全文获取类型
收费全文 | 29876篇 |
免费 | 2797篇 |
国内免费 | 984篇 |
专业分类
耳鼻咽喉 | 125篇 |
儿科学 | 1202篇 |
妇产科学 | 1012篇 |
基础医学 | 1970篇 |
口腔科学 | 443篇 |
临床医学 | 1875篇 |
内科学 | 2656篇 |
皮肤病学 | 258篇 |
神经病学 | 1355篇 |
特种医学 | 853篇 |
外国民族医学 | 2篇 |
外科学 | 1389篇 |
综合类 | 4217篇 |
一般理论 | 3篇 |
预防医学 | 2781篇 |
眼科学 | 1143篇 |
药学 | 7974篇 |
13篇 | |
中国医学 | 3628篇 |
肿瘤学 | 758篇 |
出版年
2023年 | 471篇 |
2022年 | 658篇 |
2021年 | 925篇 |
2020年 | 1047篇 |
2019年 | 854篇 |
2018年 | 799篇 |
2017年 | 993篇 |
2016年 | 967篇 |
2015年 | 933篇 |
2014年 | 1918篇 |
2013年 | 2035篇 |
2012年 | 2036篇 |
2011年 | 2225篇 |
2010年 | 1805篇 |
2009年 | 1538篇 |
2008年 | 1585篇 |
2007年 | 1674篇 |
2006年 | 1443篇 |
2005年 | 1291篇 |
2004年 | 975篇 |
2003年 | 862篇 |
2002年 | 725篇 |
2001年 | 608篇 |
2000年 | 492篇 |
1999年 | 436篇 |
1998年 | 315篇 |
1997年 | 288篇 |
1996年 | 307篇 |
1995年 | 308篇 |
1994年 | 305篇 |
1993年 | 222篇 |
1992年 | 230篇 |
1991年 | 180篇 |
1990年 | 171篇 |
1989年 | 202篇 |
1988年 | 151篇 |
1987年 | 112篇 |
1986年 | 101篇 |
1985年 | 166篇 |
1984年 | 157篇 |
1983年 | 87篇 |
1982年 | 107篇 |
1981年 | 90篇 |
1980年 | 119篇 |
1979年 | 71篇 |
1978年 | 62篇 |
1977年 | 47篇 |
1976年 | 53篇 |
1975年 | 50篇 |
1938年 | 30篇 |
排序方式: 共有10000条查询结果,搜索用时 15 毫秒
1.
目的 基于重叠延伸PCR(SOE PCR)技术构建转录因子EB(TFEB)丝氨酸114位点突变体原核表达质粒,并进行体外诱导表达和纯化。 方法 根据SOE PCR技术原理设计突变引物,以pGEX-6p-1-TFEB质粒为模板,分别采用外侧引物F和R及突变引物Fn和Rn进行第1步PCR扩增,获得含突变位点的产物1和产物2。经第2步PCR退火延伸对产物1和产物2进行重叠拼接,以拼接后DNA片段为模板,采用外侧引物F和R进行第3步PCR扩增获得含突变位点的目的DNA;将其克隆至pGEX-6p-1载体,采用BamH Ⅰ和Sal Ⅰ进行酶切鉴定,DNA测序验证突变结果。于大肠杆菌(E.coli)中分别采用不同浓度异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)在不同条件下诱导TFEB及其突变体重组蛋白表达。Glutathione-Sepharose 4B琼脂糖凝珠分离纯化蛋白,SDS-PAGE凝胶电泳检测纯化产物蛋白浓度和相对分子质量。 结果 第1步PCR扩增获得均含有突变位点的2条DNA片段,经第2步PCR退火延伸和第3步PCR扩增后获得大量含有突变位点的完整DNA片段。双酶切鉴定,连接的DNA片段与目的片段大小一致。DNA测序显示TFEB的114位丝氨酸(TCT)成功突变为丙氨酸(GCT)。在0.5?mmol·L-1 IPTG、16?℃诱导过夜条件下获得TFEB及其突变体的可溶性蛋白表达。SDS-PAGE凝胶电泳,纯化后蛋白浓度较高,分子大小正确。 结论 利用SOE PCR技术成功实现了TFEB丝氨酸114位点的定点突变,并且TFEB及其突变体基因在E.coli中成功表达。 相似文献
2.
