健康促进企业和健康企业的内涵与实践辨析

[摘要]?微小RNA （microRNA, miRNA）在宿主-病毒相互作用中起关键调节作用，参与HBV感染、复制和HBV相关疾病的调节。细胞miRNA可以通过直接结合HBV转录物或通过靶向与HBV生命周期相关的细胞因子间接调节HBV转录和复制。反过来，HBV感染也可以影响宿主细胞内的miRNA水平。HBV和miRNA之间的相互作用在HBV复制和HBV相关疾病的发病机制中发挥重要作用。本文对miRNA与HBV的相互关系进行综述，为进一步探讨HBV感染致病的分子机制和开发新的抗HBV治疗策略提供参考。     

Study on the Value of Ultrasound Elastography Combined with Plasma miRNA Expression in the Early Detection of Breast Cancer

Background: Breast cancer (BC) is the most common malignant tumor in women, and its morbidity and mortality are increasing each year, due to the lack of specific clinical symptoms in the early stage of BC, and the lack of diagnostic methods for early breast cancer. Therefore, identifying an effective diagnostic method for early BC has become urgent. Materials and Methods: Breast lesions with a histological diagnosis that were examined by ultrasonic elastography (UE) in our department from June 2020 to December 2021 were reviewed. qRT-PCR was performed to measure the expression levels of miR-144-5p and miR-26b-5p in the plasma of patients with BC. The receiver operating characteristics (ROC) curve and area under the curve (AUC) were used to investigate the potential diagnostic value of miR- 144-5p, miR-26b-5p and the elastographic score in BC. Results: The ultrasonic elastography score(UES) was found to be significantly upregulated in BC compared with that in benign breast lesions, and the AUC, sensitivity and specificity were 0.809, 0.717 and 0.806 for distinguishing BC from benign breast lesions, respectively. miR-144-5p and miR-26b- 5p were found to be upregulated in the plasma of BC patients, and miR-144-5p+miR-26b-5p had 0.781 sensitivity and 0.780 specificity for the diagnosis of BC. Furthermore, we found that the diagnostic performance of miR-144-5p and miR-26b-5p combined with UES for BC had 0.913 sensitivity and 0.890 specificity. Conclusions: The combination of plasma miR-144-5p, miR-26b-5p and UES has a very high clinical application value for the early detection of BC.     

凉血通瘀方干预高血压大鼠急性脑出血模型对脑组织中差异miRNA表达的影响＊

目的 研究凉血通瘀方对高血压大鼠急性脑出血模型脑组织miRNA表达的影响，对差异表达的miRNA靶基因进行分析，探索凉血通瘀方可能的药效机制。方法 将自发性高血压大鼠随机分成对照组（B）和实验组（C）。适应性饲养一周后，C组灌胃凉血通瘀方，B组灌胃等体积生理盐水，连续5天，每天1次。构建脑出血模型后收集脑组织，借助全转录组测序技术获得miRNA表达量，与miRBase数据库比对获取已知miRNA，使用miRDeep2预测新miRNA。差异分析软件为DESeq2，筛选阈值为|log₂FC| ≥1 并且P <0.05。对显著差异表达的miRNA进行靶基因预测，对靶基因进行GO功能、KEGG通路富集和PPI网络分析。结果 实验组和对照组对比，共发现21个显著差异表达的miRNA，上调有9个，下调有12个，共预测得到1243个有统计学意义的靶基因。GO富集分析发现，生物过程中突触囊泡分泌的调节、神经递质分泌的调节和神经递质运输的调节占前三位，神经元投射终点、全膜、质膜区域和细胞投射则是主要的细胞成分。分子功能分别为小GTPase绑定、底物特异性跨膜转运蛋白活性和离子跨膜转运体活性。通路分析结果显示，靶基因在癌证通路、pI3K-Akt信号通路、人类乳头瘤病毒感染、神经活性配体-受体相互作用和MAPK通路等分布广泛。采用STRING网站和Cytoscape软件，根据MCC算法筛选出ADRA2C、CASR、CCL28、CCR1、DRD2、GNAT3、GRM2、DYNC1LI1、GABBR1、GNAI1等核心靶基因。结论 凉血通瘀方对脑出血急性期鼠脑组织内miRNA的表达有重要影响；显著差异表达miRNAs可能通过靶向核心基因调控凉血通瘀方干预急性脑出血的病理过程及预后。     

