布鲁氏菌微滴式数字PCR方法的建立与应用

目的 建立可对布鲁氏菌准确定量的微滴式数字PCR(Droplet digital PCR,ddPCR)方法。方法 使用以布鲁氏菌bscp31基因为靶标的引物和探针,摸索最佳的引物和探针工作浓度,确定反应体系和扩增条件,评价所建立方法的灵敏性、特异性及对疫情相关血液标本的检测效果。结果 ddPCR反应体系中最佳引物和探针浓度分别为0.8 μmol/L和0.4 μmol/L;最佳扩增条件:95 ℃ 10 min;95 ℃ 30 s,60 ℃ 1 min,循环40次;98 ℃酶失活10 min。布鲁氏菌核酸DNA为0.96 ng/反应~3.68 fg/反应时,ddPCR检出靶标基因拷贝数为2.00×10⁵拷贝/反应~1拷贝/反应,ddPCR测得值的对数值与DNA浓度的对数值有线性关系。在疫情相关血液标本DNA的检测中,ddPCR阳性率远高于培养法和试管凝集法;16份人血液标本中靶标基因浓度为5~65拷贝/mL血液(平均29拷贝/mL血液),5份羊血液标本中靶标基因浓度为25~245拷贝/mL血液(平均98拷贝/mL血液)。结论 ddPCR灵敏性高,可检测微量核酸DNA,适合临床血液标本的检测以及布病病原体的分子流行病学调查。     

济南市腹泻患者沙门氏菌PFGE分子分型及耐药特征研究

目的 对2017-2020年济南市哨点医院腹泻患者中分离到的沙门氏菌进行病原学分析,了解济南市腹泻患者沙门氏菌的血清型分布特征、分子分型特征及耐药情况。方法 分别利用血清检测试剂盒和脉冲场凝胶电泳技术(PFGE)对来自济南市各医院腹泻门诊病人的的90株沙门氏菌进行血清分型和分子分型分析,酶切电泳图谱导入BioNumerics软件进行聚类分析;利用微量肉汤稀释法对40株沙门氏菌进行耐药性检测。结果 90株沙门氏菌可分为27个血清型,鼠伤寒沙门氏菌和肠炎沙门氏菌为优势血清型,分别占总数的47.78%和17.78%。PFGE电泳后产生的带型具有多态性,以鼠伤寒沙门氏菌和肠炎沙门氏菌的带型最为集中;药敏结果显示,沙门氏菌对氨苄西林耐药率最高,为72.50%,多重耐药率达67.50%。结论 济南地区沙门氏菌具有血清型多样化和遗传多样性特征,对抗生素的高耐药和多重耐药现象严重,应加强济南地区耐药检测。     

山东农村511名高中生伤害的现况调查

目的 调查高中生伤害的情况、危险因素及其影响，为制定高中生伤害的预防措施提供依据。方法 以整群抽样的方法在山东省利津县某高中9个班的511名高中生中进行调查和描述性分析。结果 在过去一年里所调查的高中生8种伤害(车祸、中毒、跌落、烧烫伤、电击伤、钝／锐器伤、动物昆虫叮咬伤、溺水)的总发生率为15．5％，男、女生发生率分别为18．5％、11．9％。发生率最高的前4位伤害依次是跌落伤(7．6％)、中毒(4．3％)、车辆伤(3．3％)和钝／锐器伤(3.1％)。家中常发生中毒、烧烫伤，学校常发生跌落伤和钝／锐器伤。平均每人次伤害花费最大的是车辆伤，其次为跌落伤；平均影响学习时间最长的是车辆伤，其次为烧烫伤和跌落伤。伤害发生率在性别和父亲健康状况上有显著性差异。结论 针对不同伤害特点采取相应预防措施，以降低伤害发生率，促进青少年健康，减少社会健康损失和经济损失。     

