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1.
PCR-微流芯片在血液HBV DNA HCV/HIV RNA筛查中的初步应用   总被引:6,自引:0,他引:6  
目的探讨在血液筛查中应用PCR-微流芯片技术检测献血者HBV DNA,HCV/HIV RNA的模式及可行性。方法在常规ELISA初、复检全项测定合格基础上,将献血者的血清按5人份×200μL进行汇集,用大容量磁珠法提取样本核酸,PCR-微流芯片检测技术进行扩增和检测。将国家标准质控血清进行系列稀释考评方法的灵敏度和重复性。结果342份(69个汇集池)无偿献血标本中有3份HBsAg(-)HBV DNA( ),HBV DNA阳性率为0.89%,其中1份标本两对半结果全阴性,2份标本抗-HBs( )及抗-HBc( )。PCR-微流芯片法检测HBV DNA、HCV RNA及HIV RNA的95%的灵敏度分别为11.5IU/mL、167.7拷贝/mL和57.9IU/mL结论PCR-微流芯片法具有操作简便、快速、灵敏度高、特异性强、重复性好特点,可应用于血液HBV DNA HCV/HIV RNA的筛查工作,以进一步提高输血的安全性。  相似文献
2.
微流控芯片用于AFP快速检测的研究   总被引:3,自引:3,他引:0  
潘静  黄辉  郑小林  黄敏  蒲晓允 《重庆医学》2006,35(6):510-512
目的建立一种可以用于免疫分析的微流控芯片系统。方法采用激光直接加工法制备微流控芯片,建立由流体拉制系统、免疫反应系统和信号处理系统构成的芯片系统,用于甲胎蛋白的测定。结果芯片系统可以在20min内完成AFP的分析,所需要的标本量和试荆量为5μl,线性范围为1-800ng/ml,批内CV平均为4.8%,批间CV平均为7.0%,回收率为96.3%。结论微流控芯片系统是一种快速、耗费小、可重复使用的AFP测定方法。  相似文献
3.
人乳头状瘤病毒感染型别与子宫颈上皮内瘤变的关系   总被引:1,自引:0,他引:1  
李怀芳  朱新贤  王昕  李莉 《上海医学》2006,29(11):775-777
目的采用聚合酶链反应(PCR)-寡核苷酸微流芯片进行人乳头状瘤病毒(HPV)分型,并研究子宫颈上皮内瘤变(CIN)与HPV感染型别的关系。方法对335例临床病例进行筛查、细胞学分级并分组,活检标本通过寡核苷酸微流芯片上特异性探针进行HPV分型。结果335例患者中,HPV阳性率为22.1%。宫颈良性疾病组的HPV阳性率为10.9%,CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ和宫颈鳞癌组分别为47.2%、66.7%、68.4%和75.0%,均显著高于宫颈良性疾病组(P值均<0.05)。结论随着CIN级别的升高,高危HPV型感染比例增加,寡核苷酸微流芯片检测能区分多种HPV型别,可用于临床宫颈上皮内瘤变的HPV筛查。  相似文献
4.
总T3快速检测微流控芯片的制作及应用研究   总被引:1,自引:1,他引:0  
潘静  黄辉  李招权  蒲晓允 《重庆医学》2006,35(17):1557-1559
目的 建立一种可以用于免疫分析的微流控芯片系统。方法 采用激光直接加工法制备微流控芯片,建立由流体控制系统、免疫反应系统和信号处理系统构成的芯片系统,用免疫竞争法测定总T3。结果 芯片系统可以在20min内完成总T3的分析,所需要的标本量和试剂量为5μl。线性范围为1~10ng/ml,批内CV平均为7.2%。批间CV平均为10.7%,回收率为108.5%。结论 微流控芯片系统用于检测总T3具有快速、灵敏、稳定、可重复使用的特点。  相似文献
5.
目的:建立一种可用于免疫分析的微流控芯片系统。方法:采用激光直接加工法制备微流控芯片,建立基于超顺磁珠的化学发光微流控免疫分析系统,用于甲胎蛋白(AFP)的测定。结果:芯片系统可在20min内完成AFP的分析,所需要的标本量和试剂量为5μl,线性范围为1~800ng/ml,批内变异系数(CV)平均为6,3%,批间CV平均为7.8%,回收率为94.3%。结论:微流控芯片系统是一种快速、耗费小、可重复使用的AFP测定方法。  相似文献
6.
