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1.

Background  Chemotherapy is the most frequently adopted adjuvant therapy of pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC), but the development of drug resistance reduces its effectiveness. Clarification of the mechanism of multidrug resistance (MDR) development in PDAC is needed to improve the therapeutic effect of chemotherapy. This study was aimed to investigate the molecular mechanism of MDR of PDAC and to identify genes associated with MDR development.
Methods  The gene expression profiles of cell line SW1990 and three drug-selected pancreatic chemoresistant sub-lines, SW1990/5-Fu, SW1990/ADM and SW1990/GEM, were obtained using an oligonucleotide microarray (Affymetrix HG U133 2.0 plus) that contained approximately 38 000 human genes. The microarray results were validated by real-time quantitative polymerase chain reaction and Western blot analysis.
Results  There were 165 genes and expressed sequence tags, some of which have never been linked to drug resistance, that were up- or down-regulated at least 2-fold in all resistant sub-lines when compared with SW1990. According to Gene Ontology annotation, differentially expressed genes related to MDR in pancreatic cancer belong to many functional families and with diverse biological processes. Genes related to antioxidant activity, apoptosis, the cell cycle, signal transduction and intracellular adhesion may undergo epigenetic changes preceding MDR development. A hierarchical clustering was conducted and several interesting clusters were discovered that may be primarily related to cell cycle and developmental regulation. A prediction rule was built from the expression profiles of 117 genes after support vector machine (SVM) analysis, and the prediction result was examined by cytotoxic testing. As a result, a differential gene expression pattern was constructed in multidrug resistant pancreatic cancer cells.
Conclusions  The findings of this study prove that construction of a chemoresistance prediction rule, based on gene expression patterns, is practical. These data provide new insights into the molecular mechanism of pancreatic cancer MDR development and may be useful for the detection and treatment of MDR in pancreatic cancer patients.

  相似文献
2.
目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)对肾小管上皮-间充质细胞转化(EMT)的作用及其与骨形成蛋白-7(BMP-7)、分化抑制因子(Id)2、Id3表达的关系。方法体外培养的人肾小管上皮细胞(HK-2)经转化生长因子-β1(TGF-β1,5ng/ml)与不同浓度VEGF165(0.1、1、10、100ng/ml)共同作用,或TGF-β1(5ng/ml)与血管内皮生长因子受体-1(VEGFR1)抗体(10μg/ml)共同作用48h后,免疫组织化学双染方法检测细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏素表达,实时荧光定量PCR法、Westernblot法检测细胞α-SMA、BMP-7、Id2和Id3的表达。TGF-β1(5ng/ml)、VEGF165(100ng/ml)与激活素受体样激酶-6/Fc嵌合体(Alk6/FcChimera)(2μg/ml,中和内源性BMP-7)共同作用48h后,Westernblot法检测细胞α-SMA、Id2的表达情况。结果TGF-β1作用后,α-SMA表达比正常对照显著增强(P<0.05),E-钙黏素、BMP-7、Id2及Id3的mRNA及蛋白质表达均显著减弱(P<0.05)。VEGF165以浓度依赖方式增强BMP-7及Id2蛋白表达,而显著降低TGF-β1上调α-SMA表达的作用(P<0.05)。加入VEGFR1抗体(10μg/ml)后,TGF-β1上调α-SMA表达的作用显著增强(P<0.05),而E-钙黏素、BMP-7、Id2表达显著减弱(P<0.05)。TGF-β1 VEGF165 Alk6/FcChimera共同作用后α-SMA蛋白表达比TGF-β1 VEGF165共同作用后显著增强(P<0.05),而Id2表达差异无显著性。结论VEGF165可抑制TGF-β1诱导HK-2细胞发生EMT;其机制可能与BMP-7和Id2表达上调有关,而与Id3表达变化无关。Id2表达增强可能与VEGF165的直接作用有关,而与BMP-7无关。  相似文献
3.
