顺铂诱导铁死亡促进肿瘤相关巨噬细胞极化抑制宫颈癌细胞耐药性北大核心

目的:探究顺铂通过引起宫颈癌细胞铁死亡进而诱导肿瘤相关巨噬细胞极化从而抑制宫颈癌细胞耐药性的机制。方法:使用5μmol/L顺铂处理顺铂耐药宫颈癌细胞Hela/R一定时间后,采用qRT-PCR法检测铁死亡相关基因的mRNA表达变化情况;使用ELISA试剂盒和荧光染色法测定铁死亡后的Hela/R细胞释放高迁移率族蛋白1(high mobility group box 1,HMGB1)的情况。将顺铂处理过的Hela/R细胞和M2型小鼠骨髓来源巨噬细胞共培养一定时间后,采用流式细胞术检测巨噬细胞激活情况。将共培养后的巨噬细胞和Hela/R细胞共孵育,采用CCK8法和流式细胞术分别检测肿瘤细胞的存活率和凋亡情况。结果:实验数据显示,顺铂可引起Hela/R细胞的铁死亡,抑制其铁死亡抑制基因Slc40a1、Slc7a11、Slc3a2、Gpx4、Fth1、Blvrb的mRNA表达(P<0.05),上调铁死亡诱发基因Slc5a1、Tfrc的mRNA表达(P<0.01)。铁死亡Hela/R细胞释放损伤相关模式分子HMGB1,诱导M2型肿瘤相关巨噬细胞的CD80、CD86和CD40平均荧光强度提升,增强了肿瘤相关巨噬细胞对Hela/R细胞的杀伤能力。结论:顺铂通过引起宫颈癌细胞的铁死亡激活肿瘤相关巨噬细胞进而达到有效杀伤肿瘤细胞的效果。     

非小细胞肺癌顺铂耐药相关基因生物信息学研究

目的：通过分析非小细胞肺癌顺铂敏感株及耐药株的基因芯片表达数据，筛选差异基因及关键通路，构建蛋白相互作用网络，探讨关键集群功能。方法:从GEO数据库获得基因芯片表达数据，利用GEO2R工具筛选差异基因，通过STRING数据库和Cytoscape软件构建蛋白相互作用网络，经DAVID富集得到相关特征基因与信号通路信息。结果：通过芯片分析共获得481个差异表达基因，相比于敏感细胞株，顺铂获得性耐药细胞株中有418个上调基因和63个下调基因。差异基因功能主要富集在piRNA代谢、DNA甲基化修饰、细胞有丝分裂及细胞周期进程等信号通路。蛋白复合物预测得到主要功能集群6个，分别与细胞趋化性、细胞角化性、piRNA代谢过程、细胞因子受体相互作用、细胞因子分泌调节及染色质沉默相关生物进程相关。结论:本研究利用生物信息学方法，发现顺铂耐药细胞株特征基因及信号通路，其中SAA1、KRT5、TDRD9、BCL2A1、CSF1R和HIST1H1A等显著上调基因及其功能集团可能是非小细胞肺癌顺铂耐药的潜在分子机制，为临床精准治疗提供新的理论依据。     

Rociletinib (CO-1686) enhanced the efficacy of chemotherapeutic agents in ABCG2-overexpressing cancer cells in vitro and in vivo

Overexpression of adenosine triphosphate (ATP)-binding cassette subfamily G member 2 (ABCG2) in cancer cells is known to cause multidrug resistance (MDR), which severely limits the clinical efficacy of chemotherapy. Currently, there is no FDA-approved MDR modulator for clinical use. In this study, rociletinib (CO-1686), a mutant-selective epidermal growth factor receptor (EGFR) tyrosine kinase inhibitor (TKI), was found to significantly improve the efficacy of ABCG2 substrate chemotherapeutic agents in the transporter-overexpressing cancer cells in vitro and in MDR tumor xenografts in nude mice, without incurring additional toxicity. Mechanistic studies revealed that in ABCG2-overexpressing cancer cells, rociletinib inhibited ABCG2-mediated drug efflux and increased intracellular accumulation of ABCG2 probe substrates. Moreover, rociletinib, inhibited the ATPase activity, and competed with [¹²⁵I] iodoarylazidoprazosin (IAAP) photolabeling of ABCG2. However, ABCG2 expression at mRNA and protein levels was not altered in the ABCG2-overexpressing cells after treatment with rociletinib. In addition, rociletinib did not inhibit EGFR downstream signaling and phosphorylation of protein kinase B (AKT) and extracellular signal-regulated kinase (ERK). Our results collectively showed that rociletinib reversed ABCG2-mediated MDR by inhibiting ABCG2 efflux function, thus increasing the cellular accumulation of the transporter substrate anticancer drugs. The findings advocated the combination use of rociletinib and other chemotherapeutic drugs in cancer patients with ABCG2-overexpressing MDR tumors.     

