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1.
目的 基于核酸试纸条技术,建立一种快速检测蜡样芽胞杆菌entFM毒素基因的方法。 方法 煮沸法提取蜡样芽胞杆菌DNA,以蜡样芽胞杆菌entFM毒素基因作为靶基因,采用NCBI primer-BLAST 5.0软件设计特异性引物并通过克隆转化鉴定PCR产物,建立并组装核酸试纸条,评价核酸试纸条的特异性、灵敏度和稳定性。 结果 蜡样芽胞杆菌DNA浓度为300 mg?L-1,纯度约为1.60。PCR产物阳性条带经切胶回收、克隆转化和测序比对,与GenBank数据库中已登记的entFM相似性为100%。在pH值7.0条件下,每100 μL 胶体金溶液加入3.3 μg链霉亲和素浓度标记,质控线浓度为1.8 g?L-1,检测线浓度为1 g?L-1时,硝酸纤维素膜上质控线与检测线均可与PCR产物反应出现清晰的红色条带。按照最适条件组装成核酸试纸条,PCR产物6 μL,样品展开液100 μL,检测10 min后可观察结果。核酸试纸条特异性与电泳结果一致,仅蜡样芽胞杆菌为阳性结果,与金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞杆菌、大肠埃希菌和沙门氏菌皆无交叉反应,为阴性结果;灵敏度检测,核酸试纸条DNA质量浓度同时降至10-3 mg?L-1仍可准确检测,普通PCR电泳结果显示DNA质量浓度同时降至10-1 mg?L-1出现目的条带,核酸试纸条比普通PCR灵敏度提高100倍;稳定性检测,核酸试纸条在第6、9和12个月进行检测稳定性一致。 结论 建立的核酸试纸条检测蜡样芽胞杆菌entFM毒素基因灵敏度高、特异性强且具有良好稳定性,适用于快速鉴别蜡样芽胞杆菌entFM毒素基因。  相似文献   
2.
《Vaccine》2022,40(30):4038-4045
PurposeAs protection from COVID-19 following two doses of the BNT162b2 vaccine showed a time dependent waning, a third (booster) dose was administrated. This study aims to compare the antibody response following the third dose versus the second and to evaluate post-booster seroconversion.MethodsA prospective observational study conducted in Maccabi Healthcare Services. Serial SARS-CoV-2 Spike IgG tests, 1,2,3 and 6 months following the second vaccine dose and one month following the third were obtained. Neutralizing antibody levels were measured in a subset of participants. Per individual SARS-CoV-2 Spike IgG titer ratios were calculated one month after the booster administration compared to titers one month following the second dose and prior to booster.ResultsAmong 110 participants, 56 (51%) were women. Mean age was 61.7 ± 1.9 years and 66 (60%) were immunocompromised. One month after third dose, IgG titers were induced 7.83 (95 %CI 5.25–11.67) folds and 2.40 (95 %CI 1.90–3.03) folds compared to one month after the second, in the immunocompromised and immunocompetent groups, respectively. Of the 17 immunocompromised participants who were seronegative after the second dose, 4 (24%) became seropositive following the third. Comparing the titers prior to the third dose, an increase of 50.7 (95 %CI 32.5–79.1) fold in the immunocompromised group and 25.7 (95 %CI 19.1–34.7) fold in and immunocompetent group, was observed.ConclusionA third BNT162b2 vaccine elicited robust humoral response, superior to the response observed following the second, among immunocompetent and immunocompromised individuals.  相似文献   
3.
4.
目的:观察肾康注射液联合青霉素与替米沙坦治疗肾小球肾炎合并急性间质性肾炎患者的效果。方法:选取134例肾小球肾炎合并急性间质性肾炎患者为研究对象,按随机数字表法将其分成观察组与对照组各67例。对照组给予青霉素联合替米沙坦治疗,观察组在对照组基础上加用肾康注射液治疗,比较两组临床疗效、治疗前后肾功能指标[血管内皮生长因子(VEGF)、胱抑素C(CysC)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)]水平和不良反应发生率。结果:观察组治疗总有效率为97.01%(65/67),明显高于对照组的85.07%(57/67),差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,观察组VEGF、CysC和MCP-1水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:肾康注射液联合青霉素与替米沙坦治疗肾小球肾炎合并急性间质性肾炎患者可提高治疗总有效率,降低肾功能指标水平,其效果优于青霉素联合替米沙坦治疗。  相似文献   
5.
IntroductionAlthough hyperferritinemia may reflect the inflammatory status of patients with non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD), approximately 33% of hyperferritinemia cases reflect real hepatic iron overload.AimTo evaluate a non-invasive method for assessing mild iron overload in patients with NAFLD using 3T magnetic resonance imaging (MRI) relaxometry, serum hepcidin, and the expression of ferritin subunits.MethodsThis cross-sectional study assessed patients with biopsy-proven NAFLD. MRI relaxometry was performed using a 3T scanner in all patients, and the results were compared with iron content determined by liver biopsy. Ferritin, hepcidin, and ferritin subunits were assessed and classified according to ferritin levels and to siderosis identified by liver biopsy.ResultsA total of 67 patients with NAFLD were included in the study. MRI revealed mild iron overload in all patients (sensitivity, 73.5%; specificity, 70%). For mild (grade 1) siderosis, the transverse relaxation rate (R2*) threshold was 58.9 s?1 and the mean value was 72.5 s?1 (SD, 33.9), while for grades 2/3 it was 88.2 s?1 (SD, 31.9) (p < 0.001). The hepcidin threshold for siderosis was > 30.2 ng/mL (sensitivity, 87%; specificity, 82%). Ferritin H and ferritin L subunits were expressed similarly in patients with NAFLD, regardless of siderosis. There were no significant differences in laboratory test results between the groups, including glucose parameters and liver function tests.ConclusionsMRI relaxometry and serum hepcidin accurately assessed mild iron overload in patients with dysmetabolic iron overload syndrome.  相似文献   
6.
