酶处理急性分离技术用于研究果蝇成虫中枢神经细胞钾电流

目的 建立急性分离果蝇成虫中枢神经细胞技术，并记录分析其钾电流。方法 取S、R或H品系果蝇成虫3—5只，分离出果蝇脑组织。胶原酶消化处理后，加入10％的胎牛血清果蝇培养基终止酶反应。巴氏吸管吹打，细胞悬液静置1h后用于电生理实验。全细胞电压钳记录并分析其外向钾电流。结果 酶消化法成功急性分离出果蝇成虫中枢神经细胞。85％以上为Ⅱ型神经细胞，少部分为Ⅰ型和Ⅲ型神经细胞。记录到快失活与持续复合型、慢失活型、快失活和持续型四种全细胞钾电流。结论 本技术可成功急性分离三品系果蝇成虫中枢神经细胞，并记录到四种钾电流。     

经乙二醇诱导的改良型草酸钙肾结石果蝇模型

目的:通过一种改良方法构建果蝇草酸钙肾结石模型。方法:配制标准培养基和造模用培养基，空白对照组果蝇仅予标准培养基，而传统模型组和改良模型组分别从成虫期和幼虫期开始摄入含 0.5%乙二醇( EG)的造模用培养基。于偏光显微镜下观察并评估各组果蝇马氏管内成石情况，分别记录模型组成石率达 100%所花时间，并对成石率 100%时模型组间“ ++”和“ +++”所占比率进行比较；用傅立叶变换拉曼光谱仪鉴定模型组果蝇马氏管内结石成分。绘制各组果蝇生存曲线，并比较生存周期差异。结果:改良模型组和传统模型组分别在果蝇成虫日龄 14 d和 22 d，马氏管内成石率达到 100%。当改良模型组和传统模型组成石率均达到 100%时，两组“ ++”与“+++”所占比率分别为(40.5±4.4)%和(39.0±4.2)%，差异无统计学意义(P＞ 0.05)；拉曼位移的主峰主要集中在 1 462 cm-1、1 463 cm-1和 1 473 cm-1，说明模型组果蝇马氏管内结石成分均为草酸钙。空白对照组、传统模型组和改良模型组的最高寿命分别为 76 d、70 d和 68 d，中位生存时间分别为 35 d、30.5 d和 30 d，与空白对照组相比，模型组生存周期均显著缩短(P均＜ 0.01)，但传统模型组与改良模型组间差异无统计学意义( P＞ 0.05)。结论:改良型造模方法使果蝇在其幼虫期即摄入 0.5% EG，缩短了模型构建周期且具有可重复性，值得进一步研究推广。     

人白血病抑制因子在果蝇细胞S2中的表达

目的 克隆人白血病抑制因子基因并将其在果蝇细胞中表达.方法 以人6w胚胎绒毛的总RNA为模板,利用RT-PCR方法扩增人白血病抑制因子cDNA,测序后将其克隆到真核表达载体C,经电穿孔法将构建的重组人白血病抑制因子质粒转染果蝇细胞S2,48h后用免疫斑点法检测人白血病抑制因子的瞬时表达情况.结果 从人早孕胚胎组织获得了长度为543bp的白血病抑制因子cDNA片段,新构建的人白血病抑制因子真核表达载体中,有人白血病抑制因子cDNA的正确插入,转染人白血病抑制因子cDNA的S2细胞培养上清中含有人白血病抑制因子蛋白.结论 成功地构建了人白血病抑制因子真核表达载体,人白血病抑制因子可在果蝇细胞中呈分泌性表达.     

酞酸酯对果蝇生存天数影响及其遗传毒性

目的探讨邻苯二甲酸二丁酯(di-n-butyl phthalate，DBP)和邻苯二甲酸二辛酯(di-n-octyl phthalate，DOP)对果蝇生存时间的影响和遗传毒性。方法用等质量混合的DBP和DOP对果蝇经口联合染毒。采用果蝇寿命试验和果蝇伴性隐性致死试验观察DBP、DOP对果蝇生存时间的影响对生殖细胞的致突变作用。结果从0．2％浓度组开始，果蝇平均寿命与对照组相比差异有统计学意义，600，1800mg／L浓度组果蝇突变率与对照组相比差异有统计学意义。结论DBP、DOP干扰了果蝇正常的生长发育和新陈代谢，并加速其衰老；DBP、DOP对果蝇生殖细胞有致突变作用。     

V_E、V_C对果蝇寿命影响的实验观察

本文观察到在人工培养的条件下,V_E、V_C有延长果蝇寿命的作用。实验组与对照组的平均寿命及最高寿命相比较,有统计学意义。V_E、V_C都是体内重要的抗氧化剂。它们通过抑制体内的自由基反应、稳定细胞膜,促进RNA和蛋白质的合成及增强免疫功能,从而起到抗衰防老,延长寿命的作用。     