多西他赛联合氟尿嘧啶、顺铂方案与多西他赛联合氟尿嘧啶、洛铂方案治疗胃癌的疗效比较

目的:比较多西他赛联合氟尿嘧啶、顺铂方案与多西他赛联合氟尿嘧啶、洛铂方案治疗晚期不可手术胃癌患者的疗效和不良反应。方法:回顾性分析2015年2月至2018年6月126例晚期不可手术的胃癌患者。洛铂组55例:多西他赛+氟尿嘧啶+洛铂，顺铂组71例:多西他赛+氟尿嘧啶+顺铂。洛铂组和顺铂组均21天为一个疗程，连续治疗四个疗程。结果:洛铂组患者客观有效率为50.91%，顺铂组为35.21%，差异无统计学意义（P＞0.05）。洛铂组患者疾病控制率达到83.64%，顺铂组为67.61%，差异有统计学意义（P＜0.05）。洛铂组患者在恶心、呕吐、白细胞减少和四肢麻木方面发生率明显低于顺铂组，差异有统计学意义（P＜0.05）。洛铂组患者血小板减少发生率高于顺铂组，差异有统计学意义（P＜0.05）。洛铂组患者严重不良反应的发生率为21.82%，顺铂组为39.44%，差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论:将多西他赛联合氟尿嘧啶、顺铂方案中的顺铂以洛铂替代，取得了更好的疾病控制率，而患者的不良反应更轻，严重不良反应的发生率也更低，值得临床进一步研究。     

放疗分别联合多西他赛、顺铂、替吉奥治疗局部晚期鼻咽癌的疗效比较

目的:比较多西他赛(TXT)、顺铂(DDP)、替吉奥（S-1）同步放疗治疗晚期鼻咽癌的近期疗效和毒副反应。方法:将99例晚期鼻咽癌患者分为TXT组、DDP组及S-1组,各33例。治疗方案:TXT 25 mg/m2静滴,每周1次；DDP 40 mg/m2静滴,每周1次；S-1 40 mg/m2口服，2次/日，d1~14，21天为1周期，共2~3周期。同步IGRT放疗,鼻咽靶区剂量（69.96~73.92） Gy/33 f。评价近期疗效及毒副反应。结果:99例患者均可评价疗效。TXT组CR 20例、PR 11例、SD 2例,RR为93.9%;DDP组CR 21例、PR 10例、SD 2例,RR为93.9%；S-1组CR 18例、PR 12例、SD 3例,RR为90.9%。DDP组与TXT组间疗效无统计学差异(P＞0.05)，S-1组在疗效上稍差于DDP组及TXT组（P＜0.05）。主要毒副反应有中性粒细胞减少、胃肠道反应、放射性皮炎及口腔黏膜炎。DDP组中性粒细胞减少和口腔黏膜炎发生率明显高于TXT组(P＜0.05)，S-1组中性粒细胞减少和口腔黏膜炎发生率明显低于TXT组（P＜0.05）；胃肠道反应发生率依次为DDP组＞S-1组＞TXT组（P＜0.05）。结论:TXT同步放疗治疗晚期鼻咽癌的近期疗效好,且毒副作用小,可作为晚期鼻咽癌治疗的新选择。     

黄芪多糖通过调控miR-20a/TGFBR2 分子轴降低结直肠癌HT-29/DDP细胞的顺铂耐药性

[摘要] 目的：探讨黄芪多糖（APS）通过调控miR-20a/TGFBR2 分子轴对结直肠癌（CRC）顺铂耐药细胞HT-29/DDP增殖、侵袭、凋亡和耐药性的影响及其机制。方法：以人CRC HT-29 细胞、HT-29/DDP细胞为亲本和耐药细胞模型，将HT-29/DDP细胞随机分为4 组：对照组、APS 处理组、过表达miR-20a + APS 组、沉默TGFBR2 + APS 组。用不同质量浓度的APS（0、0.5、1.0、1.5 和2.0 mg/ml）处理HT-29/DDP细胞后，以qPCR和Wb实验检测细胞中miR-20a 和TGFBR2 的表达水平；用CCK-8、Transwell 和Annexin V-FITC/PI 染色流式细胞术检测对HT-29/DDP细胞增殖、侵袭和凋亡的影响；用双荧光素酶报告基因验证miR-20a 与TGFBR2的靶向作用关系。构建裸鼠皮下CRC HT-29/DDP细胞移植瘤模型，观察APS对移植瘤生长的影响及其机制。结果：APS显著抑制HT-29/DDP 细胞的增殖（P<0.01），且呈剂量依赖性。miR-20a 在经APS 处理后的HT-29/DDP 细胞中低表达（P<0.01）、TGFBR2 的表达水平显著上调（P<0.01）。双荧光素酶报告基因证实miR-20a 靶向作用TGFBR2 并下调其表达水平。体内外实验证实APS通过靶向下调miR-20a 对TGFBR2 的抑制作用，提高HT-29/DDP细胞的药物敏感性，进而抑制该细胞增殖、侵袭和促进凋亡（均P<0.01)；同时发现，该作用与抑制PCNA、Bcl-2 蛋白而促进Bax、Caspase-3 蛋白表达有关联。结论：APS通过下调miR-20a对TGFBR2 表达的抑制作用，从而逆转HT-29/DDP细胞对顺铂的耐药性。     

