCR-液相杂交法对616份临床标本进行了沙眼衣原体检测,并与培养法比较,对与培养法结果不相符合的标本及部分阴性标本进行连接酶链反应(LCR)复检。结果:PCR-液相杂交相法检测沙眼衣原体特异性良好。灵敏度达到0.1fg,临床标本沙眼衣原体DNA阳性检出率为27.6%,显著高于培养法的6.3%(P<0.001)。以培养法为标准,此法的灵敏度为100%。以LCR法为标准,此法的灵敏度为97.2%,特异度为80.7%,2者具有较好的相符性。结论:PCR-液相杂交法检测沙眼衣原体DNA操作简便,特异性强,灵敏度高,适合临床应用。 相似文献
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目的 建立一种逆转录PCR-核酸探针杂交法对柯萨奇B组病毒(CVB1~6)进行分型诊断。方法 一对通用PCR引物,它能有效扩增所有CVB1-6型的特异性DNA片段;另选取6条各型特异性寡核苷酸探针,将它们分别共价结合在不同的微孔板上。经过一次PCR扩增,扩增后的产物分别与包被有不同探针的微孔板进行杂交检测,从而有效鉴别CVB各型。结果 本法与ELISA法的分型比较显示它们具有很好的一致性,无错误分型。对152例IgM抗体阳性标本的检测,该方法阳性率为71.7%。结论 本法可准确对CVB进行分型,为CVB的临床诊断及流行病学调查提供了一种有效的方法。 相似文献
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目的:观察亲环素A(CyPA)在非小细胞肺癌(NSCLC)癌组织中的分布和表达,探讨其在NSCLC发生发展中的临床意义.方法:应用组织芯片免疫组织化学技术,检测45例NSCLC手术患者切除的肺癌组织,22例相应的癌旁组织,33例相应的正常肺组织中CyPA的蛋白表达水平,分析其与NSCLC分期、病理等临床特征的关系.结果:CyPA在NSCLC癌组织和癌旁组织中表现为高表达水平,与相应的肺正常组织中CyPA的表达有显著性差异(P<0.05);CyPA的表达水平与NSCLC患者的细胞分化程度、病理分型均无明显关系.结论:CyPA在NSCLC中的高表达,提示其可能是NSCLC的发生发展中的生物特征之一,其作用及机制有待进一步研究. 相似文献
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目的了解郑州市居民的死亡原因及水平,为积极有效的开展疾病预防控制措施提供科学依据。方法利用2011年死因登记报告系统数据和公安局提供的人口资料,对郑州市居民的主要死因进行统计分析。结果 2011年郑州市居民粗死亡率为456.06/10万,标化死亡率为429.30/10万。前5位主要死因分别为心脏病(116.50/10万)、脑血管疾病(100.09/10万)、恶性肿瘤(92.59/10万)、呼吸系统疾病(41.65/10万)、伤害(33.91/10万)。结论慢性非传染性疾病是危害我市居民健康的主要死因,另外,机动车辆交通事故是伤害和中毒的第一位死因,因此,道路安全防控工作迫在眉睫。 相似文献
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内标荧光定量PCR技术在乙型肝炎病毒定量中的应用 总被引:5,自引:0,他引:5
目的 建立内标荧光定量PCR技术检测乙型肝炎病毒 (HBV)DNA ,以避免PCR扩增过程中可能出现的假阴性或部分抑制。方法 在TaqMan荧光探针杂交PCR技术检测HBV载量的基础上 ,结合内标参照的方法指示PCR的扩增效率。结果本检测方法具有很好的特异性、重复性 ,检测敏感度达到 1× 10 3 copies/ml。经过对 382例乙肝患者标本测定证实 ,标志物为HBsAg( )、HBeAg( )、抗HBc( )的血清检出率为 10 0 % ,标志物为HBsAg( )、抗HBe( )、抗HBc( )的血清检出率为 72 .0 % ,与Roche试剂比较 ,两者的相关系数为 0 .987。结论 本法快速、简便、特异性好、能指示病毒感染程度。 相似文献
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含SARS CoV RNA病毒样颗粒的构建和表达 总被引:3,自引:1,他引:2
目的:构建并表达含有SARS冠状病毒RNA片断的抗核糖核酸酶的病毒样颗粒.方法:通过克隆大肠杆菌噬菌体MS2的装配蛋白和壳蛋白基因以及SARS冠状病毒RNA聚合酶基因片段,将这些基因连接到载体 pTrc99a上表达,并进行纯化、定量分析、RT-PCR检测和稳定性试验. 结果: 获得病毒样核蛋白颗粒,在37℃稳定性可达到30 d,能抵抗核糖核酸酶降解. 结论: 该病毒样核蛋白颗粒稳定、安全、可靠,可作为SARS冠状病毒RT-PCR检测、定量分析的有效阳性参考品. 相似文献