2022年7月中国大陆需关注的突发公共卫生事件风险评估

  目的  评估2022年7月在我国大陆地区发生或者可能由境外输入的突发公共卫生事件风险。  方法  根据国内外突发公共卫生事件报告及重点传染病监测等各种资料和部门通报信息，采用专家会商法，并通过视频会议形式邀请省（自治区、直辖市）疾病预防控制中心专家参与评估。  结果  预计2022年7月的突发公共卫生事件报告数可能较6月略有下降，仍以传染病事件为主。 全国新型冠状病毒肺炎疫情总体呈低水平波动态势，局部地区仍有小幅波动且有新增疫情省份，当前全国疫情防控形势依然严峻、复杂，仍面临本土疫情传播扩散和输入导致的本土传播风险；各地需按照国家总体要求高效做好统筹疫情防控和经济社会发展。 当前处于霍乱易于传播季节，预计7月霍乱感染概率增大。 近期南方流感活动水平远超过2019年以来同期水平，以A（H3N2）亚型为优势流行株，7月上旬后流感聚集性疫情可能会逐渐下降。 每年7—8月为高温中暑发生和死亡的高发期，预计7月将维持较高水平。  结论  对新型冠状病毒肺炎予以特别关注，对霍乱、流感和高温中暑予以一般关注。     

FilmArray GⅠ Panel在腹泻病原体检测中的应用

  目的  探讨FilmArray Gastrointestinal（GⅠ）Panel在腹泻病原体检测中的应用价值。  方法  收集2016年1－9月无锡市人民医院（含儿童医院）肠道门诊就诊病例粪便标本152份，分别采用FilmArray GⅠ Panel及real-time PCR进行检测，对两种方法检测结果进行比较。  结果  FilmArray GⅠ Panel共检出19种病原体，阳性检出率为75.00%（114/152）；real-time PCR共检出17种病原体，阳性检出率为68.42%（104/152）。 两种方法检测结果符合率67.76%（103/152）。 对腺病毒F组40/41、EIEC（Enteroinvasive E. coli , EIEC）、弯曲菌和蓝氏贾第鞭毛虫，检测结果符合率100.00%；对札如病毒、肠集聚性大肠埃希菌（Enteroaggregative E.coli, EAEC）、艰难梭菌、沙门菌和霍乱弧菌，检测结果符合率为98.03%、94.08%、96.71%、94.08%和98.68%，检测结果一致性中等（Kappa值为0.563、0.546、0.651、0.610、0.744）；对诺如病毒GⅠ/GⅡ、A组轮状病毒、肠产毒性大肠埃希菌（Enterotoxigenic E. coli, ETEC）、肠致病性大肠埃希菌（Enteropathogenic E.coli, EPEC）、类志贺邻单胞菌和副溶血性弧菌，检测结果符合率为98.03%、99.34%、97.37%、92.76%、99.34%、98.68%，检测结果一致性较好（Kappa值为0.892、0.971、0.890、0.764、0.944、0.902），经χ2检验分析，FilmArray GⅠ Panel对EAEC、ETEC、EPEC、艰难梭菌和沙门菌检出率高于real-time PCR，差异有统计学意义（P<0.05）。  结论  与real-time PCR相比，FilmArray检测具有快速、准确、高通量等特点，可用于突发公共卫生事件的快速检测及腹泻病的快速诊断。     

2022年8月中国大陆需关注的突发公共卫生事件风险评估

  目的  评估2022年8月在我国大陆地区发生或者可能由境外输入的突发公共卫生事件风险。  方法  根据国内外突发公共卫生事件报告及重点传染病监测等各种资料和部门通报信息，采用专家会商法，并通过视频会议形式邀请省（自治区、直辖市）疾病预防控制中心专家参与评估。  结果  总体上，预计2022年8月的突发公共卫生事件报告数可能与7月相近，仍以传染病事件为主。 全国新型冠状病毒肺炎疫情受近期BA.5输入及本土续发疫情影响，存在局部地区聚集性疫情及疫情外溢到其他地区的风险，疫情防控形势严峻复杂。 各地要按照国家总体要求高效统筹疫情防控和经济社会发展。 预计8月霍乱感染风险增加，存在后续出现散发及局部地区聚集疫情风险。猴痘在全球传播风险为中等，需关注经入境人员输入疫情及其续发风险。 多国报告儿童不明原因急性肝炎疫情，需要跟踪相关监测信息和研究进展。  结论  对新型冠状病毒肺炎予以特别关注，对霍乱、猴痘予以一般关注。     