白藜芦醇联合顺铂对神经胶质瘤细胞的作用*

目的： 探讨白藜芦醇联合顺铂对神经胶质瘤细胞C6 的作用。方法：不同浓度的白藜芦醇与顺铂单独联合 作用于神经胶质瘤细胞C6，24、48 h 和72 h 后，CCK8法检测增殖，并选出合适浓度进行后续试验；不同浓度的 药物作用于细胞24 h 后，吖啶橙法观察细胞形态变化、流式细胞仪检测细胞凋亡、细胞周期和免疫印迹检测蛋白 Bax、Bcl-2 和p-Erk1/2 变化。结果：白藜芦醇与顺铂能协同抑制神经胶质瘤细胞C6 的增殖。联合用药后细胞周 期抑制在S 期。免疫印迹结果显示凋亡蛋白Bax 的表达量增加，而凋亡抑制蛋白Bcl-2 的表达量减少，细胞外调 节蛋白激酶p-Erk1/2 的表达量减少。结论：白藜芦醇与顺铂联合对神经胶质瘤细胞具有相互增敏作用，能够协同 抑制细胞增殖，并通过Ras-Raf-MEK-Erk 信号通路促进其凋亡。     

Regulated necrosis and failed repair in cisplatin-induced chronic kidney disease

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lncRNA Linc01296 对卵巢癌细胞OVCAR-3 顺铂耐药的影响及其与临床病理特征的关系

[摘要] 目的：探究lncRNA Linc01296 对卵巢癌细胞顺铂（cisplatin，DDP）抵抗的影响及其作用机制。方法：收集2017 年10月至2018 年10 月四川省人民医院妇科卵巢癌组织样本53 例、交界性卵巢肿瘤样本22 例及良性卵巢肿块组织样本17 例，qPCR检测3 种样本Linc01296 mRNA表达的差异，并分析其与患者临床病理特征的关系。培养人卵巢癌细胞系OVCAR-3（OVCAR-3 Control）及其DDP耐药细胞系（OVCAR-3 DR），慢病毒转染表达靶向Linc01296 siRNA 的载体及对照随机靶向序列载体于OVCAR-3 DR细胞中，作为siLinc01296 和siControl 组，CCK-8 实验检测各组细胞系DDP半抑制浓度（IC50）及耐药指数，qPCR 检测OVCAR-3 Control、DR、DR siControl 及siLinc01296 组细胞系中Linc01296 及肿瘤干细胞相关基因Oct-4 及Sox-2 的mRNA表达水平，WB检测各组细胞系Oct-4 及Sox-2 的蛋白表达水平。结果：OVCAR-3 DR组细胞DDP IC50及耐药指数显著高于OVCAR-3 Control 组（均P<0.01），siLinc01296 组细胞DDP IC50及耐药指数显著低于DR siControl 组（P<0.01），且显著高于OVCAR-3 Control组（P<0.01）；DR 组细胞Linc01296、Oct-4 及Sox-2 mRNA 及蛋白表达均高于OVCAR-3 Control 组（均P<0.01），siLinc01296 组Linc01296、Oct-4 及Sox-2 mRNA及蛋白表达显著低于DR siControl 组（均P<0.01），而Oct-4 及Sox-2 mRNA及蛋白均高于OVCAR-3 Control 组（均P<0.01）；Linc01296 在卵巢癌组织中的表达显著高于交界性卵巢肿瘤及良性卵巢组织（均P<0.01），且与患者淋巴结转移及临床分期呈正相关（均P<0.05）。结论：Linc01296 可通过提高卵巢癌肿瘤干细胞标志物的表达促进细胞DDP抵抗的发生，且高表达于卵巢癌组织中，与患者病情进展密切相关。