外周血液中miRNA表达与老年性黄斑变性相关性研究

目的　检测微小核糖核酸（microribonucleicacids，miRNA）在老年性黄斑变性（age-related macular degeneration，AMD）患者中的表达，并探讨miRNA的表达量与AMD病程之间的关系。方法　选取2014年1月至2016年11月于同济大学附属第十人民医院眼科门诊就诊的AMD患者6例为试验组，并选取同期6名正常人为对照组，通过基因芯片技术检测两组血液中miRNA的表达量。扩大样本的病例对照研究中共纳入126例AMD患者和140名正常人，检测其血液样本中miRNA的表达，比较两组人群间miRNA的表达量差异。结果　通过基因芯片技术，在试验组与对照组间共检测出216个miRNA存在表达差异（均为P<0.05），与对照组相比，试验组中111个miRNA表达量上升，105个miRNA表达量下降，差异均有统计学意义（均为P<0.05）。扩大样本的病例对照研究结果表明，在AMD患者中，miR-27a-3p、miR-29b-3p、miR-195-5p的表达量显著上升，同时，湿性AMD患者血液中miR-27a-3p的表达量高于干性AMD患者，差异均有统计学意义（均为P<0.05）。结论　AMD患者外周血中miRNA表达量水平有明显变化，miR-27a-3p、miR-29b-3p、miR-195-5p可能成为AMD血清学诊断和预后的标志物。     

肺癌遗传易感差异表达miRNA的筛选及生物信息学分析

目的 肺癌是目前我国死亡率最高的恶性肿瘤,发病率和病死率持续升高,且预后较差,患者的5年生存率小于15％,严重威胁人们的健康。筛选肺癌遗传易感差异表达的miRNA,分析差异表达的miRNA的靶基因功能,可为进一步研究miRNA在肺癌发生发展过程中的作用提供实验基础。方法 采用高通量测序技术检测海南地区汉族肺癌患者和对照患者血清中差异表达的miRNA,通过生物信息学方法预测差异miRNAs的靶基因,并对靶基因进行GO功能富集分析、KEGG信号通路分析和蛋白相互作用分析。结果 肺癌患者和对照患者共筛选出3个显著差异表达的miRNA (P<0.05,|log2 (Fold Change)|≥1) ,且均呈下调状态。差异表达miRNAs所预测的靶基因显著参与癌症通路、 轴突导向通路、代谢通路,NUFIP2、PLAGL2、IGF1R基因编码的蛋白在互作网络中具有重要作用。结论 海南地区肺癌患者和对照患者间存在3个差异表达的miRNAs,这些miRNAs可能通过调控癌症、轴突导向、代谢等信号通路,调节下游靶蛋白参与肺癌的发生过程。     

miR‐197‐5p inhibits sarcomagenesis and induces cellular senescence via repression of KIAA0101

The abnormal expressions of microRNAs (miRNAs) are known to be associated with various pathophysiological processes that lead to the development of a plethora of diseases including cancer. Among several miRNAs studied so far, miR‐197 has been reported to play a vital role either as an oncogene or tumor suppressor in different cancers. However, its role in carcinogenesis of fibrosarcoma has not yet been elucidated. Therefore, the current study investigated the role of miR‐197‐5p, which is significantly downregulated in HT1080 fibrosarcoma cells compared to IMR90‐tert fibroblast cells. The transient overexpression of miR‐197‐5p causes a significant decrease in viability and proliferation of fibrosarcoma cells in both concentration‐ and time‐dependent manners. Interestingly, we did not observe any significant changes in cell cycle pattern or apoptotic cell populations, but rather noticed cellular senescence of fibrosarcoma cells upon overexpression of miR‐197‐5p. Further, this miRNA suppresses the metastatic properties, such as migration, invasion, and anchorage‐independent growth of fibrosarcoma possibly through targeting KIAA0101, which is a proliferating cell nuclear antigen‐associated factor and overexpressed in the malignancy. In nutshell, our result revealed that miR‐197‐5p acts as an oncosuppressor miRNA in fibrosarcoma through target regulation of KIAA0101, which can be exploited for developing RNA‐based therapeutic strategies for the cure of this malignancy.     

