地鳖纤溶蛋白口服时间/pH依赖结肠靶向微囊的开发及评价＊

地鳖中的纤溶活性蛋白是从地鳖中提取的具有抗栓及抗肿瘤作用的有效成分，其口服易被上消化道酶分解从而限制了应用。采用恒流泵滴制法开发地鳖纤溶活性蛋白时间/pH依赖口服结肠靶向微囊（EnpolypHaga fibrinolytic protein oral colon targeting microcapsules， CTM-EFP）。采用单因素实验和正交实验相结合的方法寻找到包封率为60.17 % ± 2.72 %、载药量为15.50 % ± 0.44 % 的最佳配方。扫描电子显微镜（SEM）显示微囊呈球形、表面光滑，在人工肠液中24 h的累积释放度为99.53 % ± 0.69 %，在人工胃液中24 h累积释放度为7.43 ± 1.04 %，通过时间/pH依赖达到结肠靶向作用。CTM-EFP在人工肠液中的体外释放曲线符合Korsmeyer方程，提示地鳖纤溶活性蛋白（EnpolypHaga fibrinolytic protein， EFP）是通过扩散和侵蚀机制结合释放的。CTM-EFP为EFP的口服给药提供了一种新的剂型，为EFP应用于临床提供参考。     

利用酵母双杂交系统筛选NKD1结合蛋白质北大核心

目的:酵母双杂交技术筛选结肠癌细胞中与裸角质层同源蛋白1(naked cuticle homolog 1,NKD1)相互结合的蛋白质,从而进一步了解NKD1。方法:以结肠癌细胞SW480的cDNA为模板,克隆NKD1基因,并将其成功构建在pGBKT7诱饵载体上。利用酵母双杂交技术从结肠癌SW480细胞文库进行筛选。结果:初步筛选获得13个阳性克隆菌株。经测序,在数据库中BLAST比对后,共确定为8种不同基因编码的蛋白片段。回转实验进一步验证了这8种不同基因编码的蛋白均能够激活酵母双杂交系统中的His3、Ade2和LacZ报告基因。这8种不同基因中的4种基因编码的蛋白片段为YWHA蛋白家族成员,其中2种都是编码YWHAE蛋白片段。在结肠癌HCT116细胞中通过免疫共沉淀实验进一步验证,NKD1与YWHAE在结肠癌细胞中可以相互结合。结论:结肠癌细胞中,证实YWHAE是NKD1结合蛋白质,通过调控胰岛素的敏感性,进而调控结肠癌细胞对葡萄糖的摄入。     

左右半结肠癌病理特征及治疗新策略研究进展

结肠癌患者预后较差，全身系统治疗为目前常用基本策略。近年来的相关研究证据表明，发生在左半结肠和右半结肠的肿瘤病理学特征、分子发病机制及预后存在差异。目前对左、右半结肠癌之间存在的这种异质性差异尚无明确的区分对待策略，国内外指南也尚无定论，因而研究其临床病理特征及相关预后差异具有重要临床意义。笔者在复习相关文献的基础上，就此作一综述。     

经同侧腹直肌易位造口在腹腔镜造口旁疝修补术中的应用

目的分析经同侧腹直肌易位造口在腹腔镜造口旁疝修补术中的应用价值。 方法选取2016年8月至2017年12月，重庆市开州区中医院收治的60例乙状结肠造口旁疝患者，随机分为对照组和观察组，每组30例。对照组行开放造口旁疝修补术，观察组行腹腔镜经同侧腹直肌易位造口修补术。比较2组患者手术和住院情况、并发症发生率、复发率、远期疼痛发生率及切口疝发生率。 结果观察组患者感染发生率、并发症总发生率及复发率分别为0、16.67%及3.33%，明显低于对照组16.67%、43.33%及23.33%，差异有统计学意义（χ²=5.455、5.079、5.192，P=0.020、0.024、0.023）。观察组患者手术时间、住院费用分别为（131.05±12.11）min、（38 946.06±1 019.75）元均高于对照组（96.91±10.54）min、（18 492.19±572.36）元，差异有统计学意义（t=11.647、95.802，P均<0.001）。观察组患者术中出血量、术后下床活动时间及术后恢复活动时间分别为（33.14±8.06）ml、（1.26±0.51）d、（3.59±1.17）d均低于对照组（69.28±9.18）ml、（2.27±1.02）d、（5.44±2.25）d，差异有统计学意义（t=16.204、4.851、3.996，P均<0.001）。 结论经同侧腹直肌易位造口在腹腔镜造口旁疝修补术中应用效果较好，能够有效改善乙状结肠造口旁疝患者手术情况及住院情况，减少术后并发症的发生和疝复发。     

腹腔镜联合支架与开腹联合支架治疗左半结肠癌伴梗阻患者的对比研究

目的比较腹腔镜联合支架与开腹联合支架治疗左半结肠癌伴梗阻患者的疗效。方法选取2014年1月～2017年1月40例左半结肠癌伴梗阻患者,将其分为观察组和对照组,每组20例。观察组患者采用腹腔镜联合支架治疗,对照组患者采用开腹联合支架治疗。对比分析两组的术后情况、应激反应情况及细胞免疫功能变化情况。结果与对照组相比,观察组术后排气时间短,抗生素使用时间短,术后住院时间短,住院费用高,术后72 h CRP水平低,术后72 h CD3~+、CD4~+/CD8~+水平高,差异均有统计学意义(P0.05)。与对照组相比,观察组术后并发症发生率低,但差异无统计学意义。结论相比开腹联合支架治疗,腹腔镜联合支架治疗左半结肠癌伴梗阻患者,术后消化道功能恢复快,应激反应较轻,对细胞免疫功能影响较小,住院时间短,近期疗效优势明显。     

Crumbs3 is a critical factor that regulates invasion and metastasis of colon adenocarcinoma via the specific interaction with FGFR1

Epithelial cell polarity regulator Crumbs3 (Crb3), a mammalian homolog within the Drosophila Crb gene family, was initially identified as an essential embryonic development factor. It is recently implicated in tumor suppression, though its specific functions are controversial. We here demonstrate that Crb3 strongly promotes tumor invasion and metastasis of human colon adenocarcinoma cells. Crb3 centrality to tumor migration was supported by strong expression at invasive front and metastatic foci of colonic adenocarcinoma of the patient tissues. Accordingly, two different Crb3-knockout (KO) lines, Crb3-KO (Crb3 −/−) DLD-1 and Crb3-KO WiDr from human colonic adenocarcinomas, were generated by the CRISPR-Cas9 system. Crb3-KO DLD-1 cells exhibited loss of cellular mobility in vitro and dramatic suppression of liver metastases in vivo in contrast to the wild type of DLD-1. Unlike DLD-1, Crb3-KO WiDr mobility and metastasis were unaffected, which were similar to wild-type WiDr. Proteome analysis of Crb3-coimmunopreciptated proteins identified different respective fibroblast growth factor receptor (FGFR) isotypes specifically bound to Crb3 isoform a through their intracellular domain. In DLD-1, Crb3 showed membranous localization of FGFR1 leading to its functional activation, whereas Crb3 bound to cytoplasmic FGFR4 in WiDr without FGFR1 expression, leading to cellular growth. Correlative expression between Crb3 and FGFR1 was consistently detected in primary and metastatic colorectal cancer patient tissues. Taking these together, Crb3 critically accelerates cell migration, namely invasion and metastasis of human colon cancers, through specific interaction to FGFR1 on colon cancer cells.