河南省人民医院门诊患者戊型病毒性肝炎的阳性率调查

目的 通过检测部分门诊病例血清的戊型肝炎病毒标志物（HEV IgG）,简要描述本地区的戊型病毒性肝炎的感染水平.方法 收集河南省人民医院内科门诊病例血清415份,应用万泰公司的戊型病毒性肝炎诊断试剂盒进行ELISA检测,检测结果进行统计学分析,对不同分组进行x2检验.结果 415例门诊病例的HEV阳性率为21.93％,在性别间、年龄分组间,差异有统计学意义,而在城乡间的差别无统计学意义.结论 我市的戊型病毒性肝炎阳性率处于全国HEV感染率的平均水平,成人的HEV阳性率显著性高于青少年.在低年龄阶段进行有效的疫苗接种,可以控制戊型病毒性肝炎在我省的流行.     

抗肠道病毒EV71型外壳蛋白VP1单克隆抗体的制备和鉴定

目的 制备具有中和活性的抗肠道病毒EV71型外壳蛋白VP1的单克隆抗体.方法 人工合成SP55和SP70(分别包含VP1的第163-177,208-222位氨基酸)两段VP1的多肽,分别免疫BALB/c小鼠,常规杂交瘤技术进行细胞融合,用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)筛选阳性杂交瘤细胞并测定效价.用分泌的单抗和EV71病毒在RD细胞上进行中和试验以检验其中和活性.结果 得到2株能稳定分泌抗肠道病毒EV71型VP1蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,2株单抗的中和效价分别为1:8和1:16.结论 成功制备出2株具有中和活性的抗肠道病毒EV71型VP1蛋白单克隆抗体,为其下一步应用打下基础.     

重组风疹病毒外膜蛋白E1的表达及其在血清学中的初步应用

目的 在大肠埃希菌中表达重组风疹病毒外膜蛋白E1,用其作为包被抗原,建立一种用于诊断风疹病毒感染的ELISA检测方法 .方法 通过基因重组的方式构建表达质粒并在大肠埃希菌中表达风疹病毒外膜蛋白E1,蛋白纯化后作为包被抗原,用ELISA的方法 检测世界卫生组织(WHO)的风疹检测质控血清以及来自广西桂林的未知血清样本.结果 采用WHO用于风疹检测的质控血清对所表达的重组抗原的抗原性进行鉴定,通过试验,特异性、敏感性均为100%.用表达的抗原对来自我国广西的200份未知血清样本进行风疹病毒外膜蛋白抗体的检测,阳性率为93%,与文献报道的我国其他地区风疹病毒抗体阳性率基本一致.结论 通过实验我们表达了具有良好抗原性的风疹病毒外膜蛋白E1,为进一步研究风疹病毒感染的实验室诊断技术奠定了基础.     

黑龙江省农垦地区肾综合征出血热病人血清型研究

黑龙江省农垦地区肾综合征出血热病人血清型研究余陶，王华，郑之峰，张淑贤，翁景清，卢德威，王福兴，朱智勇，陈化新目前国内应用血凝抑制试验（ＨＩ）方法，对肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）病人血清型研究虽有许多报道［１，２］，但对黑龙江省农垦地区近年病人血清型研...     

丙型肝炎病毒亚单位融合蛋白的表达及免疫原性测定

目的获得高纯度的丙型肝炎亚单位融合蛋白并评价其免疫原性。方法利用原核表达系统,以pET—11d作为载体,在大肠埃希菌BL21（DE3）中经IPTG诱导表达获得融合蛋白,之后采用DEAE阴离子交换和镍离子柱亲和层析进行纯化。通过Western Blot验证融合蛋白的抗原活性。同时以该蛋白免疫实验动物后测定血清中的抗体滴度。结果成功获得很高纯度的丙型肝炎亚单位融合蛋白,EIA显示融合蛋白能够诱生出高滴度的抗体。结论原核表达系统表达的丙型肝炎病毒亚单位融合蛋白具有较强的免疫原性,为丙型肝炎病毒治疗性和预防性疫苗的研制提供了一条新的途径。     

西藏林芝地区肾综合征出血热自然疫源地血清流行病学调查

目的：查明西藏林芝地区是否存在肾综合征出血热（HFRS）自然疫源地。方法：选择有疫情报告地区,进行人间疫情调查;健康人群特异性抗体检测;在山地针,阔叶混合林及山间平原的农田和居民区,用夹夜法调查小兽数量;采集捕获动物肺,血和牛,羊血清标本,检测汉坦病毒感染情况,血标本用金标免疫斑点渗滤试验和间接免疫荧光法检测抗体;动物肺的冷冻切片用免疫荧光法检测汉坦病毒抗原。结果：在西藏自然区防疫站疫情资料中,有该病记载的1976年工布江达县1例,1980年林芝县9例,检测林芝地区医院住院者18人,西藏高考学生357人和其他体检人员117人血标本,仅从2名林芝县,2名工布江达县,1名察隅县的高考学生和1名住院产妇中检出抗汉坦病毒总体抗和IgG荧光抗体,被检人群隐性感染率为1．22％,检测中华姬鼠等脊椎动物肺115只,汉坦病毒抗原阳性的中华鼠1只,带病毒率0．87％,动物血抗汉坦病毒总体和IgG荧光抗体皆阳性的有中华姬鼠5只,高山田鼠1只,抗体阳性为5．22％,检测扣,羊310只血清,其中黄牛抗汉坦坦病毒总抗体阳性率0．85％（1／118）,绵羊总抗体和IgG抗体阳性率1．68％（3／179）,结论：西藏林芝地区有HFRS散发病例,健康人群,中华姬鼠,高山田鼠,黄牛和绵羊中有汉坦病毒感染,证实了林芝县山地针,阔叶混合林及山间平原地带和工布江达县境域内存在着HFRS自然疫源地。     

