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1.
氧化苦参碱对四氯化碳损伤大鼠肝细胞的保护作用   总被引:13,自引:0,他引:13  
目的 :研究氧化苦参碱对肝细胞的保护作用。方法 :采用原代肝细胞培养的方法 ,选用CCl430mmol/L制备肝损伤模型 ,同时加以不同浓度的氧化苦参碱以保护肝细胞 ,培养 12h后以MTT法测细胞存活率 ,并测定培养基中AST、ALT、LDH。结果 :氧化苦参碱对肝细胞的保护呈剂量依赖性 ,氧化苦参碱组细胞存活率明显高于CCl4损伤组 (98.3% /3.2 % ,P <0 .0 5 ) ;其AST、ALT、LDH较CCl4损伤组明显降低 (依次为 6 .13± 0 .4 4 /896 .87±13.2 3、2 1.5± 0 .76 /15 0 2 .13± 35 .80、19.5± 0 .6 8/2 87.38± 5 .79,均P <0 .0 5 )。结论 :氧化苦参碱对CCl4损伤的肝细胞具较好的保护作用 ,存在最佳剂量性关系。  相似文献
2.
新生大鼠心肌细胞分离与原代培养   总被引:11,自引:0,他引:11  
目的 应用酶消化法消化心肌组织、培养心肌细胞.方法 0.1%的胰蛋白酶重复消化乳鼠心肌组织多次,收集的细胞用含15%胎牛血清的MEM培养基混悬后过滤,纯化心肌细胞后置CO2培养箱孵育.结果 培养的心肌细胞4~6 h后开始贴壁生长,12~24 h明显增殖,3~4 d后细胞汇合成片.在倒置显微镜下心肌细胞呈圆形、梭形、多角形,伸出伪足,出现自发性节律性搏动.结论 应用酶消化法可简便、快速地获得大量活力高的心肌细胞.  相似文献
3.
中药“健脑液”对培养神经细胞迟发性损伤的保护作用   总被引:10,自引:0,他引:10  
以新生大鼠皮质神经细胞原代培养为实验对象,造成迟发性神经元损伤(DND)模型。在不同时程内,测试培养液中的细胞乳酸脱氢酶(LDH)漏出量和用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷磷酸脱氢酶(NADPH-d)染色反应,观察培养细胞中一氧化氮合酶(NOS)的表达水平。结果表明,缺血组在缺血与再灌流中,LDH漏出量明显高于对照组,并随时间延长,差异越来越明显(P<0.05~0.01)。NOS阳性神经元数量在缺血时明显高于对照组(P<0.01),再灌流后早期NOS表达仍然强烈,与对照组相比有显著差异(P<0.01)。从本实验细胞模型上,可以看到DND形成的机理与兴奋性氨基酸受体过度刺激造成第二信使效应过盛和自由基损伤两种因素关系密切。本实验应用以川芎、首乌、党参、葛根为主要成分的中药"健脑液",在DND形成过程中,对细胞起到一定的保护作用。  相似文献
4.
目的:探讨子宫内膜异位症(endometriosis,EM)异位子宫内膜细胞原代培养方法,并比较EM在位及异位子宫内膜细胞与正常对照在位子宫内膜细胞形态的差异。方法:采用改良EM细胞原代培养方法,免疫细胞化学法鉴定细胞类型,在光学显微镜及电子显微镜下观察细胞形态差异。结果:正常对照子宫内膜细胞及EM在位、异位子宫内膜细胞分离培养成功率分别为91.67%、93.75%和75.00%。EM异位、在位子宫内膜腺上皮细胞与正常在位子宫内膜腺上皮细胞大小相似,但EM异位子宫内膜腺上皮细胞染色质增多,核增大。EM异位子宫内膜间质细胞较EM在位及正常在位子宫内膜间质细胞小,且细胞膜表面有较多的微绒毛和胞浆突起。结论:注意取材方式,采用改良原代培养方法,可以提高EM异位子宫内膜细胞培养成功率。EM异位子宫内膜腺上皮细胞和间质细胞超微结构与正常妇女及EM在位子宫内膜细胞有显著不同。  相似文献
5.