Xiaoyu Cui Pan Wang Yidian Mo Xuyang Ding Shizhong Chen Hongzhu Guo Qin Hu Zhongjun Li 《中国药学》2022,31(1):23-30
To develop an HPLC-ELSD method for the determination of nine inulin-type fructo-oligosaccharides in inulin, the HPLC-ELSD system consisted of Waters XBridge? Amide column (4.6 mm × 250 mm, 5 μm) with a gradient elution mobile phase consisting of acetonitrile and water at a flow rate of 1.2 mL/min at 30 oC. The detector was an Agilent Technologies 380-ELSD. The drift tube temperature for the ELSD was set at 55 oC with a nitrogen flow rate of 1.8 L/min. The injection volume was 15 μL. The results showed that the detection range for the nine inulin-type fructo-oligosaccharides was 3.81–30.60 μg R2 = 0.99969 for kestose, 3.73–29.97 μg R2 = 0.99981 for nystose, 3.82–30.69 μg R2 = 0.99993 for fructosylnystose, 3.80–30.48 μg R2 = 0.99995 for GF5, 3.73–29.96 μg R2 = 0.99993 for GF6, 3.78–30.30 μg R2 = 0.99983 for GF7, 3.82–30 μg R2 = 0.99989 for GF8, 3.71–29.80 μg R2 = 0.99974 for GF9, 3.61–29.00 μg R2 = 0.99970 for GF10, respectively. The recovery of the nine oligosaccharides ranged between 96.48%–100.84% (n = 6). The method was simple, accurate, and reproducible that it could be used as an analytical method for evaluating the quality of inulin effectively. 相似文献
3.
4.
目的 探讨外周血淋巴细胞绝对计数(ALC)与老年弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者临床特征和R-CHOP方案化疗效果的关系。 方法 回顾性分析2017年1月~2021年2月广元市中心医院血液内科收治的老年DLBCL患者127例的相关资料,均经病理组织学确诊DLBCL且成功接受≥4个疗程R-CHOP方案化疗。依据DLBCL确诊时的ALC测定水平,将入选患者分成低ALC组(ALC<1.0×10 9/L,n=51)和高ALC组(ALC≥1.0×10 9/L,n=76),整理并比较两组系列临床特征指标的差异。依据化疗4个疗程后的疗效评估结果,将入选患者分成缓解组(完全缓解+部分缓解,CR+PR,n=92)和未缓解组(稳定+进展,SD+PD,n=35),并分析ALC水平与R-CHOP方案化疗效果的相关性。 结果 低ALC组临床分期Ⅲ~Ⅳ期、IPI评分3~5分的比重明显高于高ALC组(P<0.05),化疗前ALC水平与IPI评分呈明显负相关(r=-0.720,P<0.05)。低ALC组R-CHOP方案化疗缓解率明显低于高ALC组(P<0.05)。二元Logistic回归分析显示,临床分期Ⅲ~Ⅳ期(OR=1.691,95%CI:1.147~2.540)、IPI评分3~5分(OR=2.457,95% CI:1.561~3.713)和ALC<1.0×10 9/L(OR=1.803,95%CI:1.283~2.615)均是影响R-CHOP方案化疗效果的独立危险因素(P<0.05)。 结论 ALC不仅与老年DLBCL患者临床分期、病情危险分层紧密相关,而且ALC降低是影响R-CHOP方案化疗效果的危险因素。 相似文献
5.
本文报道了1例食管主动脉瘘患者的诊治情况,详细记录了患者的内镜及CT表现,并对患者食管主动脉瘘病变的内镜超声特征做了详细的描述。 相似文献
6.