乙型肝炎重组酵母疫苗接种6～9年的人群免疫效果研究

目的评价新生儿乙肝重组酵母疫苗普种预防HBV感染的免疫效果,探讨乙肝重组酵母疫苗免疫持久性。方法采用出生队列定群研究结合横断面调查的方法,研究乙肝重组酵母疫苗免疫人群的效果;用固相放射免疫分析法检测HBV感染标志。结果(1)HBsAg平均阳性率1.9%(95%CI 1.4~2.4%),总保护性抗体阳性率为53.2%(95%CI 51.2%~55.2%)。(2)从免疫后1年的88.2%下降到免疫后9年的44.3%。(3)疫苗保护率为89.9%,与2000年的数据比较无显著性差异。结论新生儿普种乙肝疫苗可有效预防HBV感染,免疫人群乙肝保护性抗体水平随接种年限延长呈下降趋势,但疫苗保护效果仍然稳定。     

五种国产酶免疫测定法乙型肝炎病毒表面抗原检测试剂的评价

目的为全国人群乙型病毒性肝炎（乙肝）血清流行病学调查,筛选适宜的乙肝病毒表面抗原（Hepatitis B Virus Surface Antigen,HBsAg）检测试剂。方法选择符合国家质量标准,且在全国销量最大的五种（A、B、C、D、E）酶免疫测定法HBsAg检测试剂,平行检测由63份阳性和90份阴性品组成的参比系统各5次,将每个检测的s/n值做log（s/n＋1）转换,计算并比较各试剂的可靠性指标组内相关系数（Intraclass Correlation Coefficient,ICC）、变异系数（Coefficient of Variability,CV）和真实性指标受试者工作特征（Receiver Operating Characteristic,ROC）曲线下面积（Area Under Curve,AUC）、部分（partial）ROC AUC（pAUC）、固定特异度下灵敏度[Sensitivity at a Fixed Specificity,Se（FPR=e）]等。结果五种试剂ICC、CV从优到劣的排位顺序均为E、C、D、B、A,且差异有统计学意义（Bootstrap法,P〈0.05）;五种试剂的AUC均在0.965～0.987,pAUC最大的试剂E、B明显高于最小的试剂A、D（Bootstrap法,P〈0.05）;Se（FPR=e）最高的试剂E明显高于试剂C（Bootstrap法,P〈0.05）。结论五种试剂均有较强的诊断能力,其中试剂E为最佳。     

四种乙肝病毒表面抗原ELISA诊断试剂的评价

目的 对四种国内乙肝病毒表面抗原诊断试剂进行评价。方法 用四种试剂分别对标准品和未知血清进行检测，用几种常用诊断试验评价方法对检测结果进行分析和比较。结果 四种试剂对标准血清的检测结果较好，A、B两种试剂的总符合率为100％，另两种的总符合率也在90％以上，其中B试剂有较好的精密性。δ值比较显示A和B两种试剂有较好的诊断特性。四种试剂在一定的抗原浓度范围内都有良好的线性关系。针对于未知样本的检测中，四种试剂与采用电发光法的罗氏诊断试剂有较好的一致性。结论 国内主要厂家的HBsAg ELISA诊断试剂具有较高的检测效能。在实际工作中，可以通过常用的诊断试剂筛选实验，经统计分析后筛选出较高效能诊断试剂用于检测。     

抗-HBs定量方法的改进

目的 通过对系列已知浓度标准品的检测来间接进行血样抗-HBs的定量,比较两种计算方法的准确程度,从而选出适合本实验室的抗-HBs定量方法.方法 用RIA法检测抗-HBs系列已知浓度标准品,将测定结果与对应的浓度分别用log-log模型和指数曲线模型拟合得到标准曲线方程,比较两种曲线拟合的效果.再将对标定浓度质控品的测定值分别代入上述两种模型的曲线方程计算出质控品的浓度,比较两种计算方法定量结果的准确程度.结果 指数曲线模型的误差均方较小,为1.2971;而且确定系数R~2为0.9904,接近1.通过两种曲线方程计算的标定浓度(30.0 mIU/ml)、质控品平均浓度(n=6)分别为(32.28±1.06)和(31.91±1.06)mIU/ml,用指数曲线模型计算的浓度与标定浓度相比仅偏高6.37%.结论 用指数曲线模型拟合能够更好地估算待检样品的实际浓度,可作为本实验室抗-HBs的一种改进定量方法.