miRNA93和miRNA192在H3N2亚型SIV病毒复制及宿主抗病毒免疫中的作用

目的 探讨分离于广西猪流感病毒SW/Guangxi/NS2783/2010和SW/Guangxi/NS650/2012跨种属感染人肺腺癌A549细胞的miRNA93和miRNA192对病毒复制及宿主抗病毒免疫的影响。方法 通过测定不同稀释浓度的病毒感染细胞HA滴度值,确定病毒最佳稀释浓度。荧光定量PCR检测病毒感染细胞后miRNA93和miRNA192表达,Western blot检测病毒NP和HA蛋白表达水平;转染miRNA93和miRNA192抑制剂后,重新检测miRNA93、miRNA192、IFN-β及病毒NP、HA蛋白表达水平。结果 不同稀释度病毒感染人A549细胞后HA滴度的结果显示病毒SW2783的最佳稀释度为10^-3,而SW650的HA滴度无明显变化趋势,提示病毒SW2783对人A549细胞具有较好的适应性和感染能力。荧光定量PCR和Western blot结果提示两株病毒感染细胞后病毒NP和HA蛋白表达均先升高后降低,加入miRNA93抑制剂,两株病毒NP和HA蛋白的表达均上调;加入miRNA192抑制剂,病毒SW2783的HA蛋白表达下调（P=2.10×10^-4）,而SW650的HA蛋白表达上调（P=5.45×10^-5）,NP蛋白反而下调（P=0.034）;ELISA结果提示病毒SW2783和SW650感染细胞后炎症因子IFN-β表达水平随感染时间延长而升高。结论 研究表明miRNA93和miRNA192的表达与SIV病毒增殖及宿主抗病毒免疫有关,可作为干预猪流感病毒跨种属感染的新靶点。     

lncRNA/miRNA在胰腺癌发生发展中的研究进展

ncRNA/miRNA在多种实体肿瘤中表达异常，参与肿瘤的增殖、侵袭、转移。胰腺癌是发病率较高、死亡率高的恶性肿瘤，通过深入研究lncRNA/miRNA在胰腺癌发生发展中的分子机制，可为胰腺癌的治疗提供新的靶点。     

肝癌增强子-miRNA调控作用对的识别与特征分析

目的：探讨肝癌和正常肝组织中增强子与miRNA形成的调控关系及调控miRNA的增强子的特征，筛选出由增强子调控的差异表达miRNA并探讨其与肝癌治疗靶点的相关性。方法：基于TCGA与FANTOM5 数据库，对肝癌和正常肝组织中共417 个样本的增强子与miRNA进行共表达与3D基因组分析得到调控关系。通过ENCODE数据库中肝癌与正常肝组织的组蛋白修饰与转录因子的ChIP-seq 数据分析调控miRNA的增强子上信号值的差异。筛选由增强子调控的差异表达的miRNA，并对患者的生存期与治疗靶点进行相关性分析。结果：在肝癌与正常肝组织中分别识别增强子-miRNA 作用对93 对和40 对。ChIP-seq 数据比对分析发现，肝癌中组蛋白修饰H3K27ac、H3K4me1 和H3K4me3 信号在调控miRNA增强子区域显著高于不调控miRNA的增强子区域（|rho|>0.3，P<0.05）；多种转录因子在肝癌相关增强子中的富集显著低于正常肝组织（|rho|>0.3，P<0.05）。对增强子调控的miRNA进行差异表达分析，识别了6个与肝癌患者生存相关miRNA（hsa-miR-4664、hsa-miR-5003、hsa-miR-1915、hsa-miR-3619、hsa-miR-4745、hsa-miR-6728），发现这些miRNA 与87 个用于靶向治疗的基因以及8 个免疫检查点基因显著相关（|rho|>0.1，FDR<0.05）。结论：成功在肝癌中识别出增强子-miRNA调控作用对与调控miRNA的增强子的特征，并筛选出由增强子调控的与肝癌患者生存和治疗靶点相关的miRNA，为后续深入开展肝癌的基础与临床研究提供了参考依据。