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1.
目的优化和改进质粒提取方法,以提高质粒的提取效率,增加其在哺乳动物细胞中的表达效率。方法分别在室温条件和4℃条件提取质粒,并将细菌裂解、过柱和洗脱3个过程分解在两种温度下提取质粒;使用紫外分光光度计和琼脂糖凝胶电泳分别检测质粒浓度和超螺旋形式;将质粒转染哺乳动物细胞,使用荧光显微镜和Western blot检测荧光蛋白的表达水平。结果低温进行质粒提取能够显著提高质粒提取效率(P0.05),并显著提高其在哺乳动物细胞中的表达效率(P0.01)。质粒提取的3个步骤:细菌裂解、过柱和洗脱均对温度敏感,从而影响质粒的得率和在哺乳动物细胞中的表达效率。结论成功获得一种简单易行的提高质粒得率和在哺乳动物细胞中表达效率的质粒提取方法。 相似文献
2.
目的探讨膝关节后内侧入路支撑钢板内固定治疗胫骨后侧平台骨折的手术技巧及手术治疗效果。方法对15例胫骨后侧平台骨折采用取膝关节后内侧倒L形切口入路切开复位支撑钢板内固定手术治疗。结果 15例均获随访6~48个月,平均15.5个月。末次随访时膝关节功能HSS评分:优10例,良4例,可1例。结论膝关节后内侧入路支撑钢板内固定胫骨后侧平台骨折简便有效、安全,该入路是手术治疗胫骨后侧平台骨折的有效路径。 相似文献
3.
目的 研究Ⅲ类去乙酰化酶Sirt1对人慢性粒系白血病K562细胞耐药性的影响及其机制。方法 分别将酶活性缺失突变型Sirt1(H363Y)和Sirt1 shRNA的表达质粒转染K562细胞后,用G418筛选出稳定表达酶活性缺失突变型Sirt1或 Sirt1 shRNA的K562细胞。用H2O2和 etoposide处理筛选出来的稳定细胞株,Western Blot检测凋亡标志物caspase3的剪切及Bax的表达,同时检测DNA损伤的标志物H2A.X磷酸化;在MCF-7和293A中过表达野生型Sirt1,检测H2O2和 etoposide处理后H2A.X的磷酸化。结果 在K562细胞中,酶活性缺失突变型Sirt1(H363Y)的表达和Sirt1的干扰均能促进H2O2和 etoposide诱导的caspase3的剪切及Bax的表达并同时显著抑制H2O2和 etoposide诱导的H2A.X磷酸化;在MCF-7和293A细胞中,野生型Sirt1的过表达能明显增强H2O2和 etoposide诱导的H2A.X的磷酸化。结论 Sirt1能保护K562细胞对抗DNA损伤药物诱导的凋亡,增强DNA损伤修复的信号。 相似文献
4.
我们发现马利兰能增加贫血恒河猴γ珠蛋白基因的表达,因而能使胎儿血红蛋白(HbF)的含量升高。将该药试用于两例重型β地中海贫血患儿(患儿2介于重型与中间型之间)。患儿1治疗前血红蛋白(Hb)2.5g%左右,输血一次Hb达4.2g%,HbF42.1%。用药一个疗程HbF逐渐升高达79.6%;Hb在第50天开始上升,于第68天(以第一疗程首次给药为第一天)达6.5g%;以后渐降,到第209天为4.7g%;Hb高于输血后水平约5个月。患儿2治疗前Hb7.4g%,HbF73.1%,用药一个疗程HbF升至 相似文献
5.
刘德培 《中国生物医学工程学报》2008,27(1):160-160
我很高兴借此机会,向在过去的2007年中为我刊审稿的专家们表示感谢。正是因为这些专家慷慨地奉献了他们的学识和时间,才使我刊论文的学术质量在得到保证的同时不断提高。专家们花费了自己大量的宝贵时间和精力,不求回报,为我刊的论文在学术上把关。我谨代表中国生物医学工程学会和《中国生物医学工程学报》编委会向这些审稿专家表达我们深深的谢意!他们是: 相似文献
6.
目的 研究人工血管旁路术后远端吻合口局部内膜增生的形态学表现、部分炎症因子及生长因子的表达及药物巴曲酶对其的影响.方法 建立12只犬左颈总动脉膨体聚四氟乙烯(eVrrE)人工血管旁路移植模型,随机分为巴曲酶组和对照组,28 d后吻合口局部取材,应用HE、Masson染色、免疫组化(IHC)、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫印迹(Western Blot)等实验方法 观察吻合口内膜厚度、胞外基质(ECM)相对含量、新生内膜平滑肌细胞增殖率及单核细胞趋化蛋白.1(MCP-1)、血小板源牛长因子B(PDGF-B)mRNA和蛋白表达,并用半定量方法 比较两组间的差异.结果 术后28d,远端吻合口均已形成有内皮细胞(EC)覆盖的新生内膜,且均表达MCP-1及PDGF.B.实验组与对照组相比,其吻合口新生内膜厚度明显减少[(381.3±144.7)μm对(213.8±29.0)μm,P=0.036],胞外基质相对含量明显降低(P=0.006),MCP-1表达量明显下降(RT-PCR P=0.025,Western Blot P=0.016),而PDGF-B表达量差异无统计学意义(RT-PCR P=0.055,WesternBlot P=0.337),平滑肌细胞增殖率无明显差异(P=0.109).结论 巴曲酶可抑制人工血管旁路术后早期吻合口新生内膜胞外基质的沉积和MCP-1的表达,抑制新生内膜厚度,为提高人工血管移植远期通畅率提供新的临床应用及研究思路. 相似文献
7.
与时俱进在新的起点上使科研管理上一个新台阶 总被引:1,自引:1,他引:0
刘德培 《中华医学科研管理杂志》2002,15(4):196-196
各位领导、各位来宾、各位代表、同志们 :2 0 0 2年中国医学科学院科研管理研讨会暨中华医学会医学科研管理学分会中国医学科学院学组第六届学术年会在这里召开了。请允许我代表中国医学科学院、中国协和医科大学祝这次大会取得圆满成功 !我代表院校热烈欢迎到会的各位领导和兄弟院校的领导 !对各位领导在医学科研和各方面工作中对院校的支持和帮助 ,谨致以衷心的感谢 !科学研究是我们现代生活中非常重要的组成部分 ,它体现了与时俱进的特色 ,江主席的“三个代表”是我们的指导思想。大家知道 ,“三个代表”在我们医学科学界有着非常明确、… 相似文献
8.
9.
异型血红蛋白(Hb)是迄今研究得较多的一种遗传性分子病.全世界目前发现并作出一级结构鉴定的异型Hb近四百种.本文就其一级结构研究方法的进展作一简述.Clegg 在鉴定Hb Chesapeake和HbJ(Bangkok)的结构变异时,总结了异型Hb一级结构测定方法的程序如下:①、比较异型Hb与已知结构Hb的电泳行为;②、纯化异型Hb;③、鉴定异常肽链;④、分离α-和β-链;⑤、从异常肽链的酶解产物中分离异常肽段;⑥、鉴定异常肽段中的氨基酸取代. 相似文献
10.