目的 探讨耳穴贴压对腹部术后胃肠功能紊乱家兔模型的作用机制,为耳穴贴压治疗腹部术后胃肠功能紊乱提供参考。 方法 将30只SD清洁型家兔采用随机数字表法分为空白组、模型组、耳穴组各10只。耳穴组于造模成功后耳穴贴压胃、大肠、耳中穴,每日按压3次,每次每穴30 s,连续干预7 d;模型组进行造模手术未进行耳穴贴压;空白组不给予任何处理。 结果 耳穴组术后首次排便时间及肠鸣音恢复时间显著早于模型组(均P<0.05)。三组术后6 h、3 d及7 d血清皮质醇浓度的干预效应、时间效应、交互效应显著,模型组及耳穴组术后6 h及3 d血清皮质醇浓度显著高于空白组,且术后3 d耳穴组显著低于模型组(均P<0.05)。干预后,三组小肠推进率、C-kit蛋白阳性表达、iNOS活性有显著差异,其中耳穴组、空白组小肠推进率、C-kit蛋白阳性表达显著高于模型组,但iNOS活性显著低于模型组,耳穴组的C-kit蛋白阳性表达显著低于空白组(均P<0.05)。 结论 耳穴贴压可缩短腹部术后家兔首次排便及肠鸣音恢复时间,降低血清皮质醇浓度及应激反应,有助于提升小肠推进率及结肠组织中C-kit蛋白阳性表达,促进腹部术后胃肠蠕动恢复。  相似文献   
7.
目的 探究DNA聚合酶η(POLH)对过氧化氢(H2O2)诱导的晶状体上皮细胞氧化应激和凋亡的防御机制。方法 以年龄相关性白内障患者的晶状体前囊膜组织和H2O2处理的晶状体上皮细胞系SRA01/04为研究对象,分别通过RT-PCR和免疫印迹实验验证POLH的表达并筛选H2O2最佳作用浓度用于后续实验,将培养的SRA01/04细胞分为H2O2组、H2O2+HA组和H2O2+OV-POLH组,采用RT-PCR和免疫印迹实验检测POLH mRNA和蛋白表达情况,免疫荧光法检测DNA氧化损伤标志物以及TUNEL实验检测细胞凋亡变化,免疫印迹实验检测细胞中BAX、BCL-2、Nrf2和Keap1蛋白表达。结果 RT-PCR结果显示,与透明晶状体前囊膜(1.00±0.22)相比,年龄相关性白内障患者晶状体前囊膜组织中POLH mRNA相对表达量明显下降(0.38±0.62)(P<0.000 1)。RT-PCR和免疫印迹实验均显示,200 μmol·L-1 H2O2处理的SRA01/04细胞中POLH表达量最低;TUNEL实验检测结果显示, 200 μmol·L-1 H2O2处理后细胞的凋亡明显增加。RT-PCR和免疫印迹实验结果显示,与H2O2组和H2O2+HA组相比,H2O2+OV-POLH组SRA01/04细胞中POLH表达量显著升高(P<0.000 1)。免疫荧光染色结果显示,与H2O2+HA组相比,H2O2+OV-POLH组细胞的γH2A染色明显下降。免疫印迹实验检测结果显示,与H2O2组和H2O2+HA组相比,H2O2+OV-POLH组细胞促凋亡蛋白BAX表达量明显下降,而抑凋亡蛋白BCL-2表达量明显升高(均为P<0.01);与H2O2组和H2O2+HA组相比,H2O2+OV-POLH组细胞Keap1蛋白水平明显下降,而转录调控蛋白Nrf2表达明显升高(均为P<0.01)。结论 过表达POLH可通过增强DNA损伤修复功能抑制H2O2诱导的晶状体上皮细胞凋亡,其抑制氧化应激机制可能与Nrf2-Keap1-ARE通路有关。  相似文献   
8.
An ovine iliac vein thrombosis model was devised to test a wall-contacting rotational thrombectomy device. Thrombosis was successfully induced in 9 sheep with an average clot length of 31 mm ± 12 and >60% vessel occlusion on angiography. The thrombus was subsequently removed, maintaining normal intraoperative pulmonary arterial pressure (5.9 mm Hg ± 3.6) and complete distal reperfusion after thrombectomy. Additionally, the sheep were without signs of vascular trauma or embolic complications on gross necropsy and histopathologic analysis. The findings from this study support the use of an ovine iliac deep vein thrombosis model for testing of a lower extremity thrombectomy device.  相似文献   
9.
10.
 目的 建立一种简单,快速的重组酶聚合酶核酸扩增技术检测鼠疫耶尔森氏菌的方法。方法 基于耶尔森氏菌的特异性序列设计引物及探针;通过对不同温度的检测来优化反应温度;通过对不同菌株的DNA模板进行检测评价该方法的特异性;通过对不同稀释浓度的样本DNA模板进行检测来确定灵敏性;通过模拟样品进行应用评价。结果 基于鼠疫耶尔森菌的DNA腺嘌呤甲基化酶基因设计特异性引物和探针所建立的荧光重组酶聚合酶扩增方法,35 ℃反应20 min内可成功检出低至100个拷贝的鼠疫耶尔森菌基因,而且与其他菌无交叉反应,对模拟样品的检测准确性达到98.0%。结论 重组酶聚合酶核酸扩增可广泛应用于简陋条件下鼠疫耶尔森菌的临床检测,促进鼠疫的防控。  相似文献   
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