目的 调查徐州市直属小学学生近视现状,分析教室光环境及学龄对儿童视力的影响。方法 采用整群抽样方法,运用标准对数视力表对直属小学学生进行视力检测;随机抽取4所学校,使用TES-1332A照度计测定教室光环境;计量资料采用t检验或方差分析;计数资料采用χ2检验,等级资料采用秩和检验分析其统计学差异。结果 2018年徐州市小学生近视检出率总体为49.84%(男生45.81%,女生53.88%),女生高于男生(χ2=52.001,P<0.05),且重度近视检出率更高(Z=7.795,P<0.05)。市直属小学生近视检出率54.18%,县区直属小学46.45%,市区高于县区(χ2=47.247,P<0.05)。不同年级近视发生情况不同,二~六年级近视检出率分别为36.03%,40.5%,48.45%,58.77%,65.4%,高年级近视发生率高于低年级(χ2趋势=384.766,P<0.05),且重度近视高于低年级(χ2=742.673,P<0.05)。各检测小学不同楼层间教室黑板以及桌面照度不同 (F=3.894,P<0.05) ,但均符合国家标准。结论 徐州市直属小学学生近视检出率较高,并随学龄延长而加重,女生更严重;监测学校教室光环境符合要求。改善和保护学生视力除了保障教室光环境合格和定期监测外,应进一步探讨影响学生视力的其他因素,共同促进学生视力健康。 相似文献
7.
目的建立金茵利胆口服液的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,以及多成分含量同时测定的方法。方法色谱柱为DIKMA Diamonsil■C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液(梯度洗脱),流速为0.9 mL/min,检测波长为254 nm,柱温为25℃,进样量为20μL。采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)"绘制21批样品的特征图谱,计算相似度;确定共有峰并指认,进行主成分分析,并同时测定8种成分的含量。结果21批样品的特征图谱共有18个共有峰,指认出其中8个特征峰,相似度均不小于0.947,不同批次样品中没食子酸、夏佛塔苷、新橙皮苷、盐酸小檗碱、甘草酸铵在3种主成分中得分较高,8批样品中没食子酸、绿原酸、夏佛塔苷、甘草苷、柚皮苷、新橙皮苷、盐酸小檗碱、甘草酸铵平均含量分别为0.1361,0.1193,0.0919,0.1987,1.3905,1.6550,0.0899,0.0289 g/L。结论所建立的HPLC指纹图谱及8种成分含量同时测定的方法可用于金茵利胆口服液的质量控制。 相似文献
8.
9.
目的采用高效液相色谱-蒸发光散射检测方法(HPLC-ELSD)建立同时测定知母药材中新芒果苷、芒果苷、知母皂苷BⅡ、宝藿苷Ⅰ及知母皂苷AⅢ的含量测定方法。方法采用Agilent poroshell 120 EC-C18柱,流动相采用乙腈-0.2%醋酸水系统,梯度洗脱;柱温为30℃,流速为0.7 ml/min;蒸发光散射检测器以氮气为雾化气,雾化气温度为40℃,漂移管温度为90℃,氮气体积流量为2.0 L/min;进样量为20μl。结果5种成分均能达到基线分离,新芒果苷24.1~386μg/ml(r=0.9993)、芒果苷23.2~371μg/ml(r=0.9986)、知母皂苷BⅡ54.2~867.2μg/ml(r=0.9956)、宝藿苷Ⅰ5.3~84.8μg/ml(r=0.9968)、知母皂苷AⅢ10~160μg/ml(r=0.9989)的浓度范围内呈现良好的线性关系。5种成分的平均加样回收率在101.8%~105.0%之间,重复性RSD小于2.4%,知母药材中上述5种成分含量分别为1.62%、0.82%、7.36%、0.07%、0.34%。结论该方法操作简便、准确、灵敏度高,可用于知母药材的多指标成分定量测定。 相似文献
10.
目的 本实验采用HPLC方法建立来自3个产地15批怀牛膝药材的指纹图谱,并对β-蜕皮甾酮,25R-牛膝甾酮,25S-牛膝甾酮进行含量测定,同时通过化学计量学的方法对15批怀牛膝进行质量评价。方法 选用Waters SunFire C18(150 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,检测波长280 nm,以乙腈-0.1%甲酸水梯度洗脱,流速为1.0 mL·min-1,柱温25℃,进样量10 μL。以β-蜕皮甾酮峰为参照峰,运用软件《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》对15批怀牛膝药材进行相似度分析,使用Metabo Analyst 5.0网站进行聚类热图分析,使用SIMCA 14.1软件进行PCA和PLS-DA分析。结果 标定了31个共有指纹峰,指认了3个已知成分,并对其进行含量测定,化学计量学分析结果将15批怀牛膝药材样品分为3类,并且筛选了不同产地间潜在的差异性成分。结论 该方法具有良好的精密度、重复性以及稳定性,可为怀牛膝的质量评价与控制提供科学依据及参考。 相似文献