邻苯二甲酸二丁酯对雄性果蝇生殖能力影响及其遗传毒性

目的：研究邻苯二甲酸二丁酯（di—n-butyl phthalate,DBP）对雄性果蝇生殖能力的影响及其遗传毒性．方法：①将未交配雄性果蝇随机分为5组,分别给予含DBP为0,1,4,16,64mg／g的培养基喂饲,10d后取存活的实验雄蝇进行交配试验和生育试验．②将雄性果蝇随机分为4组,分别喂饲含DBP为0,50,200,800mg／L的溶液,采用伴性隐性致死（SLRL）试验,观察DBP对雄性果蝇生殖细胞的致突变作用．结果：染毒10d后随着DBP浓度升高各染毒组雄蝇1h交配率和子代发生量逐渐降低,64mg／g组分别为40％和486±265,明显低于对照组的85％和861±312（P〈0．05）;生育期1—10d各染毒组的不育率均显著高于对照组（P〈0．01）,10d后只有较高浓度组的不育率高于对照组（P〈0．05）;50mg／L浓度组精母细胞Ⅲ阶段的SLRL突变率（0．990％）显著高于对照组（0．106％,P〈0．01）．结论：DBP对性成熟的雄性果蝇能造成一定的生育障碍和遗传损伤．     

肝癌组织DLK1和Jagged1表达临床意义探讨

目的探讨DLK1和Jagged1在原发性肝细胞性肝癌组织中的表达情况,深入分析两者与肝癌临床病理资料的关系及其临床意义。方法收集2001-01-01-2009-10-30顺德第一人民医院病理科采用免疫组化SP法检查10例正常肝组织、50例肝炎、50例肝硬化和150例肝细胞性肝癌组织中DLK1和Jagged1的表达情况。结果 DLK1阳性表达率在正常肝组织为0(0/10)、肝炎组为6.00%(3/50)、肝硬化组为28.00%(14/50)、肝癌组为46.67%(70/150),四组间阳性率比较差异有统计学意义,χ2=34.38,P<0.05。正常肝组织和肝炎组,正常肝组织和肝硬化组,正常肝组织和肝癌组,肝硬化和肝癌组两两比较差异均无统计学意义,P值均>0.05。肝炎和肝硬化组(χ2=8.575,P=0.003),肝炎和肝癌组(χ2=26.757,P<0.001)两两比较差异均有统计学意义。Jagged1阳性表达率在正常肝组织中为40.00%(4/10)、肝炎组为40.00%(20/50)、肝硬化组为62.00%(31/50)、肝癌组为71.33%(107/150),四组间阳性率比较差异有统计学意义,χ2=17.92,P<0.05。正常肝组织和肝炎组,正常肝组织和肝硬化组,正常肝组织和肝癌组,肝炎组和肝硬化组,肝硬化组和肝癌组,两两比较差异均无统计学意义,P值均>0.05。肝炎组和肝癌组比较差异有统计学意义,χ2=15.885,P<0.001。DLK1表达与年龄有关(χ2=15.01,P<0.05),Jagged1表达与年龄(χ2=7.94,P<0.05)、分化程度(χ2=14.79,P<0.05)、HBsAg(χ2=4.53,P<0.05)和预后(χ2=3.92,P<0.05)有关。DLK1和Jagged1在肝细胞癌组织中表达密切相关,χ2=12.79,P<0.05。结论 DLK1和Jagged1的异常表达与肝癌的发生、发展和分化密切相关。     

枸杞胶囊对果蝇的延缓衰老作用

目的 探讨枸杞胶囊对果蝇的延缓衰老作用及其机理。方法 将未交配的果蝇随机分成5组，给予含不同浓度枸杞胶囊的培养基喂养，用生存实验检测寿命，羟胺法测定SOD活性，TBA法测定MDA含量。结果 枸杞 胶囊能显著延长果蝇的平均最高寿命及雌蝇的平均帮助，雌蝇体内SOD活性明显升高（P＜0．05），雌雄果蝇体内的MDA含量均降低（P＜0．05）。结论 枸杞胶囊具有抗氧化、延缓果蝇衰老的作用。     

珍珠口服液对自由基及果蝇寿命的影响

研究珍珠口服液对动物SOD、LPO、耐缺氧和果蝇寿命的影响结果表明，珍珠口服液可使大鼠RBC内SOD活性明显升高．小鼠血清中LPO含量降低，提高小鼠耐缺氧能力，显著延长果蝇的平均寿命及最高寿命．