骨质疏松研究热点:骨髓间充质干细胞分化命运   总被引:12,自引:11,他引:1       下载免费PDF全文
骨质疏松症是一种常见的代谢性骨病,以骨量减少、骨密度降低和骨微结构破坏为特征,容易发生脆性骨折,其发病率逐年增高.骨质疏松症发病与骨平衡的破坏有关,一方面破骨细胞活性增强、骨吸收加快,另一方面成骨细胞功能衰减、骨形成不足,最终导致净骨量丢失.成骨不足与骨髓间充质干细胞分化方向密切相关.在骨质疏松症患者中,骨髓间充质干细胞向脂肪方向分化增多,向成骨方向分化减少,其分化命运受BMP/Smad、Wnt、Notch、Hedgehog等多条信号通路调控,并涉及转录调控、转录后调控和表观遗传等多种调控机制,是目前研究的热点与焦点.未来研究可集中于寻找决定骨髓间充质干细胞分化方向的关键因子和间充质干细胞移植,为骨质疏松症的治疗提供新思路.  相似文献
4.
支原体肺炎54例临床特点分析   总被引:10,自引:2,他引:8  
谭春婷  贺正一 《中国全科医学》2008,11(22):2073-2074
目的总结54例成人支原体肺炎的临床特点,探讨支原体肺炎与肺炎球菌肺炎的鉴别点,提高支原体肺炎的初诊率。方法对54例成人支原体肺炎的临床资料进行回顾性分析。结果54例支原体肺炎患者中,年龄<30岁者47例(87.0%),干咳或咳少许白痰者46例(85.2%),38例(70.4%)无肺部阳性体征,46例(85.2%)患者外周血白细胞计数正常。结论支原体肺炎多发于年轻人,表现为干咳或少痰,多缺乏胸部体征,血白细胞计数多正常,可初步与肺炎球菌肺炎相鉴别。  相似文献
5.
目的探讨大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的体外培养方法、生长规律及向成骨细胞分化的条件。方法采用全骨髓培养法分离成年大鼠BMSCs,经条件培养液诱导培养后,进行形态学观察及碱性磷酸酶活性、细胞矿化作用、骨钙素(OCN)等的测定。结果原代培养的BMSCs先形成细胞集落,14 d时集落融合;传代细胞体积变大,约5~7 d传代1次。诱导条件下,细胞碱性磷酸酶活性明显增高,并出现了矿化结节。经过体外成骨诱导的BMSCs表现出增殖、聚集、结节和矿化期的阶段性形态特征。在矿化期OCN表达呈阳性。结论BMSCs易于体外分离培养及扩增,体外成骨定向诱导的BMSCs具有典型的成骨细胞的形态和功能性特征,可以作为骨组织工程的种子细胞。  相似文献
6.
慢性阻塞性肺疾病中医辨证治疗概要   总被引:9,自引:2,他引:7  
基于病证结合诊疗模式,根据近年中医药治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)的文献研究和所开展的临床调查研究结果,结合作者的临床经验,概述了COPD的痛机和证候分类,提出了证候的虚证类(肺脾气虚证、肺肾气虚证、肺肾气阴两虚证)、实证类(外寒内饮证、痰热壅肺证、痰湿阻肺证、痰蒙神窍证)、兼证类(血瘀证)三证类八证候,拟订了证候的诊断标准或要点和辨证治疗方案.为制定中医的COPD诊断治疗方案提供依据.  相似文献
7.
人骨髓间充质干细胞的分离培养、多向分化与鉴定   总被引:9,自引:0,他引:9       下载免费PDF全文
目的探索一个高效分离和扩增人骨髓间充质干细胞的方法,并通过形态学和多向分化能力进行鉴定。方法抽取人胸椎骨髓标本,联合利用密度梯度离心和差异贴壁法分离MSCs,体外扩增后传代,相差显微镜形态学观察和流式细胞仪检测细胞表面标记CD13、CD29、HLA-2、CD34、CD45和HLA-DR。在地塞米松、左旋VitC、β-磷酸甘油、FK506作用下向成骨细胞诱导分化;在TGF-beta3、重组人胰岛素、丙酮酸钠、亚硒酸等作用下向软骨细胞诱导分化;在地塞米松、IBMX、吲哚美辛的作用下向脂肪细胞诱导分化;在VEGF、bFGF作用下向血管内皮细胞分化。结果原代和传代细胞呈梭形外观,生长增殖能力良好。细胞表面标记物CD13、CD29,HLA-2阳性,CD34、CD45和HLA-DR阴性。经定向诱导分化后,细胞分别呈现成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞和血管内皮细胞的表型特征。结论该方法能从人骨髓中高效分离和扩增MSCs,能成功定向分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞和血管内皮细胞。  相似文献
8.
