核因子κB受体活化因子配体和肿瘤坏死因子α经炎性牙周膜干细胞外泌体促进破骨细胞分化

目的　慢性牙周炎表现的病理性骨吸收非常常见，牙周膜干细胞（PDLSCs）的外泌体（Exo）对骨吸收的作用和影响尚不明确，本研究分析了该Exo蛋白组分对破骨细胞分化的影响。方法　分别从正畸前拔牙患者和慢性牙周炎患者的牙周膜组织中提取PDLSCs，通过流式细胞术检测表面标记物；通过差速离心分别提取2种细胞的Exo，即Exo-WT和Exo-CP，并通过Western blot、透射电子显微镜（TEM）、蛋白浓度检测、纳米粒径追踪检测Exo特征；通过蛋白质谱检测2种Exo的蛋白组分；通过酶联免疫吸附（ELISA）验证了差异表达蛋白肿瘤坏死因子α（TNF-α）、核因子κB受体活化因子配体（RANKL）、白细胞介素（IL）-1α、转化生长因子β（TGF-β）、骨形态发生蛋白2（BMP-2）表达水平；将10、100、1 000 μg·mL^-1的Exo-CP或Exo-WT加入RAW264.7培养基中并于5 d时通过实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）、Western blot、抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色检测破骨分化相关指标表达情况；采用SPSS 24.0软件对实验数据进行统计学分析。结果　Exo-CP富集的差异表达蛋白主要与破骨细胞分化的TNF信号通路、核转录因子κB（NF-κB）信号通路相关；ELISA实验证实了Exo-CP中高表达TNF-α、RANKL、IL-1α，低表达TGF-β1、BMP-2（P<0.05）；Exo-CP作用于RAW264.7，显著提高了细胞的破骨分化相关基因及蛋白的表达水平，TRAP染色可见分化的破骨细胞，且呈现浓度依赖性，100、1 000 μg·mL^-1浓度Exo-CP对破骨细胞分化的促进作用显著高于10 μg·mL^-1浓度组（P<0.05）。结论　慢性牙周炎的病理性骨吸收可能由炎性PDLSCs所分泌的Exo通过促进破骨细胞分化引起，Exo中主要的作用蛋白可能为RANKL和TNF-α，本研究为慢性牙周炎骨吸收的发病机制提供了新视角。     

左上侧切牙Ⅲ型牙内陷牙髓及牙周联合治疗1例

本文报告1例因牙齿根面畸形导致严重根尖病变及牙周破坏的牙周牙髓联合病变的左上侧切牙,瘘道长期不愈,腭侧窄而深牙周袋,严重根尖病变及牙槽骨垂直吸收。通过显微根管治疗、根尖手术、引导牙周组织再生术治疗,实现了控制根尖及牙周感染,达到了保留患牙的目的。     

意向性牙再植的临床考量

当根管治疗和根尖手术难以治疗患牙根尖周病损时，意向性牙再植作为一项有着较久历史的临床技术，可作为保存天然牙的治疗手段之一。与牙种植术相比，有着更好的美学性能、经济效益，并保存了患牙的本体感受是意向性再植特有的优势。文章就意向性再植的适应证与非适应证、与牙种植术的比较及临床治疗程序做一综述。     

灌饲牙龈卟啉单胞菌对小鼠肠道炎症影响的研究

目的　研究灌饲牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis，P. gingivalis）对C57bl/6小鼠结肠炎症的诱导作用。方法　将P. gingivalis ATCC33277液体增菌后备用。将15只C57bl/6小鼠适应1周后随机均分为3组，高浓度组灌饲1 × 109 CFU P. gingivalis，低浓度组灌饲1 × 108 CFU P. gingivalis，而对照组则灌饲等量无菌BHI培养液。每只小鼠每天灌饲1次，3周后处死小鼠，采集结肠及脾脏组织，行HE染色观察组织学变化，并采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测结肠组织中CD3抗原（CD3 antigen，epsilon polypeptide，CD3）、受体型蛋白酪氨酸磷酸酶C（protein tyrosine phosphatase，receptor type C，B220）、黏附G蛋白偶联受体E1（adhesion G protein-coupled receptor E1，F4/80）、转化生长因子-β（transforming growth factor-β，TGF-β）及干扰素-γ（interferon-gamma，IFN-γ）的表达水平。结果　HE染色显示高浓度组小鼠结肠黏膜下结缔组织中淋巴滤泡增多，且高浓度组小鼠脾指数出现增高的趋势，但差异无统计学意义（P > 0.05）。qRT-PCR结果显示，与对照组及低浓度组相比，高浓度组小鼠的结肠组织中B220及TGF-β的表达水平显著增高（P < 0.05），其余指标表达水平差异无统计学意义（P > 0.05）。结论　P. gingivalis可诱导结肠炎症，从而增加牙周病患者对消化系统疾病的易感性，且其可能与牙周病病情的严重程度相关。