银杏内酯对缺氧诱导的大鼠皮层神经元早期凋亡的影响   总被引:8,自引:0,他引:8  
目的:观察银杏内酯(ginkgolide,Gin)对缺氧诱导的大鼠皮层神经元凋亡的保护作用。方法:选用胎龄14~16d的SD胎鼠的大脑皮层细胞进行原代培养,建立缺氧神经元损伤模型。实验分为药物实验组(Gin组)、空白对照组、阳性对照组(MK-801),每组均进行有糖和无糖培养两种处理。应用MTT法分析细胞存活率、AnnexinV-PE双标流式细胞仪法定量分析细胞早期凋亡。结果:MTT结果显示,Gin使皮层神经元存活率明显增加,且有糖的缺氧组皮层神经元存活率优于无糖组;流式细胞仪测定结果显示,预先加入Gin(终浓度37.5μg/m1)的一组神经元的凋亡峰明显低于空白组,而无糖处理组凋亡峰均高于有糖处理组。结论:银杏内酯(37.5μg/ml)对缺氧损伤的皮层神经元具有保护作用,可拮抗缺氧条件下体外培养的皮层神经元的早期凋亡。  相似文献
6.
大鼠肝细胞原代长期培养的形态学观察   总被引:7,自引:2,他引:5  
作利用I型胶原酶灌注雄性SD大白鼠肝脏制备游离肝细胞悬液,以DMEM培养基进行培养观察。实验中观察到经多次低速离心后,细胞悬液中各种杂质基本消除。接种培养12h可见肝细胞贴附、伸展,呈圆形、椭圆形及不规则多边形,大部分肝细胞相互聚集,排列成簇或条索状,其中多见双核肝细胞。培养7d后可见新生肝细胞呈椭圆形及多边形。培养51d时增殖的肝细胞数量明显增加,仍为多边形,相嵌紧密排列,此时可见其特有的肝细  相似文献
7.
一种小鼠原代肝细胞培养方法   总被引:7,自引:1,他引:6  
目的寻求一种简易、廉价的原代小鼠肝细胞培养方法。方法采用Ⅳ型胶原酶消化法制备游离肝细胞悬液,以低血清进行肝细胞单层培养。结果通过多次探索、观察,比较成功地进行了原代肝细胞培养。结论此方法适合一般实验室开展肝细胞培养。  相似文献
8.
二甲苯对原代培养神经细胞毒性的实验研究   总被引:6,自引:0,他引:6  
目的 :研究二甲苯对原代培养的大鼠神经细胞的毒性作用。方法 :取新生SD大鼠的海马神经细胞进行原代培养 ,培养 2周后 ,用二甲苯染毒 ,染毒浓度分别为 3、6和 9mmol/L ,染毒时间为 4、12和 2 4h ,并设阴性对照组和神经节苷酯组 ,染毒后 ,观察神经细胞的存活率、LDH活性以及一氧化氮浓度的变化。结果 :染毒后神经细胞的存活率与对照组相比 ,有显著下降 (P <0 .0 5 ) ,并有浓度 -效应关系。LDH的活性与对照组相比显著增高 (P <0 .0 5 )。结论 :二甲苯母体对神经细胞具有直接的毒性作用  相似文献
9.
绞股蓝皂甙抗谷氨酸诱导的氧化性神经毒性   总被引:6,自引:4,他引:2  
目的:探讨绞股蓝皂甙(gypenoside,GP)对谷氨酸(glutamate,Glu)介导的氧化性神经毒性的拮抗作用。方法:体外培养胎鼠大脑皮层神经细胞,建立Glu氧化性损伤模型,用MTT法测定细胞活力,透射电镜观察Glu所致的神经细胞死亡方式,流式细胞术分析细胞凋亡率。结果:GP以时间依赖性方式明显拮抗谷氨酸介导的氧化性神经毒性,于Glu损伤前达到最佳保护效果,Glu氧化性毒性导致神经细胞发生凋亡兼具坏死特征的死亡,Glu损伤组细胞凋亡率(21.63%)明显高于正常对照组(0.09%)及GP保护组(8.94%)。结论:GP可明显拮抗Glu介导的氧化性神经毒性。  相似文献
10.
目的 开发从屠宰器官进行高活性猪肝细胞规模分离的优化程序。方法 采用部分肝叶逆行灌注、机械及组酶肝消化并经密度梯度离心获取高产量、高纯度肝实质性细胞。结果 部分肝叶经消化可获取 1 39× 10 9肝细胞的平均产量 (9 9× 10 6肝细胞 /克组织 )及 92 5 %的平均细胞存活率。经组合性dispase/胶原酶的消化处理肝细胞的收获量及存活率明显增加。对细胞灌流及分离液进行氧化处理能阻止泡状细胞的发生。分离的猪肝细胞经原代培养其活性及机能保持着与鼠肝细胞一致的水平 ,且随时间的推移而减退。结论 通过我们改良的方法可收获高产量成年猪肝细胞 ,并保持良好的活性与分化机能。因此 ,成年猪肝细胞被证实是人工肝脏辅助支持系统中生物组的一个很有价值的肝细胞来源。  相似文献
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