体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞向肝细胞分化的实验研究   总被引:9,自引:0,他引:9  
目的:探讨大鼠骨髓间充质干细胞(mMSCs)在体外定向诱导分化为肝细胞及其方法。方法:采用梯度离心法分离纯化雄性SD大鼠的mMSCs。A组原代培养;B组原代培养分别加刺激因子50ng/ml肝细胞生长因子(HGF)和50ng/ml成纤维细胞生长因子4(FGF-4),倒置显微镜连续观察细胞分化过程的形态学变化。于培养的7、14、21、28d,细胞免疫荧光法检测各组细胞甲胎蛋白(AFP)、白蛋白(ALB)、细胞角蛋白18(CK-18)、细胞角蛋白19(CK-19)的表达。采用过碘酸希夫(PAS)染色法检测各组细胞糖原染色情况。结果:分离纯化B组大鼠的mMSCs,应用HGF和FGF-4诱导10d后变为肝细胞样圆形。细胞免疫荧光测定B组显示,培养第7dAFP即出现阳性,第21d表达明显减弱;第7dCK-19染色阳性,以后增强;第14d白蛋白与CK-18染色开始阳性,以后表达逐渐加强。A组在培养过程中不表达AFP、ALB、CK-18和CK-19。糖原染色显示,B组第14d开始阳性,-直持续到第28d;A组未见阳性染色。结论:大鼠mMSCs在较高浓度的HGF及FGF-4诱导下可分化为肝细胞。  相似文献
9.
针刺推拿结合中医治疗神经根型颈椎病60例   总被引:8,自引:0,他引:8  
目的:观察针刺推拿结合治疗神经根型颈椎病疗效。方法:对60例神经根型颈椎病进行针刺取穴,主穴风池,完骨,天柱,配以相应部位穴位。推拿治疗:以中医独特的手法治疗,通过法、拿法、一指禅法、掌揉法、掌拍法使局部肌肉松解,然后根据患者病情分别实行复位手法。中医辨证施治:营卫不和,阴阳失调型用桂枝加葛根汤加味;寒湿痹阻,气血不通型,用羌活胜湿汤加减;瘀血阻络型,用补阳还五汤加减。结果:取得较好疗效。结论:对神经根型颈椎病,针刺推拿手法和中医辨证三方面治疗是较好的方法。  相似文献
10.
蒽酮-硫酸比色法测定三叶虫茶中总糖的含量   总被引:8,自引:0,他引:8  
目的 澍定三叶虫茶的水提液争丙酮提取物中的总糖含量.方法 采用葱酮-硫酸比色法.以供试品空白为参比、葡萄糖为现测指标进行测定.结果 在620mm波长下,葡萄糖对照品在7.0~42μg/mL范围内,吸先度与浓度的线性关系良好,用水和80%乙醇配制对照品时,其回归直线方程分别为Y=O.027 6X-0.047(r=o.998,n=6)和Y=O.037 9X 0.024(r=0.99,6n=6;三叶虫茶水溶性总搪含量为9.51%(总固体中总糖含量为30.6%),平均回收率为98.4%,RSD=1.5%(n=6),丙酮总固体中总糖的含量为13.4%,平均回收率97.9%,RSD=1.2%(n=6).结论 此法利用显示光谱法(AA法)消除了试样基体有色的干扰,使显色后的吸收峰明显改善,姑果可靠,重复性好;也为非水提样品提供了一种可行的总糖含量测定方法,且灵敏度更高.  相似文献
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