脉冲场凝胶电泳和多位点串联重复序列分析 应用于中国鼠伤寒沙门菌分型能力的评价

目的 比较脉冲场凝胶电泳(PFGE)和两种国际多位点串联重复序列分析(MLVA)分型方法用于我国鼠伤寒沙门菌分子分型的能力,并初步确定适用于我国鼠伤寒沙门菌MLVA分型中的VNTR位点。 方法 根据国际PulseNet公布的沙门菌PFGE分型方案、MLVA分型方案(包含7个VNTR位点,简称MLVA_PN)及欧洲食源性疾病监测网公布的鼠伤寒沙门菌MLVA分型方案(包含5个VNTR位点, 简称MLVA_EU),对来自我国5个省(直辖市)的175株鼠伤寒沙门菌进行分子分型分析,并结合流行病学资料,评价这三种分型方法对我国分离的鼠伤寒沙门菌的分型能力。 结果 175株鼠伤寒沙门菌经XbaⅠ酶切,PFGE后,获得56种带型,其分辨能力(D值)为0.8823。对其中的主优势带型JPXX01.CN0001菌株55株进一步用第二种内切酶BlnⅠ酶切后,获得6种带型。用MLVA_EU分型,获得96种型别,D值为0.9758。应用MLVA_PN分析,获得98种型别, D值为0.9763。 两种MLVA分型方法对菌株的分辨能力几乎相同,且分型结果具有较高的一致性。对流行病学调查显示为鼠伤寒沙门菌暴发患者和食物来源的菌株进行PFGE双酶切及MLVA分型,三种分型方法获得一致性结果,均显示这些菌株具有明显的聚集性。 结论 两种MLVA分型方法的分辨能力均高于PFGE,在确认鼠伤寒沙门菌引起的暴发事件时,采用需时较短,操作更方便的5个VNTR位点的MLVA分型方法可满足菌株聚集性分析。     

应用脉冲场凝胶电泳技术对江西省霍乱暴发和常规监测菌株的分析

为了解江西省霍乱弧菌流行菌株的分子分型特征，分析爆发性流行和环境与食品监测菌株的特征及相关性，我们运用脉冲场凝胶电泳（PFGE）方法对江西省2004年部分O1群、0139群霍乱弧菌分离株进行了分子流行病学研究。     

玉溪市5岁以下儿童急性腹泻病原菌监测结果分析

目的了解云南省玉溪市5岁以下急性腹泻病例的致病菌病原谱及其季节变化规律,为完善腹泻病防制策略提供依据。方法在云南省玉溪市开展了为期1年的腹泻病监测,综合运用分离培养和核酸检测方法对腹泻病例粪便标本进行肠道致病菌多病原检测。结果共对382名急性腹泻患儿进行了调查和采样,共分离到常见肠道致病菌51株(致泻性大肠杆菌26株,志贺菌9株,沙门菌8株,气单胞菌8株),致病菌总检出率为13.4%。夏季(5—7月)肠道致病菌检出率为38.9%,高于冬季(11月—次年1月)的7.3%,农村病例的检出率(17.6%)高于城区病例(7.7%)。2岁以上儿童的检出率(31.8%)高于2岁以内儿童(10.9%)。粪便标本的阳性率(23.1%)高于肛门拭子(6.0%)。结论致泻性大肠杆菌、志贺菌、沙门菌和气单胞菌是玉溪市5岁以下腹泻儿童的主要病原菌。     

2005年中国El Tor霍乱弧菌流行优势菌株分子特征分析

目的研究2005年中国霍乱弧菌流行优势菌株的分子特征。方法使用脉冲场凝胶电泳对菌株进行聚类分析，使用PCR和序列测定的方法对特异片段进行扩增和序列分析的研究。 结果2005年中国霍乱弧菌流行优势菌株的脉冲场凝胶电泳图谱高度一致并且不同于以往分离的菌株；这些菌株的VSPⅡ（IVibrio/I seventh pandemic island-Ⅱ）区域有相同的由插入序列的插入导致的基因缺失。 结论2005年霍乱弧菌流行优势菌株是一种首次报道的、由VSP-Ⅱ突变菌株引起流行的菌型，其扩散能力较强，应该在今后霍乱的监测中引起注意。