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1.
目的:探讨蟾蜍灵诱导人宫颈癌C33A细胞自噬的作用。方法:不同浓度梯度的蟾蜍灵处理人宫颈癌C33A细胞,选用CCK-8法检测蟾蜍灵对人宫颈癌C33A细胞的杀伤作用。透射电镜观察给药后C33A细胞的自噬现象。流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)水平,蛋白免疫印迹法检测自噬LC3蛋白表达及相关信号通路JNK、p-JNK蛋白表达。结果:蟾蜍灵对人宫颈癌C33A细胞的生长抑制作用呈时间-剂量依赖性。蟾蜍灵给药后可诱导C33A细胞发生自噬,蛋白印迹实验结果表明LC3蛋白表达随药物浓度升高而增加。蟾蜍灵诱导C33A细胞自噬发生与其促ROS水平升高激活了JNK信号通路有关。结论:蟾蜍灵诱导C33A细胞自噬的机制可能与通过ROS/JNK通路促进细胞自噬有关,以此发挥其抗肿瘤的作用。  相似文献   
2.
摘要目的:研究蟾毒灵对人膀胱癌T24细胞增殖和凋亡的影响,初步探讨其在膀胱癌中的抗肿瘤机制。方法:采用MTT法测定蟾毒灵对人膀胱癌T24细胞增殖的影响;流式细胞术(FCM)检测蟾毒灵对癌细胞凋亡和细胞周期的影响;RT—PCR法检测癌细胞周期蛋白D1(CyclinDl)基因表达情况。结果:蟾毒灵可抑制人膀胱癌T24细胞的增殖,并呈现出时间和浓度依赖性;蟾毒灵能诱导T24细胞凋亡;20nmol/L浓度的蟾毒灵预处理膀胱癌T24细胞后,与对照组(36.42%)进行比较,可分别在12h(69.76%)和24h(88.14%)显著诱导细胞G0/G1期阻滞(P〈0.05),且可降低膀胱癌T24细胞的CyclinDlmRNA表达水平。结论:蟾毒灵能显著抑制人膀胱癌T24细胞增殖,诱导T24细胞G0/G1周期阻滞,下调人膀胱癌T24细胞CyclinDl基因表达。  相似文献   
3.
目的 探讨华蟾素对肾癌细胞侵袭和迁移的影响,并探讨其对Wnt/β-catenin信号通路的调控机制。方法将肾癌细胞分为对照组(添加PBS)和华蟾素组(添加华蟾素),CCK-8法检测细胞增殖力,Transwell侵袭和细胞迁移法检测细胞侵袭和迁移力,流式细胞检测细胞凋亡和细胞周期,免疫蛋白印迹法检测Wnt/β-catenin和上皮间质变(epithelial mesenchymal transition,EMT)信号通路相关蛋白表达。结果与对照组相比,华蟾素组可抑制肾癌细胞增殖,抑制细胞侵袭和迁移力,促进细胞凋亡,阻滞细胞周期 (P<005);E-cadherin蛋白表达上调(P<005),Wnt/β-catenin、N-cadherin、Vimentin蛋白表达下调(P<005)。结论华蟾素可通过调控Wnt/β-catenin信号通路,逆转EMT,抑制肾癌细胞增殖和侵袭。  相似文献   
4.
目的 建立检测大鼠血浆中3种蟾蜍甾烯类化合物蟾毒灵、华蟾酥毒基及酯蟾毒配基的HPLC法,并用于蟾酥在大鼠体内的药动学研究。方法 分别于大鼠尾iv给予蟾酥提取物0.8 mg/kg后2、5、10、15、20、30、45、60、90 min,眼眶取血,采用乙腈沉淀蛋白与液液萃取相结合方法进行血浆样品预处理,以HPLC法测定大鼠血浆中蟾毒灵、华蟾酥毒基及酯蟾毒配基的质量浓度,以Kinetica软件拟合药动学参数。结果 蟾毒灵、华蟾酥毒基及酯蟾毒配基均得到很好的分离,重现性、精密度、线性关系良好,达到体内分析要求;经非房室模型拟合,得到蟾毒灵、华蟾酥毒基及酯蟾毒配基在大鼠体内主要药动学参数;iv给药30 min时,血药浓度均降至Cmax的1/5以下。结论 建立的蟾毒灵、华蟾酥毒基及酯蟾毒配基血药浓度测定方法操作简单、结果准确可靠;蟾蜍甾烯类成分在大鼠体内代谢较为迅速,所得数据可为蟾酥提取物的药动学研究提供参考。  相似文献   
5.
阐述近年来蟾毒灵抗肿瘤作用具体机制的研究进展。蟾毒灵抗肿瘤的机制主要体现在诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞增殖、抑制肿瘤血管形成等方面,同时以蟾毒灵为基础衍生的抗肿瘤药物可以优化蟾毒灵的抗肿瘤作用,减少其副作用。  相似文献   
6.