目的 在已制备的微流控芯片系统上建立基于顺磁微球的免疫检测方法,并将此方法用于检测促甲状腺激素(TSH)和甲状腺素(T4)。方法 采用数字激光刻蚀技术制备微流控芯片,以luminol-H2O2为发光体系,用双抗夹心法测定TSH,用免疫竞争法测定T4。结果 该检测系统可以在25min内完成检测,所需的标本和抗体试剂量为10山,TSH检测范围为0~50μIU/ml,批内CV平均为4.9%,批间CV平均为4.9%,平均回收率为93.74%;T4检测范围为9.375~300ng/ml,批内CV平均为4.9%,批间CV平均为4.7%,平均回收率为91.27%。结论 本方法检测TSH和T4具有操作简便、节约时间、节省试剂、稳定性好、准确度高的优点。  相似文献
7.
杨帆  蒲晓允 《重庆医学》2007,36(10):903-905
目的建立一种可将免疫反应原理与化学发光技术相结合的微流控芯片系统。方法采用激光直接加工法制备微流控芯片,用双抗夹心法测定TSH。结果芯片系统可以在25min内完成TSH的检测流程,所需的标本和抗体试剂量为10μl,线性范围为0-50μIU/ml,批内CV平均为4.7%,批间CV平均为4.6%,平均回收率为95.3%。结论用于检测TSH的微流控芯片系统灵敏、快速、操作简便、可重复使用。  相似文献
8.
毕颖楠  张惠静  管潇 《重庆医学》2006,35(20):1872-1874
目的本研究通过绘制TE缓冲液的伏安曲线和电流一时间曲线.对芯片内TE缓冲液的伏安特性和稳定性进行了讨论。方法对高场强下TE缓冲液体系的电流变化进行监测。结果在本实验加电压范围之内(0~5000V),不同PH值的TE缓冲液在同一芯片上均显示出良好的伏安线性;在连续高场强的作用下,随着加压时间的延长.两种不同PH值的缓冲液的电流均显示出了相同的变化趋势:即在经过了一定的稳定期后.电流急速下降后又急速上升.且极不稳定。结论在以电渗流为驱动的芯片系统中,选用TE缓冲体系有着巨大的优势。另外,长时间的连续施加高电压可能会使通道内的液体性质发生改变,继而影响其内发生的生物化学反应。  相似文献
9.
黄辉  郑小林  郑峻松  潘静  蒲晓允 《重庆医学》2006,35(24):2245-2247
目的建立微流控芯片的CO2激光直接微加工方法。方法构建激光加工装置,设置激光微加工程序,并对激光加工过程中一些影响因素进行分析,最后将加工后的芯片用于免疫分析。结果CO2激光可用于微流控芯片的加工,微流控芯片通道的深度主要受激光加工强度和激光加工次数的影响。对微通道表面的修饰可以改善通道的光滑度,采用该方法加工后的芯片可以用于免疫分析。结论CO2激光微加工法是一种操作方便、所需设备简单、加工周期短的微流控芯片加工方法。  相似文献
10.
目的:构建增殖诱导配体(APRIL)异构体特异性siRNA质粒载体,利用微流控芯片电泳筛选APRIL异构体特异性siRNA表达质粒。方法:以高表达APRIL的人结肠癌细胞株SW480为肿瘤细胞模型,选择APRIL异构体特异性siRNA序列,微流控芯片电泳筛选siRNA表达质粒并经测序后转染SW480细胞,半定量RT-PCR法检测瞬时转染前后SW480细胞中APRILmRNA水平。结果:成功构建hOligo637、hOligo1450、hOligo1534、hOligo1750。微流控芯片电泳成功分辨出被双酶切的插入片段。瞬时转染SW480细胞后均产生特异性的mRNA抑制效应。结论:采用微流控芯片电泳成功筛选出APRIL为靶点的siRNA质粒,并可广泛应用于筛选siRNA质粒。  相似文献
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