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目的 建立应用壳聚糖纳米粒修饰的开管毛细管电色谱柱对生物胺的分析检测方法。 方法 通过静电作用将壳聚糖纳米粒修饰于毛细管内壁; 优化应用该柱对8种生物胺包括组胺、色胺、酪胺、5-羟色胺、多巴胺、苯乙胺、腐胺和尸胺的分离条件,通过测定日内、日间和柱间的相对标准偏差(RSD)考察该方法的重现性; 通过加标-计回收率的方法检测鱼露中生物胺的含量。 结果 在pH 6.7的50 mmol/L的磷酸盐缓冲液、10 kV电压的条件下,8种生物胺在15 min内得到完全分离,柱效范围为52 397～95 302 plates/m,并且日内、日间和柱间的迁移时间的RSD分别小于1.8%,3.6%和8.0%,峰面积RSD分别小于4.0%,6.7%和13.0%; 检测定量限为1.4～5.0 mg/L; 回收率为82%～112%。 结论 壳聚糖纳米粒子修饰的开管毛细管电色谱柱的应用提高了分析生物胺的效果,并可用于实际样品中生物胺的检测。 相似文献
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目的:探讨壳聚糖纳米包被的结核杆菌早期分泌性抗原(6 kd early secretory antigenic target,ESAT-6) 与fms样酪氨酸激酶3配体 (fms-like tyrosine kinase 3 ligand,FL)重组DNA疫苗接种C57BL/6小鼠对其Th1和Th2型细胞因子生成的影响?方法:制备壳聚糖(nano-chitosan,CS)纳米颗粒,然后用CS纳米粒包被本室构建的结核杆菌ESAT-6与FL重组质粒(nano-ESAT-6-FL)?ESAT-6质粒(nano-ESAT-6)?FL质粒 (nano-FL)和pIRES载体(nano-pIRES),并进行电镜和Western blot鉴定?此后将上述质粒分别接种小鼠,同时给小鼠接种未用壳聚糖纳米颗粒包被的上述对应质粒,并设PBS?CS纳米粒及BCG作为对照?接种后9周,取小鼠脾细胞进行培养,并用结核菌纯化蛋白衍生物 (purified protein derivatives tuberculin,PPD) 给予刺激72 h,然后用ELISA试剂盒检查小鼠脾细胞上清液中的Th1型细胞因子(IFN-?酌 ?IL-12)和Th2型细胞因子(IL-4?IL-10)的分泌水平?结果:成功制备出壳聚糖纳米包被的结核杆菌ESAT-6和FL重组质粒(包括其他几种质粒),并证实被壳聚糖纳米包被的质粒可在真核细胞中表达?用壳聚糖纳米包被的ESAT-6-FL重组质粒免疫小鼠,其脾细胞上清液中的IFN-?酌和IL-12水平显著高于未用壳聚糖纳米包被的相应质粒免疫组和其他对照组,而IL-4和IL-10的水平与未用壳聚糖纳米包被的相应质粒免疫组和其他实验组对照组相比均无明显升高?结论:壳聚糖纳米化的ESAT-6-FL重组质粒疫苗接种小鼠能够显著提高小鼠体内Th1型细胞因子的水平?提示用壳聚糖纳米包被结核杆菌ESAT-6-FL重组DNA疫苗能提高其细胞免疫效果? 相似文献
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