Bufalin is a bufanolide steroid compound in Chan Su. Chan Su is a traditional Chinese medicine prepared from the dried white secretion of the auricular and skin glands of toads and has been used as an oriental drug. However, the effect of bufalin on cardiac function and its underlying cellular mechanisms remain unclear. Here, we explore the cellular mechanisms of bufalin on myocardial protection via the whole‐cell patch‐clamp recording and video‐based edge detection system. Exposure to bufalin resulted in a concentration‐dependent blockade of ICa‐L, with the half‐maximal inhibitory concentration (IC50) of 60 μm and the maximal inhibitory effect of 71.50 ± 2.67%. Bufalin at 100 μm reduced cell shortening by 33.83 ± 4.01%. Bufalin restrained L‐type Ca2+ channels conductance, and contractility in rat ventricular myocytes. Thus, the protective effects of bufalin on the heart may be determined by the inhibitory effect on ICa‐L and the negative inotropic action caused by the decrease of intracellular Ca2+ in rat myocardial cells.  相似文献   
7.
蟾蜍类中药传统以内服经全身抗乳腺癌,或外敷以局部治疗晚期乳腺癌,但应用较少。近年研究显示,蟾蜍类中药制剂及单体具有多途径、多靶点抗肿瘤特性,其有效成分能诱导乳腺癌细胞凋亡、抑制细胞增殖及增敏化疗药物实现耐药逆转,有良好的抗乳腺癌效果。本文对蟾蜍类中药制剂和有效单体的抗乳腺癌效果和机制进行综述,蟾蜍类中药制剂和有效单体能通过2种途径诱导乳腺癌细胞凋亡,并针对有效单体蟾毒灵联合化疗药物起到减毒增效及耐药逆转作用提出与介入治疗结合的整合医疗治疗乳腺癌的设想进行讨论,以期为乳腺癌精准治疗提供参考。  相似文献   
8.
目的:探讨蟾毒灵对人肝癌细胞HepG2细胞周期的影响及其相关机制。方法:MTT方法检测蟾毒灵单体对肝癌细胞HepG2的生长抑制作用;FCM法检测蟾毒灵单体诱导HepG2细胞周期阻滞的作用;WestelTlblot方法观察蟾毒灵单体对细胞周期相关蛋白的作用。结果:蟾毒灵能够抑制HepG2细胞的生长,该抑制作用呈时间和剂量依赖性。蟾毒灵能够诱导HepG2细胞周期阻滞于G2/M期。蟾毒灵对HepG2细胞周期的阻滞作用可能与cyclinB1、CDK1的表达下调有关。结论:蟾毒灵能够通过下调细胞周期相关蛋白的表达,诱导HepG2细胞阻滞于G2/M期。  相似文献   
9.
目的:探讨蟾蜍灵(bufalin)对脂多糖(LPS)诱导的大鼠肾小球系膜细胞(GMC)增殖及细胞外基质(ECM)分泌的影响.方法:体外培养大鼠肾小球系膜细胞,分为对照组、LPS刺激组(LPS5mg/L)和蟾蜍灵干预组(LPS5mg/L和蟾蜍灵1×10-8mol/L),应用台盼蓝拒染法检测蟾蜍灵对GMC的细胞毒性作用,通过MTT、流式细胞技术检测GMC增殖变化,RT-PCR检测转化生长因子-β1(TGF-β1)的mRNA的表达,ELISA法检测GMC培养上清中纤维连接蛋白(FN)及TGF-β1的表达.结果:MTT结果显示蟾蜍灵浓度在1×10-8mol/L及以上时呈剂量依赖性抑制GMC增殖(P<0.01).细胞周期分析显示蟾蜍灵组S期细胞比例较脂多糖组降低(P<0.01).蟾蜍灵干预组与脂多糖组相比TGF-β1的mRNA相对表达量减少(P<0.05),FN,TGF-β1蛋白分泌量减少(P<0.01).结论:蟾蜍灵对LPS作用后肾小球系膜细胞增殖及细胞外基质分泌具有抑制作用.  相似文献   
10.
目的用HPLC法测定蟾皮中蟾蜍灵、脂蟾毒配基、华蟾蜍精等成分的含量。方法样品经乙醇室温浸渍提取,采用HPLC法测定。色谱柱为DiamonsilTMC18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-乙腈-水(体积比为4∶1∶5),流速为1.0 mL.min-1,检测波长为296 nm,柱温为40℃。结果蟾蜍灵、脂蟾毒配基和华蟾蜍精分别在0.0848~0.5088、0.0884~0.5304和0.2000~1.2000μg内与色谱峰面积线性关系良好,相关系数r分别为0.9999、0.9992和1.0000。蟾蜍灵、脂蟾毒配基和华蟾蜍精的平均回收率分别为99.3%、99.6%和99.0%,RSD分别为0.5%、0.2%和0.6%(n=9)。结论HPLC法可用于蟾皮中蟾蜍灵、脂蟾毒配基和华蟾蜍精的含量